如何利用免疫球蛋白结合蛋白进行多物种口蹄疫检测? 免疫球蛋白结合蛋白A(SPA)、蛋白G(SPG)和蛋白L(PPL)是具有免疫球蛋白结合能力的蛋白质。它们可以结合多种哺乳动物的免疫球蛋白,具有广泛的应用前景。 免疫球蛋白结合蛋白的应用 免疫球蛋白结合蛋白A、蛋白G和蛋白L都是免疫球蛋白结合分子,对哺乳动物免疫球蛋白上的特殊位点具有高亲和性。它们在细菌的致病性中扮演重要角色。金黄色葡萄球菌产生的蛋白A(SPA)和链球菌产生的蛋白G(SPG)可以结合哺乳动物免疫球蛋白的Fc部位,而大消化链球菌产生的蛋白L(PPL)只结合哺乳动物免疫球蛋白的κ型轻链。这三种蛋白在结构和功能上有相似和不同之处,每种蛋白都不能单独结合所有哺乳动物免疫球蛋白。它们的单个结构域已被证实具有结合免疫球蛋白的功能。 重组Protein A/G/L基因构建目的 为了开发一种能够同时检测多种动物口蹄疫感染的通用ELISA方法,研究人员对SPA、SPG和PPL的单个结构域基因进行了优化和人工合成,使其在大肠杆菌中可溶性融合串联表达。优选出的重组蛋白经过纯化和标记后,通过Western blot和ELISA检测,证明其可以与多种哺乳动物免疫球蛋白结合。这些重组蛋白可以作为哺乳动物血清学检测中的通用抗体,替代传统的抗免疫球蛋白抗体,为口蹄疫的检测提供方便和可靠的技术支持。 参考文献 [1] 串联表达蛋白A/G/LIg结合结构域及其在口蹄疫鉴别诊断中的应用 [2] YANG HUA, CAO JIE, LI LIAN-QING et al. Evolutional selection of a combinatorial phagelibrary displaying randomly-rearranged various single domains of immunoglobulin (Ig)-binding proteins (IBPs) with four kinds of Ig molecules[J]. BMC Microbiology, 2008, 8(137):1471-1478.查看更多
胃粘膜上皮细胞提取物的研究及应用? 胃粘膜上皮细胞提取物是从小鼠胃粘膜上皮细胞中提取的,可用于基因克隆、表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 上皮细胞是覆盖身体表面和腔面的细胞,具有明显的极性。它们在保护、吸收、分泌和排泄等方面起着重要作用。 胃粘膜由上皮、固有层及粘膜肌层3层组成,其中顶细胞、壁细胞、主细胞是胃粘膜最主要的三种细胞。小鼠胃粘膜上皮细胞具有很高的更新速度,各种上皮细胞具有不同的代谢周期,处于一种动态的、精致的平衡之中。 胃粘膜是胃壁最内层的粘膜,具有保护胃壁的功能。胃粘膜的结构和稳定受到细胞分化、增殖和凋亡的影响,这也是导致胃相关疾病发生的原因之一。 胃粘膜上皮细胞提取物的应用 胃粘膜上皮细胞提取物可用于构建胃粘膜上皮细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠。 胃粘膜上皮细胞的更新速度和功能改变与胃相关疾病的发生密切相关。 顶细胞和壁细胞是胃粘膜上皮细胞中最重要的细胞类型,它们分别具有保护和分泌功能。 参考文献 [1]Cigarette smoking,body mass index,gastro-esophageal reflux disease,and non-steroidal anti-inflammatory drug use and risk of subtypes of esophageal and gastric cancers by P53 overexpression[J].Jonine D.Figueroa,Mary Beth Terry,Marilie D.Gammon,Thomas L.Vaughan,Harvey A.Risch,Fang-Fang Zhang,David E.Kleiner,William P.Bennett,Christine L.Howe,Robert Dubrow,Susan T.Mayne,Joseph F.Fraumeni,Wong-Ho Chow.Cancer Causes&Control.2009(3) [2]Cellular Origin of Gastric Cancer[J].Sherif M.Karam.Annals of the New York Academy of Sciences.2008(1) [3]Gastric Mucosal Defense and Cytoprotection:Bench to Bedside[J].Loren Laine,Koji Takeuchi,Andrzej Tarnawski.Gastroenterology.2008(1) [4]The gastrointestinal tract stem cell niche[J].Tzung-Hai Yen,Nicholas A.Wright.Stem Cell Reviews.2006(3) [5]Tissue‐specific and inducible Cre‐mediated recombination in the gut epithelium[J].FatimaEl Marjou,Klaus‐PeterJanssen,BennyHung‐Junn Chang,MeiLi,ValérieHindie,LawrenceChan,DanielLouvard,PierreChambon,DanielMetzger,SylvieRobine.Genesis.2004(3) [6]Histopathology and expression of Ki-67 and cyclooxygenase-2 in childhood Helicobacter pylori gastritis[J].Kyung Mo Kim,Young Lyun Oh,Jae Sung Ko,Yon Ho Choe,Jeong Kee Seo.Journal of Gastroenterology.2004(3) [7]Mechanisms of TGF-βSignaling from Cell Membrane to the Nucleus[J].Yigong Shi,Joan Massagué.Cell.2003(6) [8]赵增明.胃粘膜上皮细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的构建[D].中国人民解放军军事医学科学院,2009.查看更多