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生物医学工程
,
如何查找pri-miRNA序列或其在基因组中的位置 ?
我觉得您可以从miRNA database 获取pre-miRNA序列,对pre-miRNA序列在GeneBank 上进行blast 就可以获得了,很简单的
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#miRNA
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生物医学工程
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做大鼠肝脏组织,现在做凋亡,请问做什么指标?
Annexin V-FITC/PI 国产晶美的也不错!你检测的细胞没有其他荧光干扰吧,如果有GFP,不能用FITC,因为它们荧光通道相同。
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化学学科
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工艺技术
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溶出度检测,溶出液不过滤能否直接注入色谱仪?
1、不建议直接进样;2、不建议离心,离心容易导致二次溶出;3、更换滤膜品牌、材质,或对滤膜进行预处理。
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化学学科
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工艺技术
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能不能推出加成反应的产物是?
巯基对碳碳双键的共轭加称。 画一个哈,
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生物医学工程
,
做胞内IL-6的WB,但是却没有条带?
IL6 是分泌性表达的。组织细胞中含量比较低。你要确定一下你用的是什么组织。IL6的分子量21-25kDa,一条或2条带。
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生物医学工程
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细胞及分子
,
细胞系表达的蛋白能否用来包被酶标板?
可以用来包被。你可以先对表达的蛋白进行纯化,而后测定纯化后蛋白的浓度,1-5ug/mL的浓度便可以进行后期的包被和ELISA检测。
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20
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生物医学工程
,
冻干后可见异物不合格,怎么办?
1、冻干前溶液:-20℃或-25℃,冻结(时间可能比较长),然后取出,室温下化掉,看看外观和可见异物合格不;同时做一组冻干前溶液,冷藏(0度左右)下放置至少24小时,取出恢复到室温,看看外观和可见异物合格不:合格,继续进行下面的筛查;不合格:处方问题,不改处方很难走下去。 2、第一个实验合格:改变预冻方式——你现在是慢冻法预冻,(1)换用速冻法:先将隔板降温至-40℃,将样品放进去,快速降温预冻;(2)原来的方法预冻后,升温,化掉,再冻:主要是看看是不是不同结晶方式对你的产品有影响;建议最好考察一下晶型,看看复溶好的和复溶不好样品是不是晶型有差别。改变预冻方式有作用,解决;没作用,继续筛查——做到这份上解决不了就很麻烦了,不改处方,光靠调整工艺挺难解决的,查查文献,找找做过类似品种的大神救救你吧。
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化学学科
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大家有没有碰到过产品析出过程发生溶涨现象,而且溶涨的特别厉害?
我也碰到过。 好像没办法解决, 试了很多溶剂, 搅拌速度等, 都没有办法解决。 和物料的性质有关。
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2
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生物医学工程
,
苯酚HPLC法含量测定中的标准品是否需要测水分?
如果说你是要测定样品中苯酚含量,也就是苯酚作为杂质进行控制,兄弟,用AR级别的试剂就可以作为对照品了,需要标定就标定它的纯度,苯酚为固体,呈冰块状,确实不好称量(告诉你一个称量方法:取适量苯酚,放置到顶空瓶里面,扎上盖子,仍到温水里面,苯酚会融化,趁热去称量,直接称在硫酸纸上,苯酚会立即又变成冰状,称量动作要快,最后直接把硫酸纸放到你的量瓶里面进行溶解,最好是称量多一点,多稀释一步,这样带来的误差会小一些)
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生物医学工程
,
淤泥质土采用何种治理方法,最经济高效?
要看淤泥质土的性质怎么样,如果承载力特征值能达到50-60kPa,表层换填2-3m碎石即可,毕竟两层小楼荷载不大。如果淤泥质土的性质实在太差,呈流塑状态,可打些短桩或采用搅拌桩复合地基。温州农村里盖房子好多都打桩的,因为那里的软土性质确实很差。
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生物医学工程
,
phospho-NF-kappaB p65代表什么意义?
在NF-kappaB的活化过程中P65也是要被磷酸化的。 细胞因子(如TNF、IL-1 等)与其特异性跨膜受体结合后,引起后者空间构象的改变,进而激活NF-κB 诱导性激酶(NIK) 。NIK激活IκB激酶( IKK), IKK进一步使p50/ p65/ IκBα三聚体上的IκBα亚基的Ser32和Ser36残基磷酸化。(在这里,如果是IκBβ, IKK是使其Ser19和Ser23残基磷酸化;如果是IκBε, IKK则是使其Ser157和Ser161残基磷酸化) 。已磷酸化的IκBα在泛素连接 酶的作用下进一步泛素化,即在已磷酸化的IκBαN 端的Lys21和Lys22处分别共价结合上泛素(ubiquitin) 分子。磷酸化并泛素化的IκBα发生构象改变,被ATP依赖性26S蛋白酶体识别并降解。于是,受IκB-α抑制的NF-κB 得以释放出来,迅速发生核易位,通过其p50亚基RHD的核定位信号(NLS) 与相应的κB 序列结合,从而启动或增强某些基因的转录,如TNF,IL-1,A20等。
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#kappa
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生物医学工程
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纵坐标的log2 median-centered ratio是怎么计算得到的?
1.是先log2变换,然后归一化。2,3是同一个问题。就是问GEO的分析流程。通常是去背景、标准化,就可得到表达矩阵了。另外,你提到的rma,这不是标准化的方法,而是affy芯片常用的去背景的方法。因此,rma处理后,值还是很大。没毛病。至于你提到的matrix有的GSE数据集大而有的小的问题。一般情况下,GEO数据的matrix文件,都是标准化后的。然而,标准化方法也有很多。值的大小并不能判断是否标准化,而应该用箱式图等方法来判断。
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#rat
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生物医学工程
,
跑板时老是有两个前沿,这是为什么?如何解决?
如果是新板的话,不用处理,用过的板一般都是处理过的,应该不是板的问题,选择的溶剂不是很好就会出现这种现象的,如果展开剂太多淹没了原点也会出现这种现象。
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生物医学工程
,
跑了两个月的WB条带背景很黑,泳道是全黑未见条带,原因何在?
模糊的条带还是有的,那说明就有希望。感觉目前的工作是降背景,那我建议一抗和二抗用脱脂奶粉稀释,然后TBST多洗一两次。曝光时间也可以调短一点
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生物医学工程
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请教扭曲管的网格怎么画?
和螺旋管一样的画法。
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化学学科
,
四氢铝锂后处理,按文献处理,为什么结果成糊状,滤不动?
实验室后处理方法:假定所加氢化铝锂重量为1,则反应后依次加入1份水,1份15%氢氧化钠,3份水,再搅拌数分钟至反应瓶中出现白色沉淀,此时的沉淀为晶状粉末,可轻易抽滤除去。 实验室处理最方便的方法是用十水硫酸钠淬灭。 安全,而且不会生成氢氧化锂等胶体物质从而导致后处理过滤等麻烦。而且 避免了产物被胶体吸附 用水处理不好! 反应完后,可先用2~4当量的乙酸乙酯或无水甲醇处理,然后再用饱和硫酸钠沉降 可是试试其他的。
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#四氢铝锂
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生物医学工程
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之前养细胞的血清断货了,可以用和原先培养条件不同的血清顶替吗?
差的血清影响很大的
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生物医学工程
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这样的PCR 20ul 体系 有问题吗?
首先可以肯定你的体系没有太大的问题,dntp不低 10xbuffer对20ul体系来说只能用2ul,只是建议一下你的引物可以再提高一些 建议用8ul
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生物医学工程
,
phospho-NF-kappaB p65代表什么意义?
nfkb是个二聚体,通常指,P65/P50,存在于细被质,受到刺激,P65被磷酸化进入核,调节转录
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#kappa
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化学学科
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工艺技术
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求合成路线?
什么路线? 合成图中化合物
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简介
职业:寰球工程项目管理(北京)有限公司 - 电气/仪表工程师
学校:西昌学院 - 生化系
地区:江苏省
个人简介:
我渴望随着命运指引的方向,心平气和地、没有争吵、悔恨、羡慕,笔直走完人生旅途。
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