谢阳--盖德问答-化工人互助问答社区

谢阳

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电气/仪表工程师

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用PT67作为包装细胞包病毒是不是也要同时转三个质粒进去? 我的实验需要自己包慢病毒。慢病毒质粒是在sigma上买的。质粒骨架是：SHC001 MISSION? pLKO.1-puro Control Vector，我们实验室有PT67细胞（CRL-12284）了。据我所知，要包慢病毒最常用的是293T细胞。需要同时转三种质粒到293T细胞里去才能产慢病毒。我现在想问的是，293T和PT67细胞有什么区别？用PT67作为包装细胞包病毒是不是也要同时转三个质粒进去？还是只用把shRNA转染进PT67细胞就可以收集上清了啊？谢谢！期待各位高手的宝贵意见！！！查看更多 1个回答 . 15人已关注

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溶出介质中加入了SDS，样品至室温时变白色浑浊，为什么? 两个项目都存在这样的问题。一个项目溶出介质是水+0.2%SDS，一个项目溶出介质是水+3%SDS。配制操作方法均是热水+纯化水，温度大约50-70℃，然后加入SDS搅拌溶解。SDS的牌子是阿拉丁。两个项目做溶出，样品取出来后会逐渐至室温，这个过程中发现样品变浑浊，有白色物质析出（可能是SDS，也可能是药物）。为什么会这样呢？SDS对温度这么敏感么？查看更多 1个回答 . 13人已关注

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测PH值时在溶液中为什么要加氯化钾? 质量标准是这样：取试验液与空白液各20 ml，分别加入氯化钾溶液（1-1000）1ml，照PH值测定法测定，二者之差不得过1.0。我不太明白这里加入氯化钾溶液的作用，望各位指教，谢谢！查看更多 1个回答 . 15人已关注

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对于大鼠灌胃的最大耐受量一般是多少？怎么计算? 我是搞植化的，现在要做血清药理学的前期工作，给大鼠灌胃给药量应为其最大耐受量略低的剂量，请问，如果没有该中药的最大耐受量的资料，一般最大耐受量可以考虑为中药大鼠正常日用量的多少倍？查看更多 1个回答 . 7人已关注

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怎么用微晶尿酸钠（MSU）诱导细胞炎症? M4浓度：0.1μg/mL；M5浓度：1.0μg/mL；M6浓度：10.0μg/mL；M1浓度：0.25mg/mL；M2浓度：0.5mg/mL；M3浓度：1.0 mg/mL。这是Q-PCR的结果， Caspase-1、Nrf-2通路都和理论相反啊……用的细胞是RAW264.7，无血清DMEM为溶剂的MSU混悬液刺激24h，用的尿酸钠是sigma的尿酸钠，在水中溶解重结晶得的针晶，不是文献里面那些尿酸和氢氧化钠制成的。反应制得尿酸钠的方法试过一下，在pH8.9的情况下得出了针晶，但是大部分都聚成一团，而且抽滤、98度干燥后都变成一坨，失去针晶了，请问大家是怎么把针晶从溶液中分离出来的？查看更多 1个回答 . 8人已关注

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除氧器结构及工作原理.ppt？ 除氧器结构及工作原理.ppt (541 KB, 下载次数: 7, 售价: 5 点财富) 昨天07:23 上传点击文件名下载附件查看更多 4个回答 . 18人已关注

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双氧水构建凋亡模型不起作用怎么办? 根据文献，我用双氧水处理鸭胚成纤维细胞DEF，之前摸过浓度梯度，有两次在400uM双氧水处理DEF 24h后检测到caspase3 转录水平上升2倍，后来就做了时间点，21h、24h、27h，但是发现细胞对双氧水的反应时而有时而无，有时候检测出来这几个时间点caspase3都有变化，只是变化不大，在2到3倍之间，但是有一次我用这三个时间点做了三个重复，就发现DEF对于400uM的双氧水刺激没有反应，caspase3 转录水平不变了。不知道是怎么回事，问题：1.是双氧水浓度太低了么，需要提高双氧水的浓度么？2.DEF是原代细胞，由于每次做出来的细胞状态都有差异，所以是不是细胞状态时好时坏导致的每次检测出来的caspase3水平时而上升时而不变，如果换成传代细胞会不会好点？3.还有什么凋亡诱导剂大家可以推荐么，我是在鸭胚成纤维细胞上构建凋亡模型，用于后边做某个基因的抗凋亡时间。查看更多 3个回答 . 11人已关注

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如何解决中药胶囊吸潮问题？想请教各位大侠关于中药胶囊吸潮问题的方法。我做的这胶囊，开始设计的加入25%的辅料，主要是淀粉也加了少许硬脂酸镁，结果几个月后胶囊都吸潮结棍了，现在想在辅料用量不变的情况下通过改变辅料的种类来解决吸潮的问题，请给点建议好吗？谢谢啦！查看更多 3个回答 . 10人已关注

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小分子蛋白western半干转，如何解释曝光图? 做WB已经一个月了，目的蛋白一个12KD，一个33KD，15%的胶，0.22的PVDF膜，半干转，条件：20V，12KD的转35分钟，33KD和β-action一起转45分钟，1:1000HIS标签一抗孵育过夜，但是每次结果都不出。只有内参有结果。求高手指点。下面是今天曝光的图，求分析。查看更多 2个回答 . 18人已关注

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这是什么菌，怎么样去除以及如何避免? PC12细胞快一年了，原本十分好养的，但最近几个月里面细胞培养基很容易长其他东西，感觉有细菌又有真菌：培养基发黄，而且很浑浊，里面有漂浮着的成串的球状菌，刚开始球装菌较少，用PBS也洗不干净，后来越来越多，十二小时内培养基颜色变黄，细胞数目不断减少，在肉眼下观察，可以看到培养基表面有白色漂浮物，加了抗生素也没有作用（实验室用的是1640培养基，5%马血清和10% 胎牛血清），传到三四代左右就长菌，而且细胞生长很慢，实验室的培养基验过菌，空培养基放两个礼拜也没有染菌，应该没问题啊附上图片，请各位大侠告诉我这是什么菌，怎么样去除以及如何避免，感激不尽！（圆圈内是长的球状物，箭头是PC12细胞）查看更多 3个回答 . 19人已关注

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砂轮表面SEM怎么拍？ 请问砂轮表面形貌如何拍SEM?查看更多 1个回答 . 13人已关注

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武汉理工热电材料博士读不读？今年由于报考华科没有过接着又报了武汉理工的热电材料是唐新峰老师底下的小老板带想求助各位大神博士毕业在武汉好找工作吗感觉很多大学都没有热电材料这个专业大家给点意见读不读本人年龄29 本科研究生都是四川大学研究生学的高分子材料然后毕业在武汉车企工作现在一年到手大概十万感觉工作也没什么前景所以现在很迷茫查看更多 3个回答 . 8人已关注

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氯代甲苯上的氯能否被硝基取代? 氯代甲苯上的氯能否被硝基取代，间接硝化？查看更多 3个回答 . 16人已关注

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单糖双峰问题？ 检测一些单糖的时候，一遇溶剂会变成双峰，各位大神有做过的吗，如何选择溶剂或者流动相或者添加一些试剂解决这个问题，能否赐教？查看更多 5个回答 . 11人已关注

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过程校验仪的表笔插孔3W LOOP什么意思? 3w loop是指三线制的信号回路吗？请解惑，谢谢。查看更多 1个回答 . 4人已关注

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三阀组和五阀组，啥时候用？ 一直没搞清差压啥时候用三阀组，以及五阀组功能，带测量管就不用差压吗？查看更多 2个回答 . 6人已关注

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粉末衍射和结构模拟？ 没做过粉末衍射，想问一下群里的大牛们，能不能做粉末衍射通过精修后，利用软件直接模拟出它的结构？非常感谢！查看更多 2个回答 . 14人已关注

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投了一篇文章，审稿意见给了一句话没怎么看懂，哪位大神帮忙看一下，感激不尽！？审稿意见： The EIS response concerning R1 and CPE1 typically occurs from medium to low frequencies, and not at high frequencies. 相关图片结果如下：拟合电路.jpg 2.jpg 3.png 4.png查看更多 9个回答 . 15人已关注

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想购买酶有推荐的供应商？ 因要做大量實驗 (購買酶的量最少1公斤)，想詢問是否有推薦的酶供應商?查看更多 4个回答 . 11人已关注

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pBeloBAC质粒？ 请问有买到pBeloBAC质粒的伙伴们吗？求推荐，急需。谢谢查看更多 2个回答 . 3人已关注

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