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如何通过NCBI查找目的基因上下游同源臂？我准备做基因敲除，采用red同源重组法，在设计同源臂引物的时候遇到了问题，通过BLAST我查找到了该基因在菌种基因组 DNA中的位置（如图，是个contig），但是在这里只显示了匹配的区域，两侧的同源臂没有显示出来，然后我下载了contig，用DNAMAN作序列比对，结果没有匹配区域，为什么会这样呢？另外我观察到在匹配中subject从大到小，这样表示基因组中该contig应该反过来排吗？生物信息学的知识匮乏，麻烦知道的朋友解答一下，该怎么找同源臂啊 360截图1637061793126140.png查看更多 1个回答 . 12人已关注

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压力管道带压焊接技术？ 液氨管道(0.9Mpa)如何采取带压焊接。查看更多 1个回答 . 5人已关注

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油溶香精和水溶香精哪个做洗衣液更留香？请问各路大神，油溶性和水溶性香精做洗衣液哪个更能持久留香，有厂家说油溶性才能持久，有有厂家说这个与油溶性水溶性无关主要浓度，求助大家查看更多 2个回答 . 13人已关注

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复乳制备的问题，请各位指教。？我现在在做乳化硅烷膏体，通过实验，如果使用单一的O/W体系，因为硅烷容易与水发生反应，得到的膏体十分不稳定，因此想制备成O1/O2/W复乳体系，既增加油相O2作为中间层，以防止硅烷与水接触而反应。油相O2用的是八甲基硅油，现在的问题是，怎样才能制备得到O1/O2初乳呢？该不该使用乳化剂？使用什么乳化剂？求各位大神指教！(PS:硅烷于八甲基硅油是互溶的)查看更多 5个回答 . 1人已关注

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细胞转染效率低的原因及解决方案？细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题，尤其是原代细胞转染，转染难度更大。现分享几个细胞转染实验常见的几个陷阱，望实验人员能够注意。 1.准备不足做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染细胞污染也是造成细胞死亡，转染效率低下的一大原因。首先，转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀：将提完质粒后或者提的最后一步，用75％乙醇沉淀，这样就除菌了。 3.质粒质量问题转染用的质粒首先要保证数量，一般为2μg以上。质粒纯度不够或者含有细菌LPS或其他对细胞有毒害作用的物质，也会影响转染效率。这个时候，就应该对质粒进行纯化和浓缩。 4.细胞状态不好细胞状态不好，会导致转染效率低下。一般进行转染的细胞应该处于对数生长期。如果是贴壁细胞的话，贴壁率应该在70-80%；如果是悬浮细胞的话，应该是6×105个/孔（24孔板），一般是转染前一天换液，转染前用无血清培养基或PBS洗细胞一次。 5.转染试剂问题脂质体试剂毒性较大，易造成细胞死亡和转染效率底下。可选择非脂质体转染试剂，如Entranster试剂。查看更多 1个回答 . 2人已关注

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请问电压比容量做出来为什么下面多一节封闭了，怎么删除啊？ 如图，下面多了一节把图形封闭了查看更多 4个回答 . 14人已关注

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盐酸左西替利嗪？各位高手：有谁做过盐酸左西替利嗪这个项目啊？含量测定的时候可否用氰基柱？依据何在？进口标准上用的是C18柱，庚烷磺酸钠和乙腈做流动相，但跑出来的峰严重拖尾，很不好看，怎么办？我个人认为，进口标准时2003年的，而且按该标准的方法测含量，样品浓度高，峰拖尾，降低浓度后，依然拖尾，申报时能否不按进口标准，而依据其他注册标准的方法呢？望各位不吝赐教，在此谢过各位了。查看更多 11个回答 . 15人已关注

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杂质分离中制备液相的选择？请问做药企的杂质分离这块，要想选择一台半制备液相都主要看液相的哪些参数啊目前药企用的都是什么公司型号的制备量都大约多少啊还有赛默飞世尔的Ultiate3000 LCi 高效液相半制备液相怎么样啊查看更多 13个回答 . 2人已关注

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残留溶剂使用混合溶剂（DMF:水=4:1），可以直接进样不？残留溶剂使用混合溶剂（DMF:水=4:1），可以直接进样不，好像说溶剂中有水，直接进样对色谱柱不好，是直接进样好还是顶空进样好啊？还有，合成样品中用到三乙胺、六甲基六硅胺烷、乙酸酐，都需要测残留溶剂吗？查看更多 1个回答 . 11人已关注

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炉管破裂有什么现象？如何处理? 查看更多 2个回答 . 3人已关注

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求DNA测序机构？ 求推荐国家认可的DNA测序机构！查看更多 5个回答 . 16人已关注

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标準莫耳生成焓与相对熵的求法（下）？ 查看更多 1个回答 . 13人已关注

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临床药物怎么找? 想问一下各位弟兄姐妹，FDA正在做临床I II III期的药物有多少怎么找全它？还有就是10年内在FDA临床失败的药物有哪些，通过什么途径找？谢谢各位了小弟菜鸟不怎么懂！查看更多 7个回答 . 16人已关注

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仿制药中如何做到口感气味跟原药一样，求高人指点？复方仿制药中如何做到口感气味跟原药一样，需要用什么仪器来分析成分，如果原药加的是香精能否分析得出来是加什么香精，用一下仪器可不可以分析出来FTIR，PY-GC-MS、LC-MS、IC、NMR、TGA、DSC 求高人指点查看更多 10个回答 . 19人已关注

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谁能帮我查下骨松宝和仙灵骨葆这几年的销售数据? 谁能帮我查下骨松宝和仙灵骨葆这几年的销售数据？谢谢啦。查看更多 1个回答 . 18人已关注

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求Sivextro(tedizolid phosphate，磷酸泰地唑胺)汤森路透社报告？ 求Sivextro(tedizolid phosphate，磷酸泰地唑胺 )汤森路透社报告查看更多 3个回答 . 6人已关注

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请教一下各位朋友这种药应该按几类药申报啊? 举个例子：一个原来已经上市的化合物（化学药），改变其盐类的酸根或者碱基，按我国药品注册管理法应该是按化药4类药申报，但是如果这个酸根或者碱基也是有药理活性的，并且改变了原来药的药理作用，那么应该按几类药申报呢？例如非诺贝特酸变为胆碱非诺贝特，并且这两种药物的代谢均跟单药不同谢谢！！！查看更多 7个回答 . 10人已关注

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关于白蛋白纳米粒稳定性的问题？主药是水难溶性药物，载体是白蛋白，用高压均质法制备白蛋白纳米粒，主要方法就是：主药（90mg）溶在二氯甲烷（9ml）中成有机相，水相是1%的牛血清白蛋白（81ml），然后在低转速匀浆的过程中把有机相注入水相中，5分钟后转移到高压均质机进行均质（1200bar、5个循环），最后40℃旋蒸20分钟除去有机溶剂，得到纳米胶体溶液，在此过程中发现一些问题请教大家。 1、在旋蒸除有机溶剂时就有白色微粒析出，请问这是什么原因导致的？ 2、测得的包封率和载药量很低很低，制备方法是不是有什么问题，求指教 3、大家对于测包封率和载药量时样品的前处理是怎么样的，就是测游离药物和总药物的进样前处理查看更多 1个回答 . 12人已关注

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咨询3+3与3+6的区别？个人从事化药研发；做过几个3+3的化药，都是按照1-32号资料申报的。发补的时候写过CTD的格式。但了解不多。目前准备入手的一个因为原研刚申请进口；后期降类可能极大。就是3+6类了听说6类需要厂家协同，但是我们是一个纯研发的单位，没有认证过的车间。 1、请问研发具体实施过程与3+3有何不同？？ 2、小试实验批、中试放大批是否和3+3一致？最后3批的注册申报批需要认证过的车间协同？？ 3、如果需要，需从那一批就开始按照CTD的要求写批生产记录？？补充问一下，原研公司申请的抗癌药，刚批临床，一般要多久才能上市？？？不清楚能不能赶在上市前按3类递上材料去。然后等上市后再撤申请，再按6类重新注册。重新注册是否需要重新在认证过的车间做实验？？查看更多 6个回答 . 16人已关注

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多肽制剂冻干转水针？我们现在想仿制国外的一种多肽冻干制剂，但剂型改为水针。那么问题来了，制剂的稳定性是最大的难题，需要添加一定的稳定剂进去。那么在稳定剂筛选的时候是应该选择6℃（长期条件）还是25℃（加速条件）？6℃当然最可靠，但速度回很慢，有可能几年也做不出来；25℃可以加快降解速度快速比较出处方间的优劣，问题是25℃比较出的趋势和4℃比较的趋势是相同的吗？在稳定剂筛选的时候是应该一种一种的试，还是筛出一种有效的，先把这一稳定剂作为确定要加入的辅料，再在此基础上添加新的辅料？好苦恼啊，完全没有相关经验，哪位朋友做过请不吝赐教，小虫万分感谢！查看更多 13个回答 . 17人已关注

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简介

职业：江苏明化合晟生物科技有限公司 - 售后技术工程师

学校：长江大学 - 化学与环境工程学院

地区：河南省

个人简介：她们把自己恋爱作为终极目标，有了爱人便什么都不要了，对社会作不了贡献，人生价值最少。查看更多

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