TAQ PLUS DNA聚合酶的特点及应用? TAQ PLUS DNA聚合酶是一种独特比例混合物,由Taq DNA聚合酶和Pfu DNA聚合酶组成。它具有比Taq DNA聚合酶更高的保真性和扩增效率,可用于复杂模板的PCR扩增。扩增产物具有平末端和3'-dA末端。该酶是在大肠杆菌中表达纯化的。 TAQ PLUS DNA聚合酶集扩增效率高和保真度好于一身,能有效的扩增10kb以下的片段。它具有Taq酶超强的扩增能力,并且由于Pfu酶的存在,能够纠正DNA扩增中的错误。 该酶的特点包括:适用于复杂模板扩增,保真性是Taq DNA聚合酶的4倍,可扩增长度达20 kb。 建议将Taq Plus DNA聚合酶溶解于20mM Tris-HCl(pH 8.0),1mM DTT,0.1mM EDTA,100mM KCl,安定剂,50%甘油溶液中,并在10℃保存5天或分装后置于-20℃冻存。 TAQ PLUS DNA聚合酶的应用 TAQ PLUS DNA聚合酶可用于高保真的PCR反应,可以替代Taq DNA聚合酶。它可以在转基因植物的特异性检测、筛选和定量PCR等方面发挥作用。 在转基因番木瓜的特异性检测方法研究中,研究人员成功地建立了一个适用于转基因番木瓜检测的内源参照基因Chymopapain(CHY)的定性和定量PCR检测方法。 为了建立新型转基因生物筛选检测方法,研究人员基于转基因作物中外源基因序列相似度高的特点,建立了一种4重兼并引物PCR方法,可以同时检测转基因作物中普遍存在的多个基因。 此外,还有一种新型高通量DNA分子分析方法,称为微滴聚合酶链式反应-毛细管凝胶电泳(Microdroplet PCR Implemented Capillary Gel Electrophoresis,MPIC),该方法包含两步PCR扩增反应和毛细管凝胶电泳分析。 参考文献 [1]Visual and Rapid Detection of Two Genetically Modified Soybean Events Using Loop-mediated Isothermal Amplification Method[J].Xiaoyan Guan,Jinchao Guo,Ping Shen,Litao Yang,Dabing Zhang.Food Analytical Methods.2010(4) [2]Development of a qualitative,multiplex real-time PCR kit for screening of genetically modified organisms(GMOs)[J].Hans-Henno D?rries,Ivonne Remus,Astrid Gr?newald,Cordt Gr?newald,Kornelia Berghof-J?ger.Analytical and Bioanalytical Chemistry.2010(6) [3]New approaches in GMO detection[J].Maddalena Querci,Marc Bulcke,Jana?el,Guy Eede,Hermann Broll.Analytical and Bioanalytical Chemistry.2010(6) [4]Validation of a newly developed hexaplex real-time PCR assay for screening for presence of GMOs in food,feed and seed[J].C.Bahrdt,A.B.Krech,A.Wurz,D.Wulff.Analytical and Bioanalytical Chemistry.2010(6) [5]GMO analysis–a complex and challenging undertaking[J].Hendrik Emons.Analytical and Bioanalytical Chemistry.2010(6) [6]Testing for genetically modified organisms(GMOs):Past,present and future perspectives[J].Arne Holst-Jensen.Biotechnology Advances.2009(6) [7]A PCR-microarray method for the screening of genetically modified organisms[J].Sandrine Hamels,Thomas Glouden,Karine Gillard,Marco Mazzara,Frédéric Debode,Nicoletta Foti,Myriam Sneyers,Teresa Esteve Nuez,Maria Pla,Gilbert Berben,William Moens,Yves Bertheau,Colette Audéon,Guy Van den Eede,JoséRemacle.European Food Research and Technology.2009(4) [8]郭金超.转基因植物及产品核酸检测新技术研究[D].上海交通大学,2011.查看更多