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利用免疫共沉淀做两个蛋白的相互作用关系,这么做有问题吗?
想利用免疫共沉淀做两个蛋白的相互作用关系,细胞提取 总蛋白 后,加入蛋白A的一抗,孵育过夜,然后加蛋白珠吸附,洗涤,加入上样 缓冲液 后做WB,检测蛋白A和蛋白B的表达量,请问这么做有问题吗,另外这么做没有内参的话怎么比较各组变化,大家有什么好想法吗
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含有大量醋酸铵废水如何处理?
废水中含有大量的醋酸铵,少量的 氯化钠 、 硫酸钠 等 无机盐 ,求如何处理?目前采取蒸馏的方式
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求助:QTL技术的步骤?
最近需要做QTL,找了几篇文献,但是数据、作图、分析这些方面都不是很清楚,有谁有这个技术的步骤嘛?
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同一个反应有以下两种不同的实验方法有什么优缺点?
在一篇文献中看到对于同一个反应有以下两种不同的实验方法:1.回流状态下反应两个小时;2.室温下搅拌过夜.请问这两种方法各有什么优缺点?请各位朋友发表自己的观点
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求助,低粘度树脂?
请问低粘度,可溶于水,透光性好的 树脂 有哪些? 想用来覆膜。
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AAS磺酸型水性聚氨酯的制备方法问题?
所用原料:H12MDI,PPG2000,AAS(50wt%水溶液),EDA 先根据文献,采用 预聚体 法,即 H12MDI和PPG2000先反应至指定NCO%值,例如R1=1.8,再降温,加丙酮降低粘度,300rpm下,滴加AAS/EDA/水溶液或AAS水溶液到(水为AAS/EDA之和的1倍) 至预聚物/丙酮 混合物 中,例如,理论上H12MDI/(PPG2000+AAS+EDA)或H12MDI/(PPG2000+AAS)的R2=1.4,50摄氏度/保温30min,计划分散成乳液后,残余的NCO,要么不用二胺后扩链,即用水反应,要么继续用EDA后扩链反应掉。但不管条件怎么变,分散的乳液都是大量毫米或厘米级絮状物在水中,乳液一点蓝光也没有。条件变换:①R1值从1.6至2以上,R2值从1.2到1.6;②AAS/EDA/水溶液 滴加速度从1min加完到20min加完;③滴加AAS/EDA/水溶液时 预聚物/丙酮 混合物的温度从30至50摄氏度;④AAS(含水)占PU质量百分比从3%到7%;⑤加完AAS/EDA/水溶液后的保温温度从30至50摄氏度,保温时间从10min至2h。 另外,我在合成中,R1值大于2时,也出现过”LeonSue520“帖子“磺酸盐水性 聚氨酯 ”中”有做磺酸盐水性聚氨酯的吗,最近做实验很多问题啊,我用的是AAS,IPDI与PBA反应完,降粘,加AAS扩链,发现瓶底有点白色颗粒沉淀,不知道是什么,是AAS吗,不知道有谁遇到过这种情况,求支招“的白色颗粒,但我的是均匀的分散在 PU/丙酮混合物 中的, 我想可能是游离的H12MDI与AAS反应生成的纯硬段,且这些颗粒短时间内(1min)在DMF里也不溶。 然后采用丙酮法,因为看小木虫上已有的帖子,”yejunjie1981“的”高手请入——水性聚氨酯磺酸盐的接入问题“中”沙皇骑士“的回答”R值太大了 R=1.1+0.05最好了“,也得到了楼主的肯定,但重现性不是太好。意思是否是说要把分散前的R值降很低。于是干脆降到理论R=1,结果就分散成功了,乳液泛蓝光,离心无沉降。即,先H12MDI/PPG2000的R=1.6,再加入预聚物2倍的丙酮稀释,50摄氏度下,滴加AAS/EDA/水溶液(1min或20min内加完均可以分散成功),理论上H12MDI/(PPG2000+AAS+EDA)的R=1。AAS(含水)占PU质量百分比为5%。 看结果,好像是分散前,如果理论设计上有-NCO残余,就不能分散成功。但是是为什呢? R=1的丙酮法,重复性也不好,同样的配方,无论 H12MDI/PPG2000的预聚物/丙酮 混合物是30还是50摄氏度,滴加完AAS/EDA/水溶液 后,一会粘度小,一会粘度又大到根本不能分散,而且即使是粘度小,分散成功的乳液,其PH值也在9-10,且物性很差,说明可能由于水参与了与NCO的反应,导致滴加AAS/EDA/水溶液扩链时,活泼H摩尔数远大于NCO摩尔数,造成实际R值远小于1,分子量没扩上去,同时有残余的AAS和EDA,导致PH值偏大。 然后试了一次分散前R=1.1,即H12MDI/PPG2000=1.6,H12MDI/(PPG2000+AAS+EDA)=1.1,AAS(含水)=5%,30摄氏度下,滴加AAS/EDA/水溶液,结果也是粘度大到不能分散。且把这种不能分散的PU/丙酮混合物(不论是R=1还是1.1),直接制膜,其强度明显比R=1且分散成功的那些乳液要好很多。是不是说明了一个问题,在有残余NCO时不能分散成功这个假设的前提下,采用R=1的这种丙酮法,要么分散前 PU/丙酮 粘度小,分子量小,易分散,但强度差,要么分散前 PU/丙酮 粘度大,分子量大,不能分散,但强度高。陷入了一个两难的境地。且丙酮法的丙酮用量太高了,还是想预聚体法能成功就好了,就像常规的DMPA预聚体法那样,用后扩链的方式来提高分子量,从而提高强度。 求各路大神看看,我的预聚体法为什么不能成功,还有既然有那么多人用丙酮法成功了,那他们的关于 分子量/分散前PU丙酮混合物粘度/分散性/物性 的平衡是怎么取舍的。也不知道“@”有用不。@MSCE
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PDI是1,但是图上看很窄的分布啊?
小弟做的是一个 聚合物 纳米材料(PDMAEMA),之前测过DLS是100 nm,SEM看出来也是100 nm. 但是最近和负载上某个药物后,测DLS数据很奇怪,竟然是10 nm,而且PDI=1. 百思不得其解,所以问问各位,有没有好建议。 捕获.PNG
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#PDI
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如何通过NCBI查找目的基因上下游同源臂?
我准备做基因敲除,采用red同源重组法,在设计同源臂引物的时候遇到了问题,通过BLAST我查找到了该基因在菌种 基因组 DNA中的位置(如图,是个contig),但是在这里只显示了匹配的区域,两侧的同源臂没有显示出来,然后我下载了contig,用DNAMAN作序列比对,结果没有匹配区域,为什么会这样呢?另外我观察到在匹配中subject从大到小,这样表示基因组中该contig应该反过来排吗?生物信息学的知识匮乏,麻烦知道的朋友解答一下,该怎么找同源臂啊 360截图1637061793126140.png
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压力管道带压焊接技术?
液氨 管道(0.9Mpa)如何采取带压焊接。
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油溶香精和水溶香精哪个做洗衣液更留香?
请问各路大神,油溶性和 水溶性香精 做 洗衣液 哪个更能持久留香,有厂家说油溶性才能持久,有有厂家说这个与油溶性水溶性无关主要浓度,求助大家
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复乳制备的问题,请各位指教。?
我现在在做乳化硅烷膏体,通过实验,如果使用单一的O/W体系,因为硅烷容易与水发生反应,得到的膏体十分不稳定,因此想制备成O1/O2/W复乳体系,既增加油相O2作为中间层,以防止硅烷与水接触而反应。油相O2用的是 八甲基硅油 ,现在的问题是,怎样才能制备得到O1/O2初乳呢?该不该使用 乳化剂 ?使用什么乳化剂?求各位大神指教!(PS:硅烷于八甲基硅油是互溶的)
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细胞转染效率低的原因及解决方案?
细胞转染 是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,转染难度更大。现分享几个细胞转染实验常见的几个陷阱,望实验人员能够注意。 1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的 质粒提取试剂盒 都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀:将提完质粒后或者提的最后一步,用75%乙醇沉淀,这样就除菌了。 3.质粒质量问题 转染用的质粒首先要保证数量,一般为2μg以上。质粒纯度不够或者含有细菌LPS或其他对细胞有毒害作用的物质,也会影响转染效率。这个时候,就应该对质粒进行纯化和浓缩。 4.细胞状态不好 细胞状态不好,会导致转染效率低下。一般进行转染的细胞应该处于对数生长期。如果是贴壁细胞的话,贴壁率应该在70-80%;如果是悬浮细胞的话,应该是6×105个/孔(24孔板),一般是转染前一天换液,转染前用无血清培养基或PBS洗细胞一次。 5.转染试剂问题 脂质体试剂毒性较大,易造成细胞死亡和转染效率底下。可选择非 脂质体转染试剂 ,如Entranster试剂。
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请问电压比容量做出来为什么下面多一节封闭了,怎么删除啊?
如图,下面多了一节把图形封闭了
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盐酸左西替利嗪?
各位高手: 有谁做过 盐酸左西替利嗪 这个项目啊?含量测定的时候可否用氰基柱?依据何在?进口标准上用的是C18柱, 庚烷磺酸钠 和乙腈做 流动相 ,但跑出来的峰严重拖尾,很不好看,怎么办?我个人认为,进口标准时2003年的,而且按该标准的方法测含量,样品浓度高,峰拖尾,降低浓度后,依然拖尾,申报时能否不按进口标准,而依据其他注册标准的方法呢? 望各位不吝赐教,在此谢过各位了。
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杂质分离中制备液相的选择?
请问做药企的 杂质 分离这块, 要想选择 一台半制备液相 都主要看液相的哪些参数啊 目前药企用的都是什么公司型号的 制备量都大约多少啊 还有 赛默飞世尔的Ultiate3000 LCi 高效液相半制备液相 怎么样啊
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残留溶剂使用混合溶剂(DMF:水=4:1),可以直接进样不?
残留溶剂使用混合溶剂(DMF:水=4:1),可以直接进样不,好像说溶剂中有水,直接进样对 色谱柱 不好,是直接进样好还是顶空进样好啊? 还有,合成样品中用到三乙胺、六 甲基 六硅胺烷、 乙酸 酐,都需要测残留溶剂吗?
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炉管破裂有什么现象?如何处理?
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求DNA测序机构?
求推荐国家认可的DNA测序机构!
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标準莫耳生成焓与相对熵的求法(下)?
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临床药物怎么找?
想问一下各位弟兄姐妹,FDA正在做临床I II III期的药物有多少怎么找全它? 还有就是10年内在FDA临床失败的药物有哪些,通过什么途径找? 谢谢各位了小弟菜鸟不怎么懂!
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简介
职业:江苏明化合晟生物科技有限公司 - 售后技术工程师
学校:长江大学 - 化学与环境工程学院
地区:河南省
个人简介:
她们把自己恋爱作为终极目标,有了爱人便什么都不要了,对社会作不了贡献,人生价值最少。
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