兔抗小鼠CTLA-4的特性与应用？ 兔抗小鼠CTLA-4是一种兔多克隆抗体，能够特异性结合CTLA-4。它在多种CTLA-4检测实验中发挥重要作用，包括ICC/IF、Dotblot、ELISA、IHC-P、IHC-Fr、Immunomicroscopy和WB等。 抗原与抗体的特异性结合取决于它们之间的结构互补性和亲和性。除了分子构型的互补性外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触才能产生足够的结合力。 CTLA-4蛋白是由小鼠的Ctla4基因和人类中的CTLA4基因编码的。它是一种蛋白受体，被称为细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4（CTLA-4）或CD152。CTLA-4在免疫检查点中起到调节免疫应答的作用。 CTLA-4在调节性T细胞中表达，但在活化后仅在常规T细胞中上调。当与抗原呈递细胞表面上的CD80或CD86结合时，它起到关闭开关的作用。 细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）又称CD152，是一种白细胞分化抗原，是T细胞上的一种跨膜受体，与CD28共同享有B7分子配体。CTLA-4与B7分子结合后诱导T细胞无反应性，参与免疫反应的负调节。基因重组的CTLA-4 Ig可在体内外有效、特异地抑制细胞和体液免疫反应，对移植排斥反应及各种自身免疫性疾病有显著的治疗作用。 CTLA-4抗体及JAK2抑制剂联合治疗小鼠乳腺癌的实验研究 CTLA-4作为免疫治疗的靶点之一，通过抗CTLA-4抗体封闭CTLA-4信号通路，可以提高荷瘤机体的免疫能力，已经在黑色素瘤治疗中取得了重大突破。然而，在乳腺癌治疗研究中发现，单独使用抗CTLA-4抗体效果不明显。 为了探索小鼠乳腺癌模型的免疫状态，我们首次提出并试验了联合使用抗CTLA-4抗体和JAK2抑制剂治疗小鼠乳腺癌的方法。 方法：首先建立小鼠皮下乳腺癌模型，对照组使用未经处理的小鼠。建模21天后，取脾脏进行细胞流式术检测CD4+、CD8+T细胞的百分比，以及骨髓源性抑制细胞（MDSCs）和调节性T细胞（Tregs）的百分比。 接着，将小鼠分成5组进行联合治疗实验，包括空白对照组、溶剂对照组、抗CTLA-4组、JAK2抑制剂组和联合用药组。从第3天开始给予药物治疗，持续到第21天。 使用细胞流式术检测荷瘤小鼠脾脏和骨髓中的细胞亚型，使用免疫组化检测肿瘤微环境中的凋亡细胞和微血管密度（MVD）。 参考文献 [1] Sadna Budhu, Jedd Wolchok, Taha Merghoub. The importance of animal models in tumor immunity and immunotherapy. Current Opinion in Genetics & Development. 2014. [2] Cuijuan Qian, Jun Yao, Jiji Wang, Lan Wang, Meng Xue, Tianhua Zhou, Weili Liu, Jianmin Si. ERK1/2 inhibition enhances apoptosis induced by JAK2 silencing in human gastric cancer SGC7901 cells. Molecular and Cellular Biochemistry. 2014. [3] Bertrand Allard, Sandra Pommey, Mark J. Smyth, John Stagg. Targeting CD73 Enhances the Antitumor Activity of Anti-PD-1 and Anti-CTLA-4 mAbs. Clinical Cancer Research. 2013. [4] Elizabeth R. Plimack, Patricia M. LoRusso, Patricia McCoon, Weifeng Tang, Annetta D. Krebs, Gregory Curt, S. Gail Eckhardt. AZD1480: A Phase I Study of a Novel JAK2 Inhibitor in Solid Tumors. The Oncologist. 2013. [5] 王建霞. 联合抗CTLA-4抗体及JAK2抑制剂治疗小鼠乳腺癌的实验研究[D]. 吉林大学, 2014.查看更多
温度和压力对反应速率的影响是如何计算的? 温度（T）和压力（p）是影响反应速率（k）的两个重要因素。温度对反应速率的影响可以用活化能（Ea）来衡量，压力对反应速率的影响则用活化体积（ΔV+）来衡量。活化能可以看作是过渡态和反应物的能量差，而活化体积可以看作是过渡态和反应物的体积差（图1）。活化能和活化体积可分别由lnk对1/T和p求导得到，其中lnk是反应速率的自然对数。活化能一般大于零，而活化体积则可正可负。成键反应通常导致体积减小，因此活化体积为负，高压促进该类反应进行。 图1，活化体积和反应体积示意图。该反应中，活化体积和反应体积都为负。 活化体积和活化能都能提供关于反应过渡态的信息，因此可以用于研究反应机理。根据不同的活化能或者活化体积，可以区分不同反应机理。由于分子的体积可以很直观的和分子结构联系起来，因此活化体积可以比活化能更直观的提供关于反应过渡态结构的信息。 1986年，Kl?rner等报道了1,3-环己二烯的二聚反应，观测到包括［4+2］环加成产物、［2+2］环加成产物以及［6+4］-ene反应产物的生成（图2）。发现升高反应压力可以增加所有产物的生成速率，其中生成endo构型的［4+2］产物和threo构型的［6+4］-ene产物的反应的加速最明显。相应的，该两个反应的实验测得的活化体积值最负。然而35年过去了，仍没有工作解释为什么［6+4］-ene反应的活化体积最负以及压力怎么影响该反应中各种机理的竞争。 图2，1,3-环己二烯的二聚反应的产物分布，以及实验测量的活化能和活化体积。 本工作利用一种最近发展的高压计算模型（eXtreme-Pressure Polarizable Continuum Model，简称XP-PCM）对该二聚反应的势能面以及活化体积进行了计算。XP-PCM利用传统PCM模型中的溶质-溶剂间的排斥作用对分子施压。通过减小分子体积和增加溶质-溶剂排斥作用来模拟压力的效应。结合DFT计算，不仅得到和实验值相当吻合的活化体积，并提供不同压力下反应势能面以及体积的变化（图3）。由于分子体积总体随着反应进行减小，反应能垒随压力升高而降低。 图3，1,3-环己二烯的［4+2］环加成以及［6+4］-ene反应在不同压力下的势能面。 计算表明（图4），从双自由基机理，到［4+2］环加成机理，再到［6+4］-ene的机理，随着过渡态中两个环己二烯分子面重叠增加，过渡态体积依次减小，压力对反应速率的提升作用也依次增强。成功解释不同反应机理的不同活化体积。 图4，1,3-环己二烯二聚的不同反应机理的过渡态结构、体积以及压力作用的比较。 该工作表明活化体积的准确计算是研究竞争反应机理的有效手段。分子体积的变化是理解反应势能面随着压力变化的关键。反应过渡态的结构可以很好的帮助理解活化体积的大小。 论文信息 High-Pressure Reaction Profiles and Activation Volumes of 1,3-Cyclohexadiene Dimerizations Computed by the Extreme Pressure-Polarizable Continuum Model (XP-PCM) Dr. Bo Chen, Prof.?Dr. K. N. Houk, Prof.?Dr. Roberto Cammi Chemistry – A European Journal DOI: 10.1002/chem.202200246 查看更多
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