他叫易烊千玺--盖德问答-化工人互助问答社区

他叫易烊千玺

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工艺专业主任

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细胞培养处理药物的高、中、低浓度该如何摸索设定? 请问，我的实验要摸索某种药物对培养细胞作用的高、中、低浓度，以此为依据完成后续实验，但是我用MTT法可以检测出来吗？如果以抑制率为标准，那么选择的高、中、低浓度是以IC50前为准还是IC50之后为准，或者还是以IC50作为中间浓度？感谢各位前辈给予指导！查看更多 1个回答 . 15人已关注

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用western测nf-kb是不是要分别测细胞浆? 本人最近想做NF-KB的western blot，因为以前没有做过western，所以比较迷惑。用western测nf-kb是不是要分别测细胞浆、细胞核以及总细胞内的含量？能不能有热心人提供一些资料如何检测？谢谢查看更多 1个回答 . 20人已关注

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如何确定一分子化合物是与几分子的酸成盐? 化合物中可能成盐的位点不止一个，现在想知道化合物究竟和几分子的酸成盐，不知道有哪些方法可以测试。查看更多 1个回答 . 19人已关注

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培养的贴壁细胞，培养基变成雾蒙蒙的粉红色，其中的细胞全部漂浮死亡，是什么原因? 1 查看更多 1个回答 . 15人已关注

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如何回答审稿人的问题? 大神们，cur是姜黄素，已经证明可以诱导细胞自噬。3-MA是自噬特异性抑制剂。这是我文章里的图，处理是：3MA预处理3h后，去上清，再用姜黄素处理，但是control组3-MA处理了48小时，然后测细胞生存率。我的目的：用3-MA抑制自噬后，再用姜黄素处理，细胞存活率上升，说明自噬对细胞的杀伤作用。但是，审稿意见：control组说明3-MA具有细胞毒性，希望我做3-MA计量梯度，绘制细胞生存曲线。问题：1.审稿人的意见，到底用意何在？我觉得和我的研究目的并不相关啊 2.3-MA单独作用48h,细胞生存率降低，预处理3h后再用姜黄素处理，生存率上升，我能得出自噬抑制，细胞存活率上升，自噬非保护作用的结论吗？3-MA毒性这里是不是搅进来就说不清楚了 3.如果我补做实验，control组就预处理3h后，除去3MA，然后细胞生存率与对照组没差异（3MA无细胞毒性），这样解释我的结论可以吗？ 4.3MA对细胞的毒性作用有没有可能是时间依赖的，3h处理，可以抑制自噬，但是48h处理，就会诱发其他毒性效应，抑制细胞增殖呢？问题比较多，比较急，不知道怎么回答审稿人问题，希望老师们给我指点指点。查看更多 1个回答 . 19人已关注

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做有关物质方法学验证，计算方法是外标法，重复性该怎么做? 做有关物质方法学验证，计算方法是外标法。样品中不一定有这种杂质，请问，这种情况下，重复性该怎么做？查看更多 1个回答 . 1人已关注

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求助无机材料，不吸附碘，用于碘分离。？ 如题，现在我需要做碘的分离，求大家推荐一些不吸附碘的无机材料，我做一些研究，谢谢！查看更多 1个回答 . 18人已关注

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悬滴和悬浮培养生成EB有什么不同? 悬滴和悬浮培养生成EB有什么不同？用哪种方法更好？查看更多 2个回答 . 1人已关注

#悬浮培养

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关于深浅坑双排支护结构的计算思路，请各位指正? 在湖南省某地块基坑设计过程中，地下室由于地下一层比地下二层面积大，故而在基坑设计时出现深浅坑双排桩的支护体系。典型断面如下图所示。该区域地质条件较好，基本位于强~中风化岩层，但由于受周边环境保护无法采用放坡开挖，故而采用桩锚体系。由于现有设计院采用通用设计软件（不包括连续介质有限元软件）尚无法考虑两排桩支护体系同时考虑（可能是个人知识有限，如有好的计算软件请各位推荐），故而在基坑计算时，我考虑上部和下部支护体系分开计算，计算防范进行了一定简化。 1、浅坑支护体系按常规基坑计算，基坑深度取浅坑深度。 2、下部深坑围护桩计算按正常围护结构计算，上部浅坑部分简化为超载加给下部深坑基坑。此简化计算方法在该工程专家基坑审议时有所争议，尤其是针对整个基坑围护体系的稳定性专家认为应该共同考虑。但据我所知目前除有限元软件外尚无较好的设计软件可考虑两排支护桩共同受力。查看更多 5个回答 . 13人已关注

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最近在配置溶出所用的PH1.2的盐酸缓冲液时发现配出来的溶液才PH0.85左右，这是为什么? 请问最近在配置溶出所用的PH1.2的盐酸缓冲液时发现配出来的溶液才PH0.85左右，这是为什么？配置方法：氯化钠 20g+60ml盐酸，然后加水至10L。查看更多 3个回答 . 6人已关注

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提取的RNA,和反转录都出现的怪状，请问原因? 最近刚提取的rna ,并不是三条带，很奇怪，多条带，以为能用呢，后来就进行了反转录，跑pcr,内参居然出现两条带，甚是奇怪，求分析原因。我的反转录试剂换了，之前用的康为的，这次用的宝生物。也不应该是这个问题吧？查看更多 3个回答 . 4人已关注

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采用USP的有关物质检测方法，样品溶液中出现较大的倒峰的原因是什么? 最近做个产品采用USP的有关物质检测方法甲醇-水-三氟乙酸（60:40:1）为流动相，测了下pH约1.5，波长212nm，我们只是把色谱柱改为非超高效的普通C18，流速1.0，溶剂为流动相，结果空白在3分钟左右无倒峰，但样品在3分钟处总有个比较大的倒峰（约30mv），开初我们怀疑三氟乙酸不是色谱级的，使得基线噪音很大，导致的倒峰，但三氟乙酸改为色谱级，还是有倒峰。改用磷酸调节pH到1.5，样品和空白都没有倒峰，其他的我们还排除了仪器系统污染，换了适合低pH的色谱柱等，但都没找到原因，不知道这种情况的倒峰是什么原因产生的，怎样能去除这个USP方法的倒峰？查看更多 1个回答 . 11人已关注

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直径为4，长度是130的304不锈钢光轴怎么样才能保证直线度在3丝左右? 直径为4，长度是130的304 不锈钢光轴怎么样才能保证直线度在3丝左右（要热处理），或者不用不锈钢也行，用别的材料查看更多 1个回答 . 16人已关注

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大家做洗洁精都用什么增稠剂？ 大家做洗洁精都用什么增稠剂，那种透明度高又增稠效果好的？查看更多 2个回答 . 13人已关注

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乙酸乙酯和溴苯互溶吗？ 在含有乙酸乙酯和乙醇的溶液里加了溴苯为啥会发生分层的现象呢？求解答查看更多 2个回答 . 4人已关注

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DNA浓缩？ 酶切后DNA的量太少了，电泳跑不出来，怎么浓缩ＤＮＡ啊？查看更多 3个回答 . 7人已关注

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污泥泵？我公司现有污水处理系统内的将二沉池的污泥泵送出去的污泥循环泵（泥的含量约暂80%）使用的是进出管口径为DN25的立式管道泵，离心式闭式叶轮，功率0.37kw（220V），经常堵塞，经常要清理，目前的计划是更换为DN40进出管口径的同类型泵，并在进口处加装4分冲洗管。请问：管道泵适合用于泵送污泥吗？有更好的方案吗？查看更多 2个回答 . 1人已关注

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紧急求助！搪瓷釜，主法兰（卡兰）标准？找到了。HGT2049如图，设备主法兰（带颈法兰，无螺栓，通过卡子类似的夹具夹在一起，具体叫啥不知道，从来没做过搪瓷釜）有相应的标准吗？客户是一搪瓷釜生产厂家，说是主法兰有标准，当时没细问，一直没找到，求助坛友们查看更多 1个回答 . 11人已关注

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蛋白印迹遇到的问题，有高手帮我解答一下吗? 1、3，4月份的时候电泳时间一直是1.5-2小时，且跑出来的样品压的比较细，呈直线。7月以后电泳时间一般有3-4小时，且跑出来的样品比较粗，一边快一边慢。有时电泳液变蓝。电泳完后，玻片比较热。估计电泳液温度在50-60度之间。我的电泳液都只使用一次，配方也未变，不知道是不是温度影响，可不可以冰浴低温电泳。 2、我的一抗都是用碧云天的一抗稀释液稀释后反复使用的，有一个蛋白，一抗特异性不强，背景较深，但奇怪的是，第一次配的一抗背景不深，往后的越来越深。这是什么原因呢。 3、荧光淬灭，蛋白表达量较低，所以会压的比较久一点，用碧云天的ECL化学发光液发荧光时间约为1-2小时，这次换了博士德的，压了5分钟就看不到Actin了。荧光淬灭的情况如何解决呢？查看更多 2个回答 . 2人已关注

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有谁知道肝素中内毒素超标如何处理? 我们正在研究的化合物内毒素不合格，结构性质与肝素类似，有没有人知道肝素钠中的内毒素是如何去除的，请大家帮帮忙献计献策。查看更多 3个回答 . 18人已关注

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简介

职业：上海北卡医药技术有限公司 - 工艺专业主任

学校：郧阳师范高等专科学校 - 化学系

地区：甘肃省

个人简介：每次你说那些奇怪的，忧伤的，阴郁的话的时候，我都默默地觉得这都是我的错，是我不能温暖你。查看更多

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