如何使用植物血凝素(PHA)ELISA试剂盒测定样本中的PHA水平?

本试剂盒采用双抗体夹心法来测定样本中的植物血凝素(PHA)水平。首先，将纯化的植物血凝素(PHA)抗体包被在微孔板上，形成固相抗体。然后，依次加入植物血凝素(PHA)样本和HRP标记的植物血凝素(PHA)抗体，使其与固相抗体结合，形成抗体-抗原酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色反应。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，然后在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的植物血凝素(PHA)水平呈正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，并通过标准曲线计算样品中植物血凝素(PHA)的浓度。

试剂盒组成

使用植物血凝素(PHA)ELISA试剂盒需要注意的事项

1. 从冷藏环境中取出试剂盒后，应在室温平衡15-30分钟后再使用。未使用完的酶标包被板应存放在密封袋中。

2. 浓洗涤液可能会结晶析出，可以在水浴中加温辅助溶解，结晶不会影响洗涤结果。

3. 在每个步骤中使用加样器，并经常校对准确性，以避免实验误差。加样时间最好控制在5分钟以内，如果样本数量较多，建议使用排枪加样。

4. 每次测定时，请同时制作标准曲线，并最好做复孔。如果样本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先使用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（XnX5）。

5. 封板膜只能使用一次，以避免交叉污染。

6. 底物应避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

8. 所有样品、洗涤液和废弃物都应按传染物处理。

9. 不同批号的试剂盒组分不得混用。

10. 如与英文说明书有任何不一致之处，以英文说明书为准。

主要参考文献

[1] 齐晖，李富荣，戴勇；植物血凝素及脂多糖对人肾小球系膜细胞分泌IL-18的影响。《广东医学》 2000年09期。