人瘦素受体酶联免疫试剂盒的应用及其在人胎胃和小肠组织中的表达？ 人瘦素受体酶联免疫试剂盒是一种用于测定标本中人瘦素受体蛋白水平的方法。该方法利用双抗体夹心法，将纯化的人瘦素受体蛋白抗体包被在微孔板上，形成固相抗体。然后，将瘦素受体蛋白和HRP标记的瘦素受体蛋白抗体依次加入微孔中，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色。根据颜色的深浅可以判断样品中瘦素受体蛋白的浓度。最后，利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中瘦素受体蛋白的浓度。 人瘦素是由白色脂肪组织产生的一种蛋白质。它的前体由167个氨基酸残基组成，经过信号肽的切割后形成146个氨基酸的Leptin。Leptin具有多种生物学效应，其中最重要的是作用于下丘脑的代谢调节中枢，通过抑制食欲、减少能量摄取、增加能量消耗和抑制脂肪合成来发挥作用。 瘦素通过抑制体内神经肽Y（NPY）和agouti-related peptide（AgRP）的活性，增强alpha-melanocortin stimulating hormone（α-MSH）的活性。除了脂肪组织外，瘦素还可以在乳腺上皮细胞、胎盘和胃黏膜上皮细胞中检测到，其受体广泛存在于全身各个组织。人们正在逐步了解瘦素与机体系统的病理生理关系。 人胎胃和小肠组织中瘦素和瘦素受体的表达研究 本研究旨在研究瘦素和瘦素受体在人胎胃和小肠中的表达情况。 研究方法包括HE染色、Grimelius银染和免疫组织化学SABC法。 研究结果显示，在胎儿胃中，14周时可见由单层柱状上皮组成的胃小凹和短小的胃腺。20周时，胃壁和胃腺进一步发育完善。胎儿小肠的分化是从头端向尾端进行的。14周时，十二指肠为较发达的叶状绒毛，空肠为较明显的指状绒毛，回肠则呈低矮的锥体形突起。20周时，十二指肠可见明显的十二指肠腺。胃腺和小肠的发育与瘦素和瘦素受体的表达密切相关。 Grimelius银染结果显示，在14周的胎儿胃上皮和胃腺中可见形态不规则的内分泌细胞。随着胎龄的增长，内分泌细胞的数量先增多，20-23周达到高峰，然后逐渐减少。 免疫组织化学结果显示，在14周的胎儿胃腺中可见瘦素和瘦素受体的表达。随着胃腺的发育，瘦素和瘦素受体的表达细胞数量明显增多。在十二指肠、空肠和回肠中，14周时绒毛上皮细胞均表达瘦素和瘦素受体。随着胎龄的增加，十二指肠中瘦素和瘦素受体的表达强度减弱，30周后十二指肠上皮不再表达瘦素和瘦素受体。 参考文献 [1] Ostlund RE, Yang JN, Klein S, et al. Relation between plasma leptin concentration and body fat, gender, diet, age, and metabolic covariates. The Journal of Clinical Endocrinology. 1996. [2] Zhang Y, Proeca R, Maffei M, et al. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue. Nature. 1994. [3] Fain JN, Coronel EC, Beauchamp MJ, et al. Expression of leptin and B3-adrenrgic receptors in rat adipose tissure in altered thyroid states. Biochemical Journal. 1997. [4] 彭彦霄. 人胎胃和小肠组织形态及瘦素和瘦素受体表达的发育研究[D]. 安徽医科大学, 2004. 查看更多
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