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总AKT下降导致磷酸化AKT 下降,AKT mRNA表达无明显改变,后续试验怎么做? 1、AKT mRNA水平参考价值有限,以protein水平为主。 2、一般用p-AKT/t-AKT(磷酸化AKT/总AKT)比值来判断AKT通路是否激活,p-AKT和t-AKT含量的单独变化参考价值有限。3、看你给予的处理是什么,如果是药物,可能提示该药物是否改变了AKT通路。4、单一检测方法说服力有限,应加上其它如免疫荧光、功能实验等来判断。 查看更多
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siRNA和ASO有什么异同之处? 目前普遍认为反义核酸可以在复制、转录、表达3 个水平上发挥作用。其机制为: (1) 在细胞核内以碱基配对原理与基因组DNA 结合,从复制与转录水平发挥反义阻止作用,这种反义技术称为“反基因治疗”(Anti-genetherapy) ; (2) 与mRNA 的5’末端的SD(Shine-Dalgarno) 序列或核糖体结合位点结合,阻碍核糖体的结合,从而阻碍翻译,或使反义RNA 与mRNA 形成双链,以被水解酶水解; (3) 与mRNA 的SD 序列上游的非编码区结合,改变mRNA 的二级结构,从而阻碍核糖体的结合; (4) 与mRNA 的5’末端编码区(主要是起始密码AUG) 结合,阻止RNA 的翻译; (5) 与引物结合,从而在复制水平上阻止基因表达;(6)结合到前体RNA的外显子和内含子的连接区,阻止其剪切成熟; (7) 作用于mRNA 的poly A 形成位点, 阻止成熟和转运; (8) 作用于mRNA 的5’末端,阻止帽子结构的形成; 外源dsRNA 进入细胞后产生的小分子干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)的反义链和多种核酸酶形成了沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),RISC具有结合和切割mRNA的作用而介导RNA干扰的过程。RNAi更流行,效果可能更好一些至于效率,两者应该差不多查看更多
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做一个抗生素的合成,是极性大的物质,大家有什么好的沉淀方法嘛? 抗生素普遍极性较大,但不同的品种的性质也并不是完全一样! 说明品种以及你的实验方案,才好解决问题! 很多问题看上去只是一个点,但要解决,必须要全盘考虑,产生问题的原因往往是多方面的!查看更多
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co-ip实验,怎么去杂带啊,有很强的非特异性结合!? 可以通过更改NaCL的浓度以及去垢剂的比例,比如:针对单纯的IP或co-ip实验或者虽然是进行IP实验,但蛋白质之间的结合比较牢靠,可以考虑使用低浓度(0.2-0.5%)的SDS洗涤抗体-sepharose beads复合物,这样可以去除绝大部分非特异性相互作用。 查看更多
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框架结构ATb型楼梯挑板能做多长? 经过计算,梯板跨度2000,计算出来的弯矩和剪力都不大,随便一配筋就行,但是前辈给的意见是你的计算没有考虑地震,如果地震发生了,支座滑动的时候会产生更大的荷载,你就按200厚,配筋12@100查看更多
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内参的选择GAPDH是否可用于糖尿病模型? GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,它还参与核转录等事件,核糖核酸绑定和运输、DNA复制和修复以及细胞凋亡。表达式是高点在大多数组织和细胞类型和常数,获得基因及其蛋白质管家状态。因为如此,GAPDH是常用的蛋白质免疫印迹的内参。然而,GAPDH表达式的数量可以在不同组织和它的适用性做实验前应该考虑选择这个作为控制目标。内参的选择需要考虑实际的试验环境,比如某些细胞中,由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高,不适合做内参。查看更多
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试验中为了增加响应值,想通过增加进样体积的方法实现? agilent 1100最合适进样体积就是20ul,峰高在100-200时积分处理结果最准确。建议楼主进更浓的样。查看更多
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基因的共表达网络如何构建? 最好的方法是做用wgcna做共表达网络,或者用r软件做该基因与全基因组各个基因的皮尔森相关系数 查看更多
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锅炉的氧含量问题及烟气温度问题? 燃气排烟100℃还是比较正常的,之前的排烟温度为170℃可能是换热和燃料共同影响,烟气中氧含量控制在3%左右,不易过低,过低会对CO生成造成影响,过高会对NOx的折算造成影响 查看更多
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快信号采集怎么弄? 这个建议单片机系统做高速采集。 查看更多
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若层析柱中所装硅胶柱下层为100-200目,柱上层为200-300目,那么洗脱将会出现什么问题? 应该上粗下细,先进行粗分,然后再细分。不过由于粗细不同装柱的话,容易出现断层现象,值得注意。 查看更多
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如何监控隧道量测的问题-预埋测点入岩深度? 看些铁路隧道的规定吧,现在公路监控量测还没有统一的规定。 查看更多
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cfx怎样分析水击压力? 可以先插入expression,在表达式中定义你的V(t),然后设置进口边界条件的时候选择该表达式就可以了。查看更多
请问安全阀根据规范根部还允许设置手动阀门吗? 安全阀根部一般不建议设计手阀,但是规范没有强制要求,一般连续生产的设备,安全阀会设一开一备,保证装置不停工情况下,安全阀可以按期检验,此时,安全阀根部必须设计手阀,同时手阀必须设铅封开,或锁开,同时,设计安全阀台账。 查看更多
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蛋白纯化不挂柱直接流出了,原因是什么? His蛋白纯化不挂柱可能是存在以下问题: 1.Ni柱本身的问题,建议重新装柱子,以确保Ni柱的效率。2.既然不加咪唑,蛋白的结合也存在问题,那么就要考虑降低盐浓度。3.还有一点就是从破菌到Ni柱上样,不能还有EDTA。4.最坏的就是你的蛋白质在折叠的过程中将C端的His-tag包埋了,这样的话,你就要重新构建了。 查看更多
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催化剂上的重金属含量? 这个采样,有专业催化剂厂家负责检测 查看更多
【专题】原创经典? 如果大家认为此贴好,请五星推荐!查看更多
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关于高填充粉体中添加白油分散的问题? 粉子有经过表面预处理吗? 查看更多
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[2+2+2]环加成反应在天然产物合成中的应用? 没有一个能实际应用的? 查看更多
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求助ORR方向设备、配件准备工作? 20%pt/C, 对电极Pt丝或者碳棒,参比电极。。。。。什么气体流量计啊。。。楼上说的五口电解池啊查看更多
简介
职业:福建闽海石化有限公司 - 销售
学校:中国石油大学(华东) - 化学化工学院
地区:贵州省
个人简介:一个人看一堆小丑表演。查看更多
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