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B细胞迁移基因2抗体是一种特异性集合B细胞迁移基因2蛋白的多克隆抗体。B细胞是来源于骨髓的多能干细胞，主要定居于淋巴结和脾脏的淋巴小结内。在抗原刺激下，B细胞可以分化为浆细胞，合成和分泌抗体，执行体液免疫。
细胞迁移是细胞在接收到迁移信号后产生的移动。它是正常细胞的基本功能之一，也是机体正常生长发育的生理过程。细胞迁移涉及胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程。细胞迁移的方向由Cdc42的活性调控，它在细胞运动前缘的区域引起细胞骨架的极性分布。
本研究旨在探讨BTG2基因的DNA甲基化和其表达的相关性，以及其在原发性肝癌中的临床意义。
方法：收集125例肝细胞癌患者的组织样本，利用免疫组化方法检测BTG2蛋白的表达情况，并分析其与肝癌的临床病理因素的相关性。同时，通过生物信息学分析选择合适的CG位点作为DNA甲基化检测的候选位点。从患者组织中选择合适的样本进行DNA甲基化检测，并分析DNA甲基化与BTG2表达的相关性及其在肝癌中的临床意义。
结果：在125例肝癌组织中，BTG2的表达与肝癌的临床病理因素有相关性。此外，BTG2的表达与HCC癌栓的发生也有显著相关性。
[1]Cancer statistics in China,2015[J].Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Peter D.Baade,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Freddie Bray,Ahmedin Jemal,Xue Qin Yu,Jie He.CA:A Cancer Journal for Clinicians.2016(2)
[2]Evidence-based Diagnosis,Staging,and Treatment of Patients With Hepatocellular Carcinoma[J].Jordi Bruix,Maria Reig,Morris Sherman.Gastroenterology.2015
[3]Control of the Normal and Pathological Development of Neural Stem and Progenitor Cells by the PC3/Tis21/Btg2 and Btg1 Genes[J].Laura Micheli,Manuela Ceccarelli,Stefano Farioli‐Vecchioli,Felice Tirone.J.Cell.Physiol..2015(12)
[4]Epigenetic control of EMT/MET dynamics:HNF4αimpacts DNMT3s through miRs-29[J].Carla Cicchini,Valeria de Nonno,Cecilia Battistelli,Angela Maria Cozzolino,Marco De Santis Puzzonia,Silvia Anna Ciafrè,Chad Brocker,Frank J.Gonzalez,Laura Amicone,Marco Tripodi.BBA-Gene Regulatory Mechanisms.2015(8)
[5]叶云飞.BTG2的表达及其DNA甲基化在原发性肝癌中的作用研究[D].第三军医大学,2017. 显示全部
B细胞迁移基因2抗体是一种特异性集合B细胞迁移基因2蛋白的多克隆抗体。B细胞是来源于骨髓的多能干细胞，主要定居于淋巴结和脾脏的淋巴小结内。在抗原刺激下，B细胞可以分化为浆细胞，合成和分泌抗体，执行体液免疫。
细胞迁移是细胞在接收到迁移信号后产生的移动。它是正常细胞的基本功能之一，也是机体正常生长发育的生理过程。细胞迁移涉及胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程。细胞迁移的方向由Cdc42的活性调控，它在细胞运动前缘的区域引起细胞骨架的极性分布。
本研究旨在探讨BTG2基因的DNA甲基化和其表达的相关性，以及其在原发性肝癌中的临床意义。
方法：收集125例肝细胞癌患者的组织样本，利用免疫组化方法检测BTG2蛋白的表达情况，并分析其与肝癌的临床病理因素的相关性。同时，通过生物信息学分析选择合适的CG位点作为DNA甲基化检测的候选位点。从患者组织中选择合适的样本进行DNA甲基化检测，并分析DNA甲基化与BTG2表达的相关性及其在肝癌中的临床意义。
结果：在125例肝癌组织中，BTG2的表达与肝癌的临床病理因素有相关性。此外，BTG2的表达与HCC癌栓的发生也有显著相关性。
[1]Cancer statistics in China,2015[J].Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Peter D.Baade,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Freddie Bray,Ahmedin Jemal,Xue Qin Yu,Jie He.CA:A Cancer Journal for Clinicians.2016(2)
[2]Evidence-based Diagnosis,Staging,and Treatment of Patients With Hepatocellular Carcinoma[J].Jordi Bruix,Maria Reig,Morris Sherman.Gastroenterology.2015
[3]Control of the Normal and Pathological Development of Neural Stem and Progenitor Cells by the PC3/Tis21/Btg2 and Btg1 Genes[J].Laura Micheli,Manuela Ceccarelli,Stefano Farioli‐Vecchioli,Felice Tirone.J.Cell.Physiol..2015(12)
[4]Epigenetic control of EMT/MET dynamics:HNF4αimpacts DNMT3s through miRs-29[J].Carla Cicchini,Valeria de Nonno,Cecilia Battistelli,Angela Maria Cozzolino,Marco De Santis Puzzonia,Silvia Anna Ciafrè,Chad Brocker,Frank J.Gonzalez,Laura Amicone,Marco Tripodi.BBA-Gene Regulatory Mechanisms.2015(8)
[5]叶云飞.BTG2的表达及其DNA甲基化在原发性肝癌中的作用研究[D].第三军医大学,2017.
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人中性粒细胞分离液试剂盒是一种用于分离中性粒细胞的灭菌水溶液，其主要成分包括Ficoll 400和泛影酸葡甲胺。该试剂盒广泛应用于医疗和医学生物学研究中，可用于从人或动物的血液或脏器组织中分离中性粒细胞。
A．将1ml新鲜抗凝血与E液混合，再与1ml全血及组织稀释液混匀，置于20℃-30℃下自然沉降20-30分钟。吸取浑浊的上清部分，底部红细胞备用。
B．将步骤A中得到的浑浊上清液小心叠加在A液上。
C．以400g离心15分钟，将离心管中的细胞分为四层，其中第三层含有一定量的中性粒细胞。
D．将红细胞层用红细胞裂解液裂解并去除红细胞，获得大量中性粒细胞。
E．将第三层混浊分离液和步骤D中得到的中性粒细胞放入含细胞洗涤液的试管中，离心并重复洗涤2次，即可得到所需的中性粒细胞。
中性粒细胞在宿主抗感染免疫中起着重要作用，其数量的增加与肿瘤预后密切相关。在肿瘤微环境中存在着两种不同类型的肿瘤相关中性粒细胞，它们在调控诱导和表型功能等方面存在明显差异。
N1型肿瘤相关中性粒细胞与抗感染免疫中的中性粒细胞相似，具有更强的肿瘤杀伤作用。而N2型肿瘤相关中性粒细胞通过抑制机体的抗肿瘤免疫反应来促进肿瘤生长。
胃癌是一种预后较差的恶性肿瘤，肿瘤微环境中浸润的免疫细胞类型和数量与胃癌的预后密切相关。中性粒细胞的浸润在多种肿瘤中都有发现，其在胃癌中的作用也受到越来越多的关注。
[1]On the dual roles and polarized phenotypes of neutrophils in tumor development and progression[J].H.Piccard,R.J.Muschel,G.Opdenakker.Critical Reviews in Oncology/Hematology.2011(3)
[2]The role of CXC chemokines in the transition of chronic inflammation to esophageal and gastric cancer[J].Verbeke Hannelien,Geboes Karel,Van Damme Jo,Struyf Sofie.BBA-Reviews on Cancer.2011(1)
[3]Chemokines and chemokine receptors:new insights into cancer-related inflammation[J].Gwendal Lazennec,Ann Richmond.Trends in Molecular Medicine.2010(3)
[4]Isotypic neutralizing antibodies against mouse GCP-2/CXCL6 inhibit melanoma growth and metastasis[J].Hannelien Verbeke,Sofie Struyf,Nele Berghmans,Els Van Coillie,Ghislain Opdenakker,Catherine Uyttenhove,Jacques Van Snick,Jo Van Damme.Cancer Letters.2010(1)
[5]王婷婷.中性粒细胞在胃癌中的分布、调控及免疫抑制功能的初步研究[D].第三军医大学,2014.
显示全部人中性粒细胞分离液试剂盒是一种用于分离中性粒细胞的灭菌水溶液，其主要成分包括Ficoll 400和泛影酸葡甲胺。该试剂盒广泛应用于医疗和医学生物学研究中，可用于从人或动物的血液或脏器组织中分离中性粒细胞。
A．将1ml新鲜抗凝血与E液混合，再与1ml全血及组织稀释液混匀，置于20℃-30℃下自然沉降20-30分钟。吸取浑浊的上清部分，底部红细胞备用。
B．将步骤A中得到的浑浊上清液小心叠加在A液上。
C．以400g离心15分钟，将离心管中的细胞分为四层，其中第三层含有一定量的中性粒细胞。
D．将红细胞层用红细胞裂解液裂解并去除红细胞，获得大量中性粒细胞。
E．将第三层混浊分离液和步骤D中得到的中性粒细胞放入含细胞洗涤液的试管中，离心并重复洗涤2次，即可得到所需的中性粒细胞。
中性粒细胞在宿主抗感染免疫中起着重要作用，其数量的增加与肿瘤预后密切相关。在肿瘤微环境中存在着两种不同类型的肿瘤相关中性粒细胞，它们在调控诱导和表型功能等方面存在明显差异。
N1型肿瘤相关中性粒细胞与抗感染免疫中的中性粒细胞相似，具有更强的肿瘤杀伤作用。而N2型肿瘤相关中性粒细胞通过抑制机体的抗肿瘤免疫反应来促进肿瘤生长。
胃癌是一种预后较差的恶性肿瘤，肿瘤微环境中浸润的免疫细胞类型和数量与胃癌的预后密切相关。中性粒细胞的浸润在多种肿瘤中都有发现，其在胃癌中的作用也受到越来越多的关注。
[1]On the dual roles and polarized phenotypes of neutrophils in tumor development and progression[J].H.Piccard,R.J.Muschel,G.Opdenakker.Critical Reviews in Oncology/Hematology.2011(3)
[2]The role of CXC chemokines in the transition of chronic inflammation to esophageal and gastric cancer[J].Verbeke Hannelien,Geboes Karel,Van Damme Jo,Struyf Sofie.BBA-Reviews on Cancer.2011(1)
[3]Chemokines and chemokine receptors:new insights into cancer-related inflammation[J].Gwendal Lazennec,Ann Richmond.Trends in Molecular Medicine.2010(3)
[4]Isotypic neutralizing antibodies against mouse GCP-2/CXCL6 inhibit melanoma growth and metastasis[J].Hannelien Verbeke,Sofie Struyf,Nele Berghmans,Els Van Coillie,Ghislain Opdenakker,Catherine Uyttenhove,Jacques Van Snick,Jo Van Damme.Cancer Letters.2010(1)
[5]王婷婷.中性粒细胞在胃癌中的分布、调控及免疫抑制功能的初步研究[D].第三军医大学,2014.
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肺泡巨噬细胞是一种重要的免疫细胞，具有多种功能。它们分离自小鼠肺组织，肺是位于胸腔的呼吸器官，肺泡巨噬细胞主要存在于肺泡中。肺泡是由单层上皮细胞构成的囊泡，肺中的支气管经过多次分枝形成肺泡。巨噬细胞是一种免疫细胞，是研究细胞吞噬和免疫学的重要对象。
巨噬细胞相对容易获得和培养，并可进行纯化。它们属于不繁殖细胞群，在适宜条件下可生存2-3周，常用于原代培养。巨噬细胞源自单核细胞，而单核细胞则来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞都是吞噬细胞，参与机体的非特异性和特异性防卫。
冬虫夏草是一种中药材，具有补肺益肾的功效。研究了冬虫夏草菌菌丝体甲醇提取物对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎性反应的抑制活性，并分析了其对炎症介质NO的产生和MAPK通路中p38蛋白磷酸化的调控。结果显示，冬虫夏草菌菌丝体提取物能抑制肺泡巨噬细胞的炎症反应，并可能通过调控p38MAPK通路发挥作用。
[1] Role of lipid rafts in innate immunity and phagocytosis of polystyrene latex microspheres[J]. Goshi Nagao, Kazuo Ishii, Keiji Hirota, Kimiko Makino, Hiroshi Terada. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 2011(2)
[2] Anti-inflammatory effects of sophocarpine in LPS-induced RAW 264.7 cells via NF-κB and MAPKs signaling pathways[J]. Yonglin Gao, Wanglin Jiang, Chaohua Dong, Chunmei Li, Xuejun Fu, Li Min, Jingwei Tian, Haizhu Jin, Jingyu Shen. Toxicology in Vitro. 2011(1)
[3] Age-induced augmentation of p38 MAPK phosphorylation in mouse lung[J]. Zongli Li, Junfa Li, Xiangning Bu, Xu Liu, Clarke G. Tankersley, Chen Wang, Kewu Huang. Experimental Gerontology. 2011(8)
[4] Phosphatidylserine inhibits NFκB and p38 MAPK activation in human monocyte derived dendritic cells[J]. Kara Doffek, Xiao Chen, Sonia L. Sugg, Joel Shilyansky. Molecular Immunology. 2011(15)
[5] 张颖茁. 冬虫夏草菌菌丝体甲醇提取物对LPS所致大鼠肺泡巨噬细胞炎性反应的抑制作用[D]. 上海师范大学, 2013.
显示全部肺泡巨噬细胞是一种重要的免疫细胞，具有多种功能。它们分离自小鼠肺组织，肺是位于胸腔的呼吸器官，肺泡巨噬细胞主要存在于肺泡中。肺泡是由单层上皮细胞构成的囊泡，肺中的支气管经过多次分枝形成肺泡。巨噬细胞是一种免疫细胞，是研究细胞吞噬和免疫学的重要对象。
巨噬细胞相对容易获得和培养，并可进行纯化。它们属于不繁殖细胞群，在适宜条件下可生存2-3周，常用于原代培养。巨噬细胞源自单核细胞，而单核细胞则来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞都是吞噬细胞，参与机体的非特异性和特异性防卫。
冬虫夏草是一种中药材，具有补肺益肾的功效。研究了冬虫夏草菌菌丝体甲醇提取物对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎性反应的抑制活性，并分析了其对炎症介质NO的产生和MAPK通路中p38蛋白磷酸化的调控。结果显示，冬虫夏草菌菌丝体提取物能抑制肺泡巨噬细胞的炎症反应，并可能通过调控p38MAPK通路发挥作用。
[1] Role of lipid rafts in innate immunity and phagocytosis of polystyrene latex microspheres[J]. Goshi Nagao, Kazuo Ishii, Keiji Hirota, Kimiko Makino, Hiroshi Terada. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 2011(2)
[2] Anti-inflammatory effects of sophocarpine in LPS-induced RAW 264.7 cells via NF-κB and MAPKs signaling pathways[J]. Yonglin Gao, Wanglin Jiang, Chaohua Dong, Chunmei Li, Xuejun Fu, Li Min, Jingwei Tian, Haizhu Jin, Jingyu Shen. Toxicology in Vitro. 2011(1)
[3] Age-induced augmentation of p38 MAPK phosphorylation in mouse lung[J]. Zongli Li, Junfa Li, Xiangning Bu, Xu Liu, Clarke G. Tankersley, Chen Wang, Kewu Huang. Experimental Gerontology. 2011(8)
[4] Phosphatidylserine inhibits NFκB and p38 MAPK activation in human monocyte derived dendritic cells[J]. Kara Doffek, Xiao Chen, Sonia L. Sugg, Joel Shilyansky. Molecular Immunology. 2011(15)
[5] 张颖茁. 冬虫夏草菌菌丝体甲醇提取物对LPS所致大鼠肺泡巨噬细胞炎性反应的抑制作用[D]. 上海师范大学, 2013.
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大鼠肺泡巨噬细胞是一种不增殖的终末分化细胞，无法进行传代，只能进行原代培养且存活时间较短。建议尽快进行相关实验，不建议传代。大鼠肺泡巨噬细胞通过机械研磨结合差速贴壁法制备，每瓶细胞总量约为5×10^5个。经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
巨噬细胞是免疫细胞，具有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养和纯化。巨噬细胞来源于骨髓单核细胞系列，血液中的单核细胞进入肺组织后发育成间质巨噬细胞(M)，再进一步发育成终末期肺泡巨噬细胞(AM)。肺泡和间质巨噬细胞是肺内最重要的两个巨噬细胞亚群，具有明显的异质性，包括形态、结构功能和表型等方面。肺内巨噬细胞在抵抗病原微生物入侵中起着重要作用，其吞噬杀菌活性是其最基本的功能。
[1] 张伟，蒋耀光，郭德玉，胡承香，李磊；大鼠肺泡和间质巨噬细胞的形态功能差异。第三军医大学学报 26卷第14期。
显示全部大鼠肺泡巨噬细胞是一种不增殖的终末分化细胞，无法进行传代，只能进行原代培养且存活时间较短。建议尽快进行相关实验，不建议传代。大鼠肺泡巨噬细胞通过机械研磨结合差速贴壁法制备，每瓶细胞总量约为5×10^5个。经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
巨噬细胞是免疫细胞，具有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养和纯化。巨噬细胞来源于骨髓单核细胞系列，血液中的单核细胞进入肺组织后发育成间质巨噬细胞(M)，再进一步发育成终末期肺泡巨噬细胞(AM)。肺泡和间质巨噬细胞是肺内最重要的两个巨噬细胞亚群，具有明显的异质性，包括形态、结构功能和表型等方面。肺内巨噬细胞在抵抗病原微生物入侵中起着重要作用，其吞噬杀菌活性是其最基本的功能。
[1] 张伟，蒋耀光，郭德玉，胡承香，李磊；大鼠肺泡和间质巨噬细胞的形态功能差异。第三军医大学学报 26卷第14期。
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内皮细胞是分布在多个器官组织中的一种细胞，具有吞噬异物、参与免疫活动等功能。在研究和实验中，需要大量的内皮细胞。为了满足这个需求，我们需要制备适合内皮细胞生长的培养基。
我们可以使用以下成分制备内皮细胞培养基：
将无血清基础培养基、胰岛素、转铁蛋白、维生素C、牛血清白蛋白、碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子、干细胞生长因子、层粘连蛋白、表皮生长因子、非必须氨基酸和二甲双胍盐酸盐混合，即可得到内皮细胞培养基。
[1]CN201510473860.1一种内皮细胞培养基及内皮细胞的培养方法
显示全部内皮细胞是分布在多个器官组织中的一种细胞，具有吞噬异物、参与免疫活动等功能。在研究和实验中，需要大量的内皮细胞。为了满足这个需求，我们需要制备适合内皮细胞生长的培养基。
我们可以使用以下成分制备内皮细胞培养基：
将无血清基础培养基、胰岛素、转铁蛋白、维生素C、牛血清白蛋白、碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子、干细胞生长因子、层粘连蛋白、表皮生长因子、非必须氨基酸和二甲双胍盐酸盐混合，即可得到内皮细胞培养基。
[1]CN201510473860.1一种内皮细胞培养基及内皮细胞的培养方法
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星形胶质细胞是中枢神经系统中含量最丰富的细胞，具有多种生物学功能。为了更好地研究星形胶质细胞的功能，无血清培养基已经被广泛应用于培养神经元和内皮细胞。
徐立新等人进行了一项研究，探索了使用无血清培养基进行大鼠星形胶质细胞原代培养和传代培养的方法。研究中，他们取出生不超过24小时的Wistar大鼠大脑皮质组织，经过机械吹打分散为单细胞后，在无血清培养基中进行原代培养。在细胞传代过程中，他们使用了乙二胺四乙酸(EDTA)-胰酶或胰酶作为消化液，并使用大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTL)终止消化作用。细胞按照特定的比例进行传代。通过显微镜观察细胞生长状态，使用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)细胞免疫荧光染色方法鉴定细胞表型，使用MTT法检测传代细胞的增殖情况。
研究结果
研究发现，在细胞悬液静置15分钟后更换新的无血清培养基进行培养，经过7天的培养，细胞生长良好，折光性强，胞体小而突起长。细胞免疫荧光染色鉴定显示超过95%的细胞为GFAP阳性细胞。此外，研究还发现，通过低温、低速离心(4℃、3,000×g) 3分钟后，传代细胞可以在无血清培养基中正常生长和增殖。MTT检测结果显示，EDTA-胰酶消化效果优于胰酶。而使用不同浓度的SBTI终止消化以及不同的传代比例对传代星形胶质细胞数量没有显著影响。
结论
通过这项研究，我们成功建立了一种使用无血清培养基进行大鼠星形胶质细胞原代和传代培养的方法。这为我们更好地开展体外星形胶质细胞功能的研究提供了新的细胞模型。
[1] 星形胶质细胞培养基--无血清产品介绍
[2]徐立新,贾梅,师忠芳,董丽萍,闫旭,王玉娇,陈烨,袁芳.大鼠星形胶质细胞无血清培养方法的研究[J].中华神经外科杂志,2018,34(06):633-636.
显示全部星形胶质细胞是中枢神经系统中含量最丰富的细胞，具有多种生物学功能。为了更好地研究星形胶质细胞的功能，无血清培养基已经被广泛应用于培养神经元和内皮细胞。
徐立新等人进行了一项研究，探索了使用无血清培养基进行大鼠星形胶质细胞原代培养和传代培养的方法。研究中，他们取出生不超过24小时的Wistar大鼠大脑皮质组织，经过机械吹打分散为单细胞后，在无血清培养基中进行原代培养。在细胞传代过程中，他们使用了乙二胺四乙酸(EDTA)-胰酶或胰酶作为消化液，并使用大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTL)终止消化作用。细胞按照特定的比例进行传代。通过显微镜观察细胞生长状态，使用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)细胞免疫荧光染色方法鉴定细胞表型，使用MTT法检测传代细胞的增殖情况。
研究结果
研究发现，在细胞悬液静置15分钟后更换新的无血清培养基进行培养，经过7天的培养，细胞生长良好，折光性强，胞体小而突起长。细胞免疫荧光染色鉴定显示超过95%的细胞为GFAP阳性细胞。此外，研究还发现，通过低温、低速离心(4℃、3,000×g) 3分钟后，传代细胞可以在无血清培养基中正常生长和增殖。MTT检测结果显示，EDTA-胰酶消化效果优于胰酶。而使用不同浓度的SBTI终止消化以及不同的传代比例对传代星形胶质细胞数量没有显著影响。
结论
通过这项研究，我们成功建立了一种使用无血清培养基进行大鼠星形胶质细胞原代和传代培养的方法。这为我们更好地开展体外星形胶质细胞功能的研究提供了新的细胞模型。
[1] 星形胶质细胞培养基--无血清产品介绍
[2]徐立新,贾梅,师忠芳,董丽萍,闫旭,王玉娇,陈烨,袁芳.大鼠星形胶质细胞无血清培养方法的研究[J].中华神经外科杂志,2018,34(06):633-636.
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尿嘧啶是RNA中特有的一种碱基，与DNA中的胸腺嘧啶相对应。它在DNA转录过程中发挥着重要的作用，通过与游离的碱基配对形成单链RNA，成为信使RNA，进而发挥核苷酸的遗传功能。尿嘧啶是一种可以配对的碱基，在此过程中遵循配对原则。
尿嘧啶在有机合成和生化研究中得到广泛应用，同时也用于合成药物中间体、动物饲料添加剂、油墨稳定添加剂等。尿嘧啶的生产工艺经过创新，采用一步生产法优化项目产品，取代了昂贵的钯碳法和硫脲法生产工艺，从而降低了生产成本和污染。
当前，中国尿嘧啶行业正面临大宗化工原料市场饱和的挑战。在基础化工品生产发展受阻的情况下，企业转向精细化工和专用化学品领域成为必然选择。行业发展的方向是加强技术创新，调整和优化产品结构，重点开发高性能化、专用化和绿色化产品，以适应行业的周期性变化。
在药物方面，尿嘧啶具有广泛的应用。一方面，它可以作为药物使用，如尿嘧啶替加氟片，用于治疗消化系统癌、乳腺癌和甲状腺癌等疾病。另一方面，它也是合成抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶及其衍生药物的重要中间体，如替加氟、双呋氟尿嘧啶、去氧氟尿苷、卡莫氟和抗病毒5-碘-2‘-脱氧尿苷。
显示全部尿嘧啶是RNA中特有的一种碱基，与DNA中的胸腺嘧啶相对应。它在DNA转录过程中发挥着重要的作用，通过与游离的碱基配对形成单链RNA，成为信使RNA，进而发挥核苷酸的遗传功能。尿嘧啶是一种可以配对的碱基，在此过程中遵循配对原则。
尿嘧啶在有机合成和生化研究中得到广泛应用，同时也用于合成药物中间体、动物饲料添加剂、油墨稳定添加剂等。尿嘧啶的生产工艺经过创新，采用一步生产法优化项目产品，取代了昂贵的钯碳法和硫脲法生产工艺，从而降低了生产成本和污染。
当前，中国尿嘧啶行业正面临大宗化工原料市场饱和的挑战。在基础化工品生产发展受阻的情况下，企业转向精细化工和专用化学品领域成为必然选择。行业发展的方向是加强技术创新，调整和优化产品结构，重点开发高性能化、专用化和绿色化产品，以适应行业的周期性变化。
在药物方面，尿嘧啶具有广泛的应用。一方面，它可以作为药物使用，如尿嘧啶替加氟片，用于治疗消化系统癌、乳腺癌和甲状腺癌等疾病。另一方面，它也是合成抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶及其衍生药物的重要中间体，如替加氟、双呋氟尿嘧啶、去氧氟尿苷、卡莫氟和抗病毒5-碘-2‘-脱氧尿苷。
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CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒是一种高灵敏度的比色检测产品，用于快速检测细胞增殖和细胞毒性。它采用了新型的水溶性四唑盐2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐，能够与细胞内的脱氢酶发生反应，生成橙黄色的水溶性Formazan。Formazan的生成量与活细胞数量成正比，细胞增殖越多越快，颜色越深；细胞毒性越大，颜色越浅。
使用CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒非常简单。以下是使用步骤：
1. 收集细胞，将细胞悬液加入到96孔板中（每孔约5000-10000个细胞），同时设置对照孔。
2. 将孔板置于37℃、5%CO2的培养箱中孵育过夜，并在倒置显微镜下观察。
3. 向每个孔中加入待检测药物溶液，然后继续在37℃下孵育。
4. 在每个孔中加入CCK-8溶液，然后继续在37℃下孵育1-4小时。
5. 同时设置空白孔和对照孔，每组设定3-5个复孔。
该方法可以通过实时定量PCR和Western蛋白印迹检测子宫内膜癌细胞中MLH1、PMS2和MSH6的表达情况，以及通过CCK-8细胞增殖-毒性实验和流式细胞术检测细胞对顺铂药物的敏感性。
具体方法如下：
1. 使用RT-PCR检测细胞中MLH1、PMS2和MSH6的基因表达水平。
2. 使用Western blot法检测细胞中MLH1、PMS2和MSH6的蛋白表达水平。
3. 使用CCK-8细胞增殖-毒性实验检测细胞对不同浓度顺铂处理后的活性，使用流式细胞术检测细胞的凋亡率。
研究结果显示，不同细胞系中MLH1、PMS2和MSH6的表达水平存在显著差异，且细胞对顺铂药物的敏感性也不同。
[1] Hamaya Y, Guarinos C, Tseng-Rogenski SS, Iwaizumi M, Das R, Jover R, Castells A, Llor X, Andreu M, Carethers JM. Efficacy of Adjuvant 5-Fluorouracil Therapy for Patients with EMAST-Positive Stage II/III Colorectal Cancer. PLoS One. 2015.
[2] Yamada M, O'Regan E, Brown R, Karran P. Selective recognition of a cisplatin-DNA adduct by human mismatch repair proteins. Nucleic Acids Research. 1997.
[3] van Boom SS, Yang D, Reedijk J, van der Marel GA, Wang AH. Structural effect of intra-strand cisplatin-crosslink on palindromic DNA sequences. Journal of biomolecular structure & dynamics. 1996.
[4] Wagner MW, Long SL, Morales JC, Galindo CL, Garner HR, Bornmann WG, Boothman DA. Role of c-Abl kinase in DNA mismatch repair-dependent G2 cell cycle checkpoint arrest responses. Journal of Biological Chemistry. 2008.
[5] 李越. 子宫内膜癌DNA错配修复基因表达与顺铂敏感性相关性研究[D]. 山东大学, 2019.
显示全部CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒是一种高灵敏度的比色检测产品，用于快速检测细胞增殖和细胞毒性。它采用了新型的水溶性四唑盐2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐，能够与细胞内的脱氢酶发生反应，生成橙黄色的水溶性Formazan。Formazan的生成量与活细胞数量成正比，细胞增殖越多越快，颜色越深；细胞毒性越大，颜色越浅。
使用CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒非常简单。以下是使用步骤：
1. 收集细胞，将细胞悬液加入到96孔板中（每孔约5000-10000个细胞），同时设置对照孔。
2. 将孔板置于37℃、5%CO2的培养箱中孵育过夜，并在倒置显微镜下观察。
3. 向每个孔中加入待检测药物溶液，然后继续在37℃下孵育。
4. 在每个孔中加入CCK-8溶液，然后继续在37℃下孵育1-4小时。
5. 同时设置空白孔和对照孔，每组设定3-5个复孔。
该方法可以通过实时定量PCR和Western蛋白印迹检测子宫内膜癌细胞中MLH1、PMS2和MSH6的表达情况，以及通过CCK-8细胞增殖-毒性实验和流式细胞术检测细胞对顺铂药物的敏感性。
具体方法如下：
1. 使用RT-PCR检测细胞中MLH1、PMS2和MSH6的基因表达水平。
2. 使用Western blot法检测细胞中MLH1、PMS2和MSH6的蛋白表达水平。
3. 使用CCK-8细胞增殖-毒性实验检测细胞对不同浓度顺铂处理后的活性，使用流式细胞术检测细胞的凋亡率。
研究结果显示，不同细胞系中MLH1、PMS2和MSH6的表达水平存在显著差异，且细胞对顺铂药物的敏感性也不同。
[1] Hamaya Y, Guarinos C, Tseng-Rogenski SS, Iwaizumi M, Das R, Jover R, Castells A, Llor X, Andreu M, Carethers JM. Efficacy of Adjuvant 5-Fluorouracil Therapy for Patients with EMAST-Positive Stage II/III Colorectal Cancer. PLoS One. 2015.
[2] Yamada M, O'Regan E, Brown R, Karran P. Selective recognition of a cisplatin-DNA adduct by human mismatch repair proteins. Nucleic Acids Research. 1997.
[3] van Boom SS, Yang D, Reedijk J, van der Marel GA, Wang AH. Structural effect of intra-strand cisplatin-crosslink on palindromic DNA sequences. Journal of biomolecular structure & dynamics. 1996.
[4] Wagner MW, Long SL, Morales JC, Galindo CL, Garner HR, Bornmann WG, Boothman DA. Role of c-Abl kinase in DNA mismatch repair-dependent G2 cell cycle checkpoint arrest responses. Journal of Biological Chemistry. 2008.
[5] 李越. 子宫内膜癌DNA错配修复基因表达与顺铂敏感性相关性研究[D]. 山东大学, 2019.
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CTLL-2小鼠T淋巴细胞是一种具有细胞毒作用的IL-2依赖型T-细胞株，源自C57BL/6小鼠。这些细胞是从骨髓中的多能干细胞分化而来，而胚胎期则来源于卵黄囊和肝。T淋巴细胞在人体胚胎期和初生期分化成熟，成为具有免疫活性的细胞。
成熟的T细胞定居在外周免疫器官的胸腺依赖区，并通过淋巴管、外周血和组织液等进行再循环，发挥细胞免疫及免疫调节功能。T细胞表面有许多不同的标志，主要是表面抗原和表面受体，这些标志结合在细胞膜上的巨蛋白分子上。
该研究旨在评估淋巴细胞MHC-Ⅰ在肿瘤患者细胞免疫状态中的价值。通过RNAi技术抑制CTL细胞MHC-Ⅰ基因表达，利用单克隆抗体封闭CTL细胞膜表面的MHC-Ⅰ蛋白，研究CTL细胞的功能变化。同时，构建小鼠荷瘤+皮肤移植模型，研究移植排斥反应时外周血淋巴细胞MHC-Ⅰ的表达规律，探讨外周血淋巴细胞MHC-Ⅰ变化对肿瘤生长的影响。
方法包括实时荧光定量PCR检测乳腺癌患者外周血淋巴细胞MHC-Ⅰ不同位点HLA-Ⅰ、HLA-A、HLA-B mRNA的表达变化，利用流式细胞技术检测不同细胞亚群的MHC-Ⅰ蛋白表达，分析外周血淋巴细胞MHC-Ⅰ与乳腺癌分期和进展的关系。此外，通过观察小鼠荷乳腺癌模型中外周血淋巴细胞和肿瘤浸润淋巴细胞MHC-Ⅰ的变化规律，分析它们之间的相互关系。
另外，利用siRNA抑制CTLL-2细胞系中MHC-Ⅰ基因的表达，进一步检测CTLL-2的功能变化。通过抗MHC-Ⅰ单克隆抗体封闭DC细胞诱导的4T1抗原特异性CTL细胞表面的MHC-Ⅰ分子，观察对CTL细胞功能的影响，以研究CTL细胞MHC-Ⅰ的功能。
[1] Duan W M, Westerman M A, Wong G, et al. Rat nigral xenografts survive in the brain of MHC classⅡ-, but not classⅠ-deficient mice. Neuroscience. 2002.
[2] Andresen L, Jensen H, Pedersen M T, et al. Molecular regulation of MHC classⅠchain-related protein A expression after HDAC-inhibitor treatment of Jurkat T cells. J Immunol. 2007.
[3] Sato S, Miura M, Saito M, et al. Implication of genetic polymorphisms for kidney transplant outcome. Nippon Jinzo Gakkai Shi. 2008.
[4] Al-Batran S E, Rafiyan M R, Atmaca A, et al. Intratumoral T-cell infiltrates and MHC classⅠexpression in patients with stageⅣmelanoma. Cancer Research. 2005.
[5] 赵胜梅. 淋巴细胞MHC-I在乳腺癌患者中的表达变化及其对CTL功能的影响[D]. 山东大学, 2010.
显示全部CTLL-2小鼠T淋巴细胞是一种具有细胞毒作用的IL-2依赖型T-细胞株，源自C57BL/6小鼠。这些细胞是从骨髓中的多能干细胞分化而来，而胚胎期则来源于卵黄囊和肝。T淋巴细胞在人体胚胎期和初生期分化成熟，成为具有免疫活性的细胞。
成熟的T细胞定居在外周免疫器官的胸腺依赖区，并通过淋巴管、外周血和组织液等进行再循环，发挥细胞免疫及免疫调节功能。T细胞表面有许多不同的标志，主要是表面抗原和表面受体，这些标志结合在细胞膜上的巨蛋白分子上。
该研究旨在评估淋巴细胞MHC-Ⅰ在肿瘤患者细胞免疫状态中的价值。通过RNAi技术抑制CTL细胞MHC-Ⅰ基因表达，利用单克隆抗体封闭CTL细胞膜表面的MHC-Ⅰ蛋白，研究CTL细胞的功能变化。同时，构建小鼠荷瘤+皮肤移植模型，研究移植排斥反应时外周血淋巴细胞MHC-Ⅰ的表达规律，探讨外周血淋巴细胞MHC-Ⅰ变化对肿瘤生长的影响。
方法包括实时荧光定量PCR检测乳腺癌患者外周血淋巴细胞MHC-Ⅰ不同位点HLA-Ⅰ、HLA-A、HLA-B mRNA的表达变化，利用流式细胞技术检测不同细胞亚群的MHC-Ⅰ蛋白表达，分析外周血淋巴细胞MHC-Ⅰ与乳腺癌分期和进展的关系。此外，通过观察小鼠荷乳腺癌模型中外周血淋巴细胞和肿瘤浸润淋巴细胞MHC-Ⅰ的变化规律，分析它们之间的相互关系。
另外，利用siRNA抑制CTLL-2细胞系中MHC-Ⅰ基因的表达，进一步检测CTLL-2的功能变化。通过抗MHC-Ⅰ单克隆抗体封闭DC细胞诱导的4T1抗原特异性CTL细胞表面的MHC-Ⅰ分子，观察对CTL细胞功能的影响，以研究CTL细胞MHC-Ⅰ的功能。
[1] Duan W M, Westerman M A, Wong G, et al. Rat nigral xenografts survive in the brain of MHC classⅡ-, but not classⅠ-deficient mice. Neuroscience. 2002.
[2] Andresen L, Jensen H, Pedersen M T, et al. Molecular regulation of MHC classⅠchain-related protein A expression after HDAC-inhibitor treatment of Jurkat T cells. J Immunol. 2007.
[3] Sato S, Miura M, Saito M, et al. Implication of genetic polymorphisms for kidney transplant outcome. Nippon Jinzo Gakkai Shi. 2008.
[4] Al-Batran S E, Rafiyan M R, Atmaca A, et al. Intratumoral T-cell infiltrates and MHC classⅠexpression in patients with stageⅣmelanoma. Cancer Research. 2005.
[5] 赵胜梅. 淋巴细胞MHC-I在乳腺癌患者中的表达变化及其对CTL功能的影响[D]. 山东大学, 2010.
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细胞色素P450家族（Cytochrome P450 proteins, CYP450）是一种末端加氧酶，主要存在于细胞内质网和线粒体内膜上，是人体内主要的药物代谢酶，很多严重的甚至致死性的药物相互作用都与其相关。
下面主要以影响CYP450酶系的克拉霉素为代表药物，列举一些与其合用会发生不良反应的药物。
克拉霉素是CYP3A4（CYP450亚家族之一）强抑制剂，与经CYP系统代谢的药物合用会增加发生不良反应的风险。
（1）钙通道阻滞剂
二氢吡啶类的钙通道阻滞剂（CCB）与克拉霉素合用风险最高，硝苯地平最为严重。硝苯地平经CYP3A4系统代谢，而克拉霉素会抑制CYP3A4，从而抑制硝苯地平代谢，增加了其血药浓度，导致低血压、肾损伤。
（2）他汀类
单独服用正常剂量他汀类药物时很少发生横纹肌溶解，而经CYP3A4代谢的洛伐他汀、辛伐他汀与克拉霉素合用时，发生这种不良事件的可能性会增加（不过也有调查显示，瑞舒伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀等虽然不经CYP3A4代谢，与克拉霉素合用同样也有肾损伤和高钾血症的风险）。
（3）磺脲类药物
如格列吡嗪、格列本脲等经CYP450代谢，与克拉霉素联用会增加磺脲类药物的血药浓度，导致低血糖。
同样的原因，克拉霉素与秋水仙碱有显著地相互作用，已有数例死亡报道。
上述药物中，他汀类药物应用较为广泛，很多心血管疾病慢性病患者都需要长期服用他汀类药物。除了上面已经说过克拉霉素与他汀类药物合用会发生相互作用，下列药物与他汀类合用时，也会发生相互作用。因此在服用他汀类药物时需要特别注意。
这些药物与他汀合用会增加不良反应风险：
（1）胺碘酮
胺碘酮与辛伐他汀、洛伐他汀合用时横纹肌溶解的风险会增加，特别是辛伐他汀，与胺碘酮合用其风险呈剂量依赖性。这可能与胺碘酮抑制CYP3A4酶有关。
（2）钙通道阻滞剂
维拉帕米、地尔硫卓能够抑制CYP450，与他汀类有显著地相互作用，二氢吡啶类CCB经CYP450代谢，与他汀类药物存在竞争，同样有增加肌毒性的风险。
（3）唑类抗真菌药
该类所有药物均具有增加他汀类药物毒性的作用。如伊曲康唑主要经CYP3A4代谢，会抑制其他经该途径代谢的药物；氟康唑为CYP2C9的强效抑制剂和CYP3A4的中效抑制剂，会增加他汀类药物的血药浓度。
如果不可避免的使用两种有相互作用的药物，可以错开给药时间防止两种药物浓度同时达到峰值，以减少不良反应。
以上列举的药物相互作用通过下面的图片可以表现的更直观：
显示全部
细胞色素P450家族（Cytochrome P450 proteins, CYP450）是一种末端加氧酶，主要存在于细胞内质网和线粒体内膜上，是人体内主要的药物代谢酶，很多严重的甚至致死性的药物相互作用都与其相关。
下面主要以影响CYP450酶系的克拉霉素为代表药物，列举一些与其合用会发生不良反应的药物。
克拉霉素是CYP3A4（CYP450亚家族之一）强抑制剂，与经CYP系统代谢的药物合用会增加发生不良反应的风险。
（1）钙通道阻滞剂
二氢吡啶类的钙通道阻滞剂（CCB）与克拉霉素合用风险最高，硝苯地平最为严重。硝苯地平经CYP3A4系统代谢，而克拉霉素会抑制CYP3A4，从而抑制硝苯地平代谢，增加了其血药浓度，导致低血压、肾损伤。
（2）他汀类
单独服用正常剂量他汀类药物时很少发生横纹肌溶解，而经CYP3A4代谢的洛伐他汀、辛伐他汀与克拉霉素合用时，发生这种不良事件的可能性会增加（不过也有调查显示，瑞舒伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀等虽然不经CYP3A4代谢，与克拉霉素合用同样也有肾损伤和高钾血症的风险）。
（3）磺脲类药物
如格列吡嗪、格列本脲等经CYP450代谢，与克拉霉素联用会增加磺脲类药物的血药浓度，导致低血糖。
同样的原因，克拉霉素与秋水仙碱有显著地相互作用，已有数例死亡报道。
上述药物中，他汀类药物应用较为广泛，很多心血管疾病慢性病患者都需要长期服用他汀类药物。除了上面已经说过克拉霉素与他汀类药物合用会发生相互作用，下列药物与他汀类合用时，也会发生相互作用。因此在服用他汀类药物时需要特别注意。
这些药物与他汀合用会增加不良反应风险：
（1）胺碘酮
胺碘酮与辛伐他汀、洛伐他汀合用时横纹肌溶解的风险会增加，特别是辛伐他汀，与胺碘酮合用其风险呈剂量依赖性。这可能与胺碘酮抑制CYP3A4酶有关。
（2）钙通道阻滞剂
维拉帕米、地尔硫卓能够抑制CYP450，与他汀类有显著地相互作用，二氢吡啶类CCB经CYP450代谢，与他汀类药物存在竞争，同样有增加肌毒性的风险。
（3）唑类抗真菌药
该类所有药物均具有增加他汀类药物毒性的作用。如伊曲康唑主要经CYP3A4代谢，会抑制其他经该途径代谢的药物；氟康唑为CYP2C9的强效抑制剂和CYP3A4的中效抑制剂，会增加他汀类药物的血药浓度。
如果不可避免的使用两种有相互作用的药物，可以错开给药时间防止两种药物浓度同时达到峰值，以减少不良反应。
以上列举的药物相互作用通过下面的图片可以表现的更直观：
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人十二指肠腺癌细胞是从人十二指肠腺癌组织中分离出的上皮细胞样贴壁细胞系，主要用于人十二指肠腺癌的体外研究。
十二指肠腺癌是起源于十二指肠黏膜上皮的癌症，通常为单发，可由腺瘤恶变而来。组织学上可见腺瘤-腺癌转化及腺癌中的残存腺瘤组织。十二指肠腺癌多发生于降部乳头周围，约占60%，其次为壶腹下段，球部最少见。
1. 取出25cm2培养瓶，用75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2. 细胞传代：
a. 细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃掉培养液，用PBS清洗细胞一次。
b. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，以1000rpm离心5min。
c. 弃掉上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养。
d. 待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
通过比较蛋白质组学的研究手段，利用蓖麻毒蛋白诱导人十二指肠腺癌细胞（HuTu-80）进行实验，分析全蛋白差异表达的情况，为蓖麻毒蛋白在HuTu-80细胞中的作用机理提供新的研究窗口。
1. 首先采用硫酸铵盐析法从蓖麻种子中提取粗素，通过柱层析对其进行纯化，经过处理后得到纯化的蓖麻毒素。测定其浓度后，用获得的蓖麻毒蛋白对HuTu-80细胞进行ICso试验，结果显示细胞形态发生变化，IC50为200ng/ml。
2. 构建蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞凋亡的模型，通过多种实验方法确定蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞早期凋亡时相，并观察细胞色素c的迁移情况。
结果表明，蓖麻毒蛋白对HuTu-80细胞的增殖和生长有明显的抑制作用，IC50为200ng/ml，最佳攻毒时间为8h。同时，HuTu-80细胞的形态和生物化学特征也发生了一系列的变化，细胞核出现皱缩和破裂，释放出致密颗粒状凋亡小体，细胞膜上的磷脂酰丝氨酸出现外翻，而细胞色素c随着蓖麻毒蛋白处理时间的增加，从线粒体易位到细胞浆逐渐显著。
[1] iTRAQ‐coupled two‐dimensional liquid chromatography/tandem mass spectrometric analysis of protein profile in Escherichia coli incubated with human neutrophil peptide 1–potential in antimicrobial strategy[J].Yu SiZhou,MouadLamrani,Mary B.Chan‐Park,Susanna Su JanLeong,Matthew ChangWook,Wei NingChen.Rapid Commun.Mass Spectrom..2010(18)
[2] Waltonitone induces human hepatocellular carcinoma cells apoptosis in vitro and in vivo[J].Zhang Zhang,Shuo Wang,Hong Qiu,Chaohui Duan,Kan Ding,Zhengtao Wang.Cancer Letters.2009(2)
[3] Taurine protects transformed rat retinal ganglion cells from hypoxia-induced apoptosis by preventing mitochondrial dysfunction[J].Ka Chen,Qianyong Zhang,Jian Wang,Fengjin Liu,Mantian Mi,Hongxia Xu,Fang Chen,Kaihong Zeng.Brain Research.2009
[4] Quantitative Proteomic Analysis of Mitochondria in Aging PS-1 Transgenic Mice[J].You-Jun Fu,Shuling Xiong,Mark A.Lovell,Bert C.Lynn.Cellular and Molecular Neurobiology.2009(5)
[5] 栾世慧.蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞凋亡的比较蛋白质组学研究[D].内蒙古民族大学,2012.
显示全部人十二指肠腺癌细胞是从人十二指肠腺癌组织中分离出的上皮细胞样贴壁细胞系，主要用于人十二指肠腺癌的体外研究。
十二指肠腺癌是起源于十二指肠黏膜上皮的癌症，通常为单发，可由腺瘤恶变而来。组织学上可见腺瘤-腺癌转化及腺癌中的残存腺瘤组织。十二指肠腺癌多发生于降部乳头周围，约占60%，其次为壶腹下段，球部最少见。
1. 取出25cm2培养瓶，用75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2. 细胞传代：
a. 细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃掉培养液，用PBS清洗细胞一次。
b. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，以1000rpm离心5min。
c. 弃掉上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养。
d. 待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
通过比较蛋白质组学的研究手段，利用蓖麻毒蛋白诱导人十二指肠腺癌细胞（HuTu-80）进行实验，分析全蛋白差异表达的情况，为蓖麻毒蛋白在HuTu-80细胞中的作用机理提供新的研究窗口。
1. 首先采用硫酸铵盐析法从蓖麻种子中提取粗素，通过柱层析对其进行纯化，经过处理后得到纯化的蓖麻毒素。测定其浓度后，用获得的蓖麻毒蛋白对HuTu-80细胞进行ICso试验，结果显示细胞形态发生变化，IC50为200ng/ml。
2. 构建蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞凋亡的模型，通过多种实验方法确定蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞早期凋亡时相，并观察细胞色素c的迁移情况。
结果表明，蓖麻毒蛋白对HuTu-80细胞的增殖和生长有明显的抑制作用，IC50为200ng/ml，最佳攻毒时间为8h。同时，HuTu-80细胞的形态和生物化学特征也发生了一系列的变化，细胞核出现皱缩和破裂，释放出致密颗粒状凋亡小体，细胞膜上的磷脂酰丝氨酸出现外翻，而细胞色素c随着蓖麻毒蛋白处理时间的增加，从线粒体易位到细胞浆逐渐显著。
[1] iTRAQ‐coupled two‐dimensional liquid chromatography/tandem mass spectrometric analysis of protein profile in Escherichia coli incubated with human neutrophil peptide 1–potential in antimicrobial strategy[J].Yu SiZhou,MouadLamrani,Mary B.Chan‐Park,Susanna Su JanLeong,Matthew ChangWook,Wei NingChen.Rapid Commun.Mass Spectrom..2010(18)
[2] Waltonitone induces human hepatocellular carcinoma cells apoptosis in vitro and in vivo[J].Zhang Zhang,Shuo Wang,Hong Qiu,Chaohui Duan,Kan Ding,Zhengtao Wang.Cancer Letters.2009(2)
[3] Taurine protects transformed rat retinal ganglion cells from hypoxia-induced apoptosis by preventing mitochondrial dysfunction[J].Ka Chen,Qianyong Zhang,Jian Wang,Fengjin Liu,Mantian Mi,Hongxia Xu,Fang Chen,Kaihong Zeng.Brain Research.2009
[4] Quantitative Proteomic Analysis of Mitochondria in Aging PS-1 Transgenic Mice[J].You-Jun Fu,Shuling Xiong,Mark A.Lovell,Bert C.Lynn.Cellular and Molecular Neurobiology.2009(5)
[5] 栾世慧.蓖麻毒蛋白诱导HuTu-80细胞凋亡的比较蛋白质组学研究[D].内蒙古民族大学,2012.
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急性肾损伤（AKI）和进展性慢性肾脏病（CKD）是肾内科常见的两种症候群，它们之间存在密切的关联。AKI是CKD的主要危险因素，可能会转化为CKD，但是AKI转化为CKD的具体机制尚不明确，也没有明确的特异性治疗方法。
鉴于表观遗传修饰在组织纤维化中发挥一定作用，来自哥廷根大学的Bj?rn Tampe博士和他的团队使用缺血再灌注损伤小鼠模型来研究RASAL1基因启动子甲基化异常是否可以促进生理性再生和肾小管间质纤维化的转变，从而推动AKI转化为CKD的发展。研究结果显示，RASAL1基因甲基化和RASAL1转录抑制可以促进AKI转化为CKD，而RASAL1转基因过度表达则对肾脏具有保护作用。此外，RASAL1甲基化还与慢性肾损伤肾脏纤维化以及其他器官纤维化相关。
研究者进一步探讨了脱甲基化制剂肼屈嗪对肾脏的作用。研究结果表明，低剂量肼屈嗪可以诱导羟化酶TET3的表达，从而促进RASAL1羟甲基化和RASAL1基因启动子的脱甲基化。肼屈嗪诱导CpG启动子的脱甲基化可以减缓肾脏纤维化，保护肾功能，而且这种作用与血压降低无关。
研究者总结称，“研究表明，在缺血-再灌注损伤之前给予低剂量肼屈嗪治疗可以防止急性肾损伤转化为慢性肾脏病；而在缺血性损伤发生后给予低剂量肼屈嗪治疗可以抑制AKI进展为CKD。肼屈嗪对人类成纤维细胞去甲基化的作用与小鼠模型一样有效，可以有效减缓AKI患者转化为CKD的过程。”
参考文献：Low-dose hydralazine prevents fibrosis in a murine model of acute kidney injury–to–chronic kidney disease progression.Kidney international. 2017 Jan;91 (1): 157-176.
显示全部急性肾损伤（AKI）和进展性慢性肾脏病（CKD）是肾内科常见的两种症候群，它们之间存在密切的关联。AKI是CKD的主要危险因素，可能会转化为CKD，但是AKI转化为CKD的具体机制尚不明确，也没有明确的特异性治疗方法。
鉴于表观遗传修饰在组织纤维化中发挥一定作用，来自哥廷根大学的Bj?rn Tampe博士和他的团队使用缺血再灌注损伤小鼠模型来研究RASAL1基因启动子甲基化异常是否可以促进生理性再生和肾小管间质纤维化的转变，从而推动AKI转化为CKD的发展。研究结果显示，RASAL1基因甲基化和RASAL1转录抑制可以促进AKI转化为CKD，而RASAL1转基因过度表达则对肾脏具有保护作用。此外，RASAL1甲基化还与慢性肾损伤肾脏纤维化以及其他器官纤维化相关。
研究者进一步探讨了脱甲基化制剂肼屈嗪对肾脏的作用。研究结果表明，低剂量肼屈嗪可以诱导羟化酶TET3的表达，从而促进RASAL1羟甲基化和RASAL1基因启动子的脱甲基化。肼屈嗪诱导CpG启动子的脱甲基化可以减缓肾脏纤维化，保护肾功能，而且这种作用与血压降低无关。
研究者总结称，“研究表明，在缺血-再灌注损伤之前给予低剂量肼屈嗪治疗可以防止急性肾损伤转化为慢性肾脏病；而在缺血性损伤发生后给予低剂量肼屈嗪治疗可以抑制AKI进展为CKD。肼屈嗪对人类成纤维细胞去甲基化的作用与小鼠模型一样有效，可以有效减缓AKI患者转化为CKD的过程。”
参考文献：Low-dose hydralazine prevents fibrosis in a murine model of acute kidney injury–to–chronic kidney disease progression.Kidney international. 2017 Jan;91 (1): 157-176.
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在植物组织培养科研与产业应用中，有一类非常重要的细胞分裂素，它们是反式玉米素（trans-Zeatin）和其衍生物反玉米素核苷（trans-Zeatin Riboside）。但要了解这些细胞分裂素，我们首先需要了解玉米素。
玉米素是一种天然植物细胞分裂素（cytokinins, CKs），在高等植物中广泛存在。它最早是从甜玉米籽粒中提取并结晶出的第一个天然细胞分裂素，后来在椰汁中也发现了玉米素及其衍生物（玉米素核苷）。
作为植物生长调节剂，玉米素不仅能促进侧芽生长，刺激细胞分化（侧端优势），促进愈伤组织和种子发芽，还能防止叶片衰老，逆转芽部受到的毒素伤害和抑制过度根部形成。此外，高浓度的玉米素还能引发不定芽分化。
反玉米素（反式玉米素，trans-Zeatin，tZT）是玉米素的反式异构体，通过与受体高亲和力结合来活化其功能。例如，拟南芥的组氨酸激酶（AHK）中的AHK3受体与反玉米素的结合在调节植物代谢中起着重要作用。
反玉米素核苷（反式玉米素核苷，trans-Zeatin Riboside，tZR）是最活跃和普遍以天然形式存在的细胞分裂素。玉米素核苷存在两种异构体，顺式和反式，其中反式异构体（反玉米素核苷）的活性相对更强。
尽管反玉米素和反玉米素核苷在植物生长调节中发挥重要作用，并广泛应用于科研和农作物培育中，但遗憾的是，市面上几乎找不到纯度超过99%的高纯度标准品。
显示全部在植物组织培养科研与产业应用中，有一类非常重要的细胞分裂素，它们是反式玉米素（trans-Zeatin）和其衍生物反玉米素核苷（trans-Zeatin Riboside）。但要了解这些细胞分裂素，我们首先需要了解玉米素。
玉米素是一种天然植物细胞分裂素（cytokinins, CKs），在高等植物中广泛存在。它最早是从甜玉米籽粒中提取并结晶出的第一个天然细胞分裂素，后来在椰汁中也发现了玉米素及其衍生物（玉米素核苷）。
作为植物生长调节剂，玉米素不仅能促进侧芽生长，刺激细胞分化（侧端优势），促进愈伤组织和种子发芽，还能防止叶片衰老，逆转芽部受到的毒素伤害和抑制过度根部形成。此外，高浓度的玉米素还能引发不定芽分化。
反玉米素（反式玉米素，trans-Zeatin，tZT）是玉米素的反式异构体，通过与受体高亲和力结合来活化其功能。例如，拟南芥的组氨酸激酶（AHK）中的AHK3受体与反玉米素的结合在调节植物代谢中起着重要作用。
反玉米素核苷（反式玉米素核苷，trans-Zeatin Riboside，tZR）是最活跃和普遍以天然形式存在的细胞分裂素。玉米素核苷存在两种异构体，顺式和反式，其中反式异构体（反玉米素核苷）的活性相对更强。
尽管反玉米素和反玉米素核苷在植物生长调节中发挥重要作用，并广泛应用于科研和农作物培育中，但遗憾的是，市面上几乎找不到纯度超过99%的高纯度标准品。
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鼻咽癌细胞系C666-1是一种EBV阳性的鼻咽癌细胞系，来源于阳性鼻咽癌的上皮细胞样贴壁细胞。该细胞系在RPMI-1640培养基中添加10% FBS和1%双抗，在气相条件下（5% CO2，95%空气）以37℃的温度生长。
C666-1鼻咽癌细胞
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中，加入约6ml培养基，培养过夜），第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养瓶中上清液，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加6ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。
3.吹打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：4的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
本研究概述了光动力学疗法（Photodynamic Therapy, PDT）在鼻咽癌治疗中的基础研究和临床应用现状。以往的鼻咽癌的PDT研究中，大多数细胞或动物实验研究所选用的细胞不能持续表达EB病毒，然而临床研究发现，95%的鼻咽癌患者的细胞中检测出EB病毒。
目前，C666-1细胞是唯一能持续表达EB病毒的鼻咽癌细胞。因此，本实验比较研究了HMME-PDT对两种不同类型鼻咽癌细胞C666-1和CNE2的杀伤效应，并对结果进行了深入分析和讨论，为临床鼻咽癌光动力学治疗提供理论基础。
实验结果表明，C666-1和CNE2细胞中HMME的潴留浓度随着孵育时间的增加而增大，但CNE2细胞对HMME的吸收明显高于C666-1；随着孵育时间的增加，两种鼻咽癌细胞对HMME的吸收均趋于饱和。HMME主要分布在C666-1和CNE2细胞的细胞核外周，两者没有显著的差异。
在外界药物孵育浓度相同的情况下，C666-1和CNE2细胞的存活率随光剂量的增加而减小，HMME-PDT对C666-1和CNE2细胞的杀伤效果存在显著差异，CNE2的细胞存活率小于C666-1。当细胞内潴留的药物量基本相同时，两种细胞的存活率没有明显差异。细胞内光敏剂的潴留浓度和光剂量是决定PDT疗效的关键要素。
[1]Fluence rate as a modulator of PDT mechanisms[J].Barbara W.Henderson,Theresa M.Busch,John W.Snyder.Lasers Surg.Med..2006(5)
[2]Expression of Y-Box binding protein-1 following hypericin-mediated photodynamictherapy in well-differentiated nasopharyngeal cancer in vivo[J].Hong-Yan Du,Malini Olivo,Ying-Jie Chen,George Yip,Puay-Hoon Tan,Ken Matsumoto,Masafumi Tsujimoto,Boon-Huat Bay.International Journal of Molecular Medicine.2005(5)
[3]Biodistribution and photodynamic therapy with hypericin in a human NPCmurine tumor model[J].Hong-Yan Du,Boon-Huat Bay,Malini Olivo.International Journal of Oncology.2003(5)
[4]Photodynamic activities of sulfonamide derivatives of porphycene on nasopharyngeal carcinoma cells[J].Nai-Ki Mak,Tsz-Wai Kok,Ricky Ngok-Shun Wong,Sum-Wai Lam,Yan-Kin Lau,Wing-Nang Leung,Nai-Ho Cheung,Dolly P.Huang,Lam-Lung Yeung,Chi K.Chang.Journal of Biomedical Science.2003(4)
[5]陈争.C666-1和CNE2细胞的HMME-PDT杀伤效应实验研究[D].福建师范大学,2009. 显示全部
鼻咽癌细胞系C666-1是一种EBV阳性的鼻咽癌细胞系，来源于阳性鼻咽癌的上皮细胞样贴壁细胞。该细胞系在RPMI-1640培养基中添加10% FBS和1%双抗，在气相条件下（5% CO2，95%空气）以37℃的温度生长。
C666-1鼻咽癌细胞
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中，加入约6ml培养基，培养过夜），第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养瓶中上清液，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加6ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。
3.吹打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：4的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
本研究概述了光动力学疗法（Photodynamic Therapy, PDT）在鼻咽癌治疗中的基础研究和临床应用现状。以往的鼻咽癌的PDT研究中，大多数细胞或动物实验研究所选用的细胞不能持续表达EB病毒，然而临床研究发现，95%的鼻咽癌患者的细胞中检测出EB病毒。
目前，C666-1细胞是唯一能持续表达EB病毒的鼻咽癌细胞。因此，本实验比较研究了HMME-PDT对两种不同类型鼻咽癌细胞C666-1和CNE2的杀伤效应，并对结果进行了深入分析和讨论，为临床鼻咽癌光动力学治疗提供理论基础。
实验结果表明，C666-1和CNE2细胞中HMME的潴留浓度随着孵育时间的增加而增大，但CNE2细胞对HMME的吸收明显高于C666-1；随着孵育时间的增加，两种鼻咽癌细胞对HMME的吸收均趋于饱和。HMME主要分布在C666-1和CNE2细胞的细胞核外周，两者没有显著的差异。
在外界药物孵育浓度相同的情况下，C666-1和CNE2细胞的存活率随光剂量的增加而减小，HMME-PDT对C666-1和CNE2细胞的杀伤效果存在显著差异，CNE2的细胞存活率小于C666-1。当细胞内潴留的药物量基本相同时，两种细胞的存活率没有明显差异。细胞内光敏剂的潴留浓度和光剂量是决定PDT疗效的关键要素。
[1]Fluence rate as a modulator of PDT mechanisms[J].Barbara W.Henderson,Theresa M.Busch,John W.Snyder.Lasers Surg.Med..2006(5)
[2]Expression of Y-Box binding protein-1 following hypericin-mediated photodynamictherapy in well-differentiated nasopharyngeal cancer in vivo[J].Hong-Yan Du,Malini Olivo,Ying-Jie Chen,George Yip,Puay-Hoon Tan,Ken Matsumoto,Masafumi Tsujimoto,Boon-Huat Bay.International Journal of Molecular Medicine.2005(5)
[3]Biodistribution and photodynamic therapy with hypericin in a human NPCmurine tumor model[J].Hong-Yan Du,Boon-Huat Bay,Malini Olivo.International Journal of Oncology.2003(5)
[4]Photodynamic activities of sulfonamide derivatives of porphycene on nasopharyngeal carcinoma cells[J].Nai-Ki Mak,Tsz-Wai Kok,Ricky Ngok-Shun Wong,Sum-Wai Lam,Yan-Kin Lau,Wing-Nang Leung,Nai-Ho Cheung,Dolly P.Huang,Lam-Lung Yeung,Chi K.Chang.Journal of Biomedical Science.2003(4)
[5]陈争.C666-1和CNE2细胞的HMME-PDT杀伤效应实验研究[D].福建师范大学,2009.
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THP-1人单核细胞白血病细胞是从一名1岁的患有急性单核细胞性白血病的男孩的外周血中分离建立。该细胞具有吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力，细胞膜和胞浆内没有免疫球蛋白，表达C3R和FcR，可受佛波酯TPA诱导向单核系方向分化，并可作为转染宿主。
培养条件：RPMI-1640+10%FBS+0.05mM 2-巯基乙醇；温度：37℃气相：95%空气，5%二氧化碳。
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液。
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6。
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。
用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
研究人单核细胞白血病细胞（THP-1细胞）对墨汁、白念珠菌的吞噬情况，初步探讨肌动蛋白在吞噬过程中的作用。
方法：以丙二醇甲醚醋酸酯（Propylene glycol monomethyl ether acetate,PMA）诱导THP-1细胞为巨噬细胞，分别以适量墨汁、灭活的白念珠菌菌悬液与其进行共培养，观察THP-1细胞吞噬情况。并以细胞松弛素-B（Cytochalasin-B,Cyt-B）对THP-1细胞预处理后，观察细胞对白念珠菌吞噬情况。
结果：经PMA诱导后的THP-1细胞形态发生变化，出现胞对培养瓶的附着，并有多形性的细胞形状。与墨汁、白念珠菌共培养后可见细胞内出现大量墨汁、白念珠菌成分。经Cyt-B预处理后的细胞不能吞噬白念珠菌，仅可见少量白念珠菌与细胞黏附。
结论：THP-1细胞经诱导为巨噬细胞后具有吞噬功能，白念珠菌可被诱导后的THP-1细胞吞噬；吞噬过程的发生依赖肌动蛋白的聚集。
[1]THP-1 cell line:An in vitro cell model for immune modulation approach[J].Wasaporn Chanput,Jurriaan J.Mes,Harry J.Wichers.International Immunopharmacology.2014(1)
[2]Reduced PMA enhances the responsiveness of transfected THP-1 macrophages to polarizing stimuli[J].Marten B.Mae?,Berith Wittig,Andrea Cignarella,Stefan Lorkowski.Journal of Immunological Methods.2013
[3]TNF-αsignalling and inflammation:interactions between old acquaintances[J].Hana Zelová,Jan Ho?ek.Inflammation Research.2013(7)
[4]The possible role of dermatophyte cysteine dioxygenase in keratin degradation[J].Alena Kasperova,Jiri Kunert,Milan Raska.Medical Mycology.2013(5)
[5]段志敏.白念珠菌诱导人单核细胞白血病细胞（THP-1细胞）固有免疫应答机制的初步研究[D].北京协和医学院,2015.
显示全部THP-1人单核细胞白血病细胞是从一名1岁的患有急性单核细胞性白血病的男孩的外周血中分离建立。该细胞具有吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力，细胞膜和胞浆内没有免疫球蛋白，表达C3R和FcR，可受佛波酯TPA诱导向单核系方向分化，并可作为转染宿主。
培养条件：RPMI-1640+10%FBS+0.05mM 2-巯基乙醇；温度：37℃气相：95%空气，5%二氧化碳。
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液。
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:6。
3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。
用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
研究人单核细胞白血病细胞（THP-1细胞）对墨汁、白念珠菌的吞噬情况，初步探讨肌动蛋白在吞噬过程中的作用。
方法：以丙二醇甲醚醋酸酯（Propylene glycol monomethyl ether acetate,PMA）诱导THP-1细胞为巨噬细胞，分别以适量墨汁、灭活的白念珠菌菌悬液与其进行共培养，观察THP-1细胞吞噬情况。并以细胞松弛素-B（Cytochalasin-B,Cyt-B）对THP-1细胞预处理后，观察细胞对白念珠菌吞噬情况。
结果：经PMA诱导后的THP-1细胞形态发生变化，出现胞对培养瓶的附着，并有多形性的细胞形状。与墨汁、白念珠菌共培养后可见细胞内出现大量墨汁、白念珠菌成分。经Cyt-B预处理后的细胞不能吞噬白念珠菌，仅可见少量白念珠菌与细胞黏附。
结论：THP-1细胞经诱导为巨噬细胞后具有吞噬功能，白念珠菌可被诱导后的THP-1细胞吞噬；吞噬过程的发生依赖肌动蛋白的聚集。
[1]THP-1 cell line:An in vitro cell model for immune modulation approach[J].Wasaporn Chanput,Jurriaan J.Mes,Harry J.Wichers.International Immunopharmacology.2014(1)
[2]Reduced PMA enhances the responsiveness of transfected THP-1 macrophages to polarizing stimuli[J].Marten B.Mae?,Berith Wittig,Andrea Cignarella,Stefan Lorkowski.Journal of Immunological Methods.2013
[3]TNF-αsignalling and inflammation:interactions between old acquaintances[J].Hana Zelová,Jan Ho?ek.Inflammation Research.2013(7)
[4]The possible role of dermatophyte cysteine dioxygenase in keratin degradation[J].Alena Kasperova,Jiri Kunert,Milan Raska.Medical Mycology.2013(5)
[5]段志敏.白念珠菌诱导人单核细胞白血病细胞（THP-1细胞）固有免疫应答机制的初步研究[D].北京协和医学院,2015.
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线粒体外膜具有孔蛋白，当孔蛋白通道完全打开时，能够容纳相对分子质量为5KDa的分子。除了ATP和辅酶A等相对分子质量小于1KDa的物质外，其他物质也能自由通过外膜。由于外膜的高通透性，使得线粒体间隙的环境与胞质溶胶非常相似。丙酮酸的分子量为88.06，因此它可以轻松穿过线粒体外膜。
相比之下，线粒体内膜对物质的通透性较低，需要依赖特定的转运蛋白来控制分子和离子的运输。
由于丙酮酸是带电分子，它通过主动运输的方式进入细胞：
对于丙酮酸进入线粒体内膜的主动运输，能量并非来自ATP，而是与氢离子一起同向转入线粒体基质中，即次级主动运输：
显示全部
线粒体外膜具有孔蛋白，当孔蛋白通道完全打开时，能够容纳相对分子质量为5KDa的分子。除了ATP和辅酶A等相对分子质量小于1KDa的物质外，其他物质也能自由通过外膜。由于外膜的高通透性，使得线粒体间隙的环境与胞质溶胶非常相似。丙酮酸的分子量为88.06，因此它可以轻松穿过线粒体外膜。
相比之下，线粒体内膜对物质的通透性较低，需要依赖特定的转运蛋白来控制分子和离子的运输。
由于丙酮酸是带电分子，它通过主动运输的方式进入细胞：
对于丙酮酸进入线粒体内膜的主动运输，能量并非来自ATP，而是与氢离子一起同向转入线粒体基质中，即次级主动运输：
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全基因组重测序是一种通过对物种不同个体进行基因组测序，并进行遗传差异性分析的方法。它可以发现大量的变异位点，如单核苷酸多态性位点（SNP）、拷贝数变异（CNV）、插入缺失（InDel）和结构变异（SV）等。
这些变异位点可以作为分子遗传标记，对人类复杂疾病、动植物经济性状和育种研究、物种起源、驯化和群体历史动态等方面具有重要的指导意义。
全基因组重测序涉及的技术和实验参数有很多。
在进行全基因组重测序时，样本的选择规则可以根据遗传群体和自然群体来确定。
题目：Widespread Structural Variation对番茄基因表达和作物改良的主要影响
杂志和时间：Cell，2020年6月17日
IF：41.582
样本选择：100个不同番茄品系，14个新的参考基因组
重要意义：揭示了SV在植物基因组中的普遍性和重要性，并证明了SV在性状变异中的未充分探索的作用
主要内容和结论：
该研究使用ONT长读测序从100种不同的野生和驯化番茄种质中鉴定出SV
将这些复杂的等位基因与影响水果风味、大小和生产力的多种驯化和改良性状直接关联
使用CRISPR-Cas9基因组编辑来证明基因剂量与表型之间的因果定量关系
构建了最全面的panSV基因组，并研究了其在进化、驯化、定量遗传学和育种中的意义。
显示全部全基因组重测序是一种通过对物种不同个体进行基因组测序，并进行遗传差异性分析的方法。它可以发现大量的变异位点，如单核苷酸多态性位点（SNP）、拷贝数变异（CNV）、插入缺失（InDel）和结构变异（SV）等。
这些变异位点可以作为分子遗传标记，对人类复杂疾病、动植物经济性状和育种研究、物种起源、驯化和群体历史动态等方面具有重要的指导意义。
全基因组重测序涉及的技术和实验参数有很多。
在进行全基因组重测序时，样本的选择规则可以根据遗传群体和自然群体来确定。
题目：Widespread Structural Variation对番茄基因表达和作物改良的主要影响
杂志和时间：Cell，2020年6月17日
IF：41.582
样本选择：100个不同番茄品系，14个新的参考基因组
重要意义：揭示了SV在植物基因组中的普遍性和重要性，并证明了SV在性状变异中的未充分探索的作用
主要内容和结论：
该研究使用ONT长读测序从100种不同的野生和驯化番茄种质中鉴定出SV
将这些复杂的等位基因与影响水果风味、大小和生产力的多种驯化和改良性状直接关联
使用CRISPR-Cas9基因组编辑来证明基因剂量与表型之间的因果定量关系
构建了最全面的panSV基因组，并研究了其在进化、驯化、定量遗传学和育种中的意义。
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6-巯基嘌呤和硫唑嘌呤是常用的免疫抑制剂，主要副作用是骨髓抑制。研究表明，巯基嘌呤甲基转移酶(TPMT)和NUDT15基因多态性与患者发生骨髓抑制的风险密切相关。
巯基嘌呤和硫唑嘌呤通过抑制淋巴细胞增殖发挥免疫抑制作用，广泛应用于移植后免疫抑制、炎症性肠病和急性淋巴细胞白血病等治疗。然而，患者在使用这些药物时常出现不同程度的骨髓抑制，严重情况下需要停药。
TPMT是硫唑嘌呤类药物代谢过程中的重要酶，其活性直接影响药物的疗效和毒性。酶活性偏低会导致6-硫代鸟嘌呤核苷酸（6-TGN）浓度过高，后者具有明显的细胞毒性，易引发骨髓抑制。
TPMT基因状态会影响酶的活性，与骨髓抑制直接相关。研究显示，TPMT基因纯合突变者在接受常规剂量的巯基嘌呤治疗时，100%出现严重骨髓抑制；杂合突变者发生骨髓抑制的可能性为30~60%。因此，美国FDA已将TPMT基因型检测列入巯基嘌呤的药品说明书，建议服用此类药物的患者进行基因型检测。
TPMT基因的多态性只能部分解释骨髓抑制的原因，仅测定TPMT基因型无法全面预测骨髓抑制的发生。2014年的研究报道NUDT15（R139C）与硫唑嘌呤引起的早期骨髓抑制直接相关；体外实验也证实NUDT15基因编码的酶能使硫唑嘌呤代谢产物失活，同时降低其毒性作用。携带NUDT15失功能等位基因的患者，体内硫唑嘌呤活性代谢产物浓度高，毒性作用强。研究显示，TPMT基因突变在汉族人群中分布频率较低（1~2%），而NUDT15（R139C）基因突变的分布频率可高达10%。
中山医院检验科开展了6-巯基嘌呤和硫唑嘌呤不良反应相关基因检测项目，包括TPMT*2/*3/*4和NUDT15（R139C）。至今已检测数百例临床样本。通过联合相关基因检测，结合定期随访血常规、肝肾功能，注意患者宣教，协助临床全面评估患者发生骨髓抑制的风险，可最大限度减少药物不良反应事件的发生。
来源：复旦大学附属中山医院检验科
显示全部6-巯基嘌呤和硫唑嘌呤是常用的免疫抑制剂，主要副作用是骨髓抑制。研究表明，巯基嘌呤甲基转移酶(TPMT)和NUDT15基因多态性与患者发生骨髓抑制的风险密切相关。
巯基嘌呤和硫唑嘌呤通过抑制淋巴细胞增殖发挥免疫抑制作用，广泛应用于移植后免疫抑制、炎症性肠病和急性淋巴细胞白血病等治疗。然而，患者在使用这些药物时常出现不同程度的骨髓抑制，严重情况下需要停药。
TPMT是硫唑嘌呤类药物代谢过程中的重要酶，其活性直接影响药物的疗效和毒性。酶活性偏低会导致6-硫代鸟嘌呤核苷酸（6-TGN）浓度过高，后者具有明显的细胞毒性，易引发骨髓抑制。
TPMT基因状态会影响酶的活性，与骨髓抑制直接相关。研究显示，TPMT基因纯合突变者在接受常规剂量的巯基嘌呤治疗时，100%出现严重骨髓抑制；杂合突变者发生骨髓抑制的可能性为30~60%。因此，美国FDA已将TPMT基因型检测列入巯基嘌呤的药品说明书，建议服用此类药物的患者进行基因型检测。
TPMT基因的多态性只能部分解释骨髓抑制的原因，仅测定TPMT基因型无法全面预测骨髓抑制的发生。2014年的研究报道NUDT15（R139C）与硫唑嘌呤引起的早期骨髓抑制直接相关；体外实验也证实NUDT15基因编码的酶能使硫唑嘌呤代谢产物失活，同时降低其毒性作用。携带NUDT15失功能等位基因的患者，体内硫唑嘌呤活性代谢产物浓度高，毒性作用强。研究显示，TPMT基因突变在汉族人群中分布频率较低（1~2%），而NUDT15（R139C）基因突变的分布频率可高达10%。
中山医院检验科开展了6-巯基嘌呤和硫唑嘌呤不良反应相关基因检测项目，包括TPMT*2/*3/*4和NUDT15（R139C）。至今已检测数百例临床样本。通过联合相关基因检测，结合定期随访血常规、肝肾功能，注意患者宣教，协助临床全面评估患者发生骨髓抑制的风险，可最大限度减少药物不良反应事件的发生。
来源：复旦大学附属中山医院检验科
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达沙替尼是一种针对慢性髓细胞样白血病（CML）的治疗药物，适用于那些对甲磺酸伊马替尼等治疗方案耐药或不能耐受的大人患者，包括慢性期、加速期、淋巴细胞急变期和髓细胞急变期。
达沙替尼最早由百时美施贵宝公司研发，并于2006年6月在美国获准上市，11月在欧盟上市，商品名为SPRYCEL。目前，达沙替尼片已在64个国家获得上市批准。
达沙替尼是一种强效的酪氨酸激酶多靶点抑制剂，与伊马替尼和尼洛替尼相比，它属于多靶点药物，对BCR-ABL、SRC、c-KIT、PDGFR和Ephrin（EPH）等5种关键性致癌酪氨酸蛋白激酶均有作用。达沙替尼对BCR-ABL融合基因的体外抑制作用是伊马替尼的325倍，是尼洛替尼的16倍，并且可以抑制绝大部分BCL-ABL突变。
达沙替尼是一种针对慢性髓细胞样白血病（CML）的治疗药物，适用于那些对甲磺酸伊马替尼等治疗方案耐药或不能耐受的大人患者，包括慢性期、加速期、淋巴细胞急变期和髓细胞急变期。
达沙替尼最早由百时美施贵宝公司研发，并于2006年6月在美国获准上市，11月在欧盟上市，商品名为SPRYCEL。目前，达沙替尼片已在64个国家获得上市批准。
达沙替尼是一种强效的酪氨酸激酶多靶点抑制剂，与伊马替尼和尼洛替尼相比，它属于多靶点药物，对BCR-ABL、SRC、c-KIT、PDGFR和Ephrin（EPH）等5种关键性致癌酪氨酸蛋白激酶均有作用。达沙替尼对BCR-ABL融合基因的体外抑制作用是伊马替尼的325倍，是尼洛替尼的16倍，并且可以抑制绝大部分BCL-ABL突变。
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随着现代医学技术的不断进步，药物的研发、制备和应用也在不断更新。脂质体作为一种新型的药物传递系统，已经被广泛应用于药物研发和制备领域。紫杉醇脂质体作为一种新型的药物传递系统，受到了广泛关注。本文将从紫杉醇脂质体的制备和应用两个方面进行探究，以期为读者提供更全面的了解。
一、紫杉醇脂质体的制备
紫杉醇是一种在肿瘤治疗中广泛应用的有效药物，但其生物利用度低、副作用大等问题限制了其在临床上的应用。为了克服这些问题，人们开始研究如何将紫杉醇转化为脂质体，以提高药物的生物利用度和减少其副作用。紫杉醇脂质体的制备方法主要有以下几种：
1. 膜法制备法
膜法制备法是将紫杉醇和脂质体溶液通过超滤膜进行混合，形成紫杉醇脂质体。这种方法操作简单，但存在紫杉醇溶解度低、难以均匀分布等问题。
2. 乳化法制备法
乳化法制备法是将紫杉醇和脂质体溶液通过机械力或超声波进行乳化，形成紫杉醇脂质体。这种方法制备的紫杉醇脂质体分散性好，但存在乳化时间长、成本高等问题。
3. 脂质膜转移法
脂质膜转移法是将紫杉醇和脂质体溶液通过机械力或超声波进行混合，形成紫杉醇脂质体。这种方法操作简单，但存在脂质体稳定性差、紫杉醇与脂质体分离等问题。
二、紫杉醇脂质体的应用
紫杉醇脂质体作为一种新型的药物传递系统，在药物研发和制备领域具有广泛的应用前景。其主要应用于以下几个方面：
1. 肿瘤治疗
紫杉醇脂质体可以通过改善药物的生物利用度和靶向性，提高药物的疗效和减少副作用，从而在肿瘤治疗中发挥重要作用。目前已有多项研究表明，紫杉醇脂质体可以有效地抑制多种肿瘤细胞的生长和扩散，具有良好的临床应用前景。
2. 药物传递
紫杉醇脂质体可以有效地改善药物的传递效率和靶向性，从而提高药物的生物利用度和疗效。其可以被用于传递多种药物，包括抗生素、抗病毒药物、抗肿瘤药物等，具有广泛的应用前景。
3. 神经保护
紫杉醇脂质体可以通过改善神经元的生存环境，提高神经元的存活率和功能，从而对神经系统的保护和修复具有重要的作用。其可以被用于治疗多种神经系统疾病，包括帕金森病、阿尔茨海默病等，具有广泛的应用前景。
综上所述，紫杉醇脂质体作为一种新型的药物传递系统，在药物研发和制备领域具有广泛的应用前景。其制备方法多种多样，应用范围广泛，未来将有更多的研究投入其中，为人类健康事业做出更大的贡献。
显示全部随着现代医学技术的不断进步，药物的研发、制备和应用也在不断更新。脂质体作为一种新型的药物传递系统，已经被广泛应用于药物研发和制备领域。紫杉醇脂质体作为一种新型的药物传递系统，受到了广泛关注。本文将从紫杉醇脂质体的制备和应用两个方面进行探究，以期为读者提供更全面的了解。
一、紫杉醇脂质体的制备
紫杉醇是一种在肿瘤治疗中广泛应用的有效药物，但其生物利用度低、副作用大等问题限制了其在临床上的应用。为了克服这些问题，人们开始研究如何将紫杉醇转化为脂质体，以提高药物的生物利用度和减少其副作用。紫杉醇脂质体的制备方法主要有以下几种：
1. 膜法制备法
膜法制备法是将紫杉醇和脂质体溶液通过超滤膜进行混合，形成紫杉醇脂质体。这种方法操作简单，但存在紫杉醇溶解度低、难以均匀分布等问题。
2. 乳化法制备法
乳化法制备法是将紫杉醇和脂质体溶液通过机械力或超声波进行乳化，形成紫杉醇脂质体。这种方法制备的紫杉醇脂质体分散性好，但存在乳化时间长、成本高等问题。
3. 脂质膜转移法
脂质膜转移法是将紫杉醇和脂质体溶液通过机械力或超声波进行混合，形成紫杉醇脂质体。这种方法操作简单，但存在脂质体稳定性差、紫杉醇与脂质体分离等问题。
二、紫杉醇脂质体的应用
紫杉醇脂质体作为一种新型的药物传递系统，在药物研发和制备领域具有广泛的应用前景。其主要应用于以下几个方面：
1. 肿瘤治疗
紫杉醇脂质体可以通过改善药物的生物利用度和靶向性，提高药物的疗效和减少副作用，从而在肿瘤治疗中发挥重要作用。目前已有多项研究表明，紫杉醇脂质体可以有效地抑制多种肿瘤细胞的生长和扩散，具有良好的临床应用前景。
2. 药物传递
紫杉醇脂质体可以有效地改善药物的传递效率和靶向性，从而提高药物的生物利用度和疗效。其可以被用于传递多种药物，包括抗生素、抗病毒药物、抗肿瘤药物等，具有广泛的应用前景。
3. 神经保护
紫杉醇脂质体可以通过改善神经元的生存环境，提高神经元的存活率和功能，从而对神经系统的保护和修复具有重要的作用。其可以被用于治疗多种神经系统疾病，包括帕金森病、阿尔茨海默病等，具有广泛的应用前景。
综上所述，紫杉醇脂质体作为一种新型的药物传递系统，在药物研发和制备领域具有广泛的应用前景。其制备方法多种多样，应用范围广泛，未来将有更多的研究投入其中，为人类健康事业做出更大的贡献。
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胃粘膜上皮细胞提取物是从小鼠胃粘膜上皮细胞中提取的，可用于基因克隆、表达谱分析和分子生物学实验等研究。
上皮细胞是覆盖身体表面和内部器官腔内的细胞，具有明显的极性，分为自由面和基底面。上皮细胞的角形成和更新能力强，具有保护、吸收、分泌和排泄等功能。
胃粘膜由上皮细胞、固有层和粘膜肌层组成，每个胃单位由不同类型的细胞组成。小鼠胃黏膜上皮细胞的更新速度快，各种细胞处于动态平衡状态。
胃粘膜是胃壁的最内层，具有复杂的皱纹结构。
胃粘膜上皮细胞提取物可用于构建胃粘膜上皮细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。
胃上皮细胞的更新速度和细胞分化、增殖、凋亡的变化直接影响胃黏膜结构的稳定性，与胃相关疾病的发生有关。
胃粘膜上皮细胞的不同类型来源于多能干细胞，具有不同的功能和更新速度。
顶端细胞位于粘膜层最外侧，起着屏障作用；壁细胞分泌盐酸，是胃粘膜中最主要的细胞类型。
吸烟、体重指数、胃食管反流病和非Walooidal 抗炎药的使用以及P53 过表达引起的食管癌和胃癌亚型的风险Marilie D. Gammon、Thomas L. Vaughan、Harvey A. Risch、Fang-Fang Zhang、David E. Kleiner、William P. Bennett、Christine L. Howe、Robert Dubrow、Susan T. Mayne、Joseph F. Fraumeni、Wong-Ho Chow。癌症导致控制。 2009 (3)
胃癌的细胞起源[J].Sherif M.Karam.纽约科学院年鉴.2008(1)
胃粘膜防御和细胞保护： 从工作台到床边[J].Loren Laine,Koji Takeuchi,Andrzej Tarnawski.Gastroenterology.2008(1)
胃肠道干细胞生态位[J].Tzung-Hai Yen,Nicholas A.Wright.Stem Cell Reviews.2006(3)
200 4（ 3）
[6] Ki-67和环加氧酶-2在儿童幽门螺杆菌胃炎中的组织病理学及表达[J]. Kyung Mo Kim、Young Lyun Oh、Jae Sung Ko、Yon Ho Choe、Jeong Kee Seo。胃肠病学杂志。 2004 (3)
[7] TGF-信号从细胞膜到细胞核的机制[J] Yigong Shi，Joan Massagu。细胞。 2003 (6)
[8] 赵增明胃黏膜上皮细胞特异表达Cre重组酶转基因小鼠的构建[D].中国军事医学科学院， 2009. 显示全部
胃粘膜上皮细胞提取物是从小鼠胃粘膜上皮细胞中提取的，可用于基因克隆、表达谱分析和分子生物学实验等研究。
上皮细胞是覆盖身体表面和内部器官腔内的细胞，具有明显的极性，分为自由面和基底面。上皮细胞的角形成和更新能力强，具有保护、吸收、分泌和排泄等功能。
胃粘膜由上皮细胞、固有层和粘膜肌层组成，每个胃单位由不同类型的细胞组成。小鼠胃黏膜上皮细胞的更新速度快，各种细胞处于动态平衡状态。
胃粘膜是胃壁的最内层，具有复杂的皱纹结构。
胃粘膜上皮细胞提取物可用于构建胃粘膜上皮细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。
胃上皮细胞的更新速度和细胞分化、增殖、凋亡的变化直接影响胃黏膜结构的稳定性，与胃相关疾病的发生有关。
胃粘膜上皮细胞的不同类型来源于多能干细胞，具有不同的功能和更新速度。
顶端细胞位于粘膜层最外侧，起着屏障作用；壁细胞分泌盐酸，是胃粘膜中最主要的细胞类型。
吸烟、体重指数、胃食管反流病和非Walooidal 抗炎药的使用以及P53 过表达引起的食管癌和胃癌亚型的风险Marilie D. Gammon、Thomas L. Vaughan、Harvey A. Risch、Fang-Fang Zhang、David E. Kleiner、William P. Bennett、Christine L. Howe、Robert Dubrow、Susan T. Mayne、Joseph F. Fraumeni、Wong-Ho Chow。癌症导致控制。 2009 (3)
胃癌的细胞起源[J].Sherif M.Karam.纽约科学院年鉴.2008(1)
胃粘膜防御和细胞保护： 从工作台到床边[J].Loren Laine,Koji Takeuchi,Andrzej Tarnawski.Gastroenterology.2008(1)
胃肠道干细胞生态位[J].Tzung-Hai Yen,Nicholas A.Wright.Stem Cell Reviews.2006(3)
200 4（ 3）
[6] Ki-67和环加氧酶-2在儿童幽门螺杆菌胃炎中的组织病理学及表达[J]. Kyung Mo Kim、Young Lyun Oh、Jae Sung Ko、Yon Ho Choe、Jeong Kee Seo。胃肠病学杂志。 2004 (3)
[7] TGF-信号从细胞膜到细胞核的机制[J] Yigong Shi，Joan Massagu。细胞。 2003 (6)
[8] 赵增明胃黏膜上皮细胞特异表达Cre重组酶转基因小鼠的构建[D].中国军事医学科学院， 2009.
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LY2603618，也被称为Rabusertib，CAS号911222-45-2。它是一种用于研究治疗癌症、实体瘤、晚期癌症、胰腺肿瘤和非小细胞肺癌的试验药物。那么，LY2603618的生物活性是什么？如何进行实验呢？下面将详细介绍。
首先，让我们了解LY2603618的生物活性：
1）体外活性
LY2603618是一种ATP依赖性丝氨酸-苏氨酸激酶Chk1的抑制剂。Chk1是DNA复制监测检查点系统中的关键组分，有助于各个细胞周期检查点的功能。通过抑制Chk1的活性，LY2603618可以阻止由DNA损伤剂引起的DNA修复，从而增强化疗药物的抗肿瘤效果。然而，关于LY2603618的临床前数据尚未公布。
预计抑制Chk1会增强吉西他滨等抗代谢物的作用。LY2603618处理可以损害DNA合成，增加DNA损伤，诱导细胞凋亡，并与培美曲塞具有协同活性，尤其是在p53突变肿瘤细胞中。
2）体内活性
在携带Calu-6异种移植物的小鼠中，通过给予150mg/kg（IP）吉西他滨和单次200mg/kg口服剂量的LY2603618处理，可以在2小时内抑制85%的Chk1自身磷酸化。LY2603618还可以有效减少吉西他滨诱导的Tlk丝氨酸695的磷酸化，这支持了选择性化学抑制剂Chk1的报道。
现在，让我们来看看如何进行LY2603618的活性实验。一般来说，有以下三种方法：
1）细胞实验
将细胞以每孔2.5×103的密度铺板于96孔组织培养板上，并在细胞倍增（18-24小时）后进行实验。通过稀释吉西他滨和LY2603618的浓度来进行处理。在添加LY2603618后一段时间，使用MTS/PMS试剂进行细胞增殖检测，并通过分光光度计读取吸光度数据进行分析。
2）动物实验
使用小鼠进行实验。通过皮下注射Calu-6细胞来建立肿瘤模型，然后将小鼠随机分组并进行不同治疗的注射或口服。通过监测肿瘤大小和体重来评估治疗效果。
3）激酶实验
使用不同的方法对多种蛋白激酶进行测定，包括ABL、AKT1、ARG、CAMK2、CDK1、CDK2、CHK1、CHK2等。
综上所述，LY2603618是一种有效的选择性Chk1抑制剂，具有潜在的化学增强活性。它的生物活性可以通过细胞实验、动物实验和激酶实验进行评估。
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诺考达唑是一种微管聚合的合成抑制剂，对多种癌症相关激酶具有高亲和力。它能够抑制ABL、ABL(E255K)和ABL(T315I)的活性，同时对微管的组装和拆卸动力学也有破坏作用。
在体外实验中，诺考达唑显示出对多种激酶的结合亲和力，包括c-KIT、BRAF和MEK等。它还对MAPK途径的组分表现出良好的结合亲和力。此外，诺考达唑对不同类型的微管亲和力也有差异，对αβIV的亲和力最高，对αβIII的亲和力最低。
在体内实验中，诺考达唑与酮康唑联用可以增强对肿瘤的凋亡诱导效果，并且对肿瘤体积和重量的抑制效果更强。
动物实验中使用具有COLO-205肿瘤异种移植物的裸鼠作为模型。细胞实验中使用COLO 205细胞，细胞在含有10％FCS的RPMI 1640培养基中生长。实验中通过连续两次胰蛋白酶消化收获细胞，并进行皮下注射到裸鼠体内。
综上所述，诺考达唑是一种具有抗癌活性的微管聚合抑制剂，对多种癌症相关激酶具有高亲和力。它的使用可以增强对肿瘤的凋亡诱导效果，并且在体内实验中显示出抑制肿瘤生长的效果。
显示全部诺考达唑是一种微管聚合的合成抑制剂，对多种癌症相关激酶具有高亲和力。它能够抑制ABL、ABL(E255K)和ABL(T315I)的活性，同时对微管的组装和拆卸动力学也有破坏作用。
在体外实验中，诺考达唑显示出对多种激酶的结合亲和力，包括c-KIT、BRAF和MEK等。它还对MAPK途径的组分表现出良好的结合亲和力。此外，诺考达唑对不同类型的微管亲和力也有差异，对αβIV的亲和力最高，对αβIII的亲和力最低。
在体内实验中，诺考达唑与酮康唑联用可以增强对肿瘤的凋亡诱导效果，并且对肿瘤体积和重量的抑制效果更强。
动物实验中使用具有COLO-205肿瘤异种移植物的裸鼠作为模型。细胞实验中使用COLO 205细胞，细胞在含有10％FCS的RPMI 1640培养基中生长。实验中通过连续两次胰蛋白酶消化收获细胞，并进行皮下注射到裸鼠体内。
综上所述，诺考达唑是一种具有抗癌活性的微管聚合抑制剂，对多种癌症相关激酶具有高亲和力。它的使用可以增强对肿瘤的凋亡诱导效果，并且在体内实验中显示出抑制肿瘤生长的效果。
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醋酸棉酚是一种从棉籽中提取的多酚化合物，具有与Bcl-2、Bcl-xL和Mcl-1结合的能力，但不会抑制BIR3结构域和BID。醋酸棉酚在体外和体内都显示出抗癌活性。1
简介
几丁聚糖在医学领域的主要贡献是抑制癌细胞转移。虽然过去有许多抗癌药物，但没有抑制癌细胞转移的药物。几丁聚糖（救多善）口服后可以达到抑制癌细胞转移的效果。经过七年的研究，得出结论：几丁聚糖具有与血管壁细胞膜上的分子结合的特性，使癌细胞无法附着和移动，从而阻断了癌细胞转移的途径。
几丁聚糖本身与癌细胞无关，它的抗癌作用是间接的。以下是几个方面的作用：
1、激活或提高自身免疫细胞的抗癌活性。
自身免疫细胞对癌细胞发起攻击，这是目前医学对抗癌的最后希望。据国外统计，早期癌症的自愈率超过10%，因为对早期癌症的发现和治疗还相对滞后。
2、中和肿瘤周围的酸性物质。
癌细胞的代谢方式类似于糖尿病，容易产生酸性物质，这些物质会在肿瘤周围形成保护层，降低免疫细胞的抗癌功能。几丁聚糖可以中和这些酸性物质，使癌细胞变得脆弱，使抗癌免疫细胞能够进攻癌细胞。
3、与化疗药物联合使用。
几丁聚糖和丝裂霉素联合使用，丝裂霉素是一种有效的抗癌药物，但副作用较大。几丁聚糖可以作为载体，将丝裂霉素结合在一起，改善其作用，缓解副作用，最大限度地攻击癌细胞而不损伤正常细胞。
4、几丁聚糖可以作为人体的环保剂。
在化疗过程中与几丁聚糖合用，可以降低药物的毒副作用。许多肿瘤病人在化疗过程中白细胞不减低，头发不脱落，症状没有改变。几丁聚糖可以吸附癌细胞代谢产物，改善病人的症状，减轻痛苦。对于晚期癌症病人，它可以改善症状，延缓生命。
因此，几丁聚糖被欧美和亚洲国家认定为机能性保健食品。灵芝、冬虫夏草等植物中也含有微量的几丁聚糖，但含量较低。几丁聚糖具有抗癌、抑制癌细胞转移、提高免疫力和护肝解毒的作用。特别适用于糖尿病、肝肾病、高血压、肥胖等疾病，有助于预防癌细胞的发生和辅助放化疗治疗肿瘤。
显示全部简介
几丁聚糖在医学领域的主要贡献是抑制癌细胞转移。虽然过去有许多抗癌药物，但没有抑制癌细胞转移的药物。几丁聚糖（救多善）口服后可以达到抑制癌细胞转移的效果。经过七年的研究，得出结论：几丁聚糖具有与血管壁细胞膜上的分子结合的特性，使癌细胞无法附着和移动，从而阻断了癌细胞转移的途径。
几丁聚糖本身与癌细胞无关，它的抗癌作用是间接的。以下是几个方面的作用：
1、激活或提高自身免疫细胞的抗癌活性。
自身免疫细胞对癌细胞发起攻击，这是目前医学对抗癌的最后希望。据国外统计，早期癌症的自愈率超过10%，因为对早期癌症的发现和治疗还相对滞后。
2、中和肿瘤周围的酸性物质。
癌细胞的代谢方式类似于糖尿病，容易产生酸性物质，这些物质会在肿瘤周围形成保护层，降低免疫细胞的抗癌功能。几丁聚糖可以中和这些酸性物质，使癌细胞变得脆弱，使抗癌免疫细胞能够进攻癌细胞。
3、与化疗药物联合使用。
几丁聚糖和丝裂霉素联合使用，丝裂霉素是一种有效的抗癌药物，但副作用较大。几丁聚糖可以作为载体，将丝裂霉素结合在一起，改善其作用，缓解副作用，最大限度地攻击癌细胞而不损伤正常细胞。
4、几丁聚糖可以作为人体的环保剂。
在化疗过程中与几丁聚糖合用，可以降低药物的毒副作用。许多肿瘤病人在化疗过程中白细胞不减低，头发不脱落，症状没有改变。几丁聚糖可以吸附癌细胞代谢产物，改善病人的症状，减轻痛苦。对于晚期癌症病人，它可以改善症状，延缓生命。
因此，几丁聚糖被欧美和亚洲国家认定为机能性保健食品。灵芝、冬虫夏草等植物中也含有微量的几丁聚糖，但含量较低。几丁聚糖具有抗癌、抑制癌细胞转移、提高免疫力和护肝解毒的作用。特别适用于糖尿病、肝肾病、高血压、肥胖等疾病，有助于预防癌细胞的发生和辅助放化疗治疗肿瘤。
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在原核蛋白表达体系中，如E.coli（大肠杆菌表达系统），外源基因通常需要诱导剂的诱导才能进行表达。本文将详细介绍常用诱导剂IPTG的诱导原理，以及外源蛋白诱导表达的原理和实验步骤。
原核生物的大多数基因按功能相关性成簇地排列在染色体上，形成一个转录单位，也称为操纵子，用于协同基因表达。E.coli的乳糖操纵子包含Z、Y和A三个结构基因，分别编码β-半乳糖苷酶、通透酶和乙酰基转移酶。此外，还有调控基因：操纵序列O（operator）和启动序列P（promoter），而I编码Lac阻遏物，不属于乳糖操纵子。
乳糖操纵子的结构基因
IPTG诱导原理：Lac阻遏物是一种具有4个相同亚基的四级结构蛋白，每个亚基都有一个与诱导剂结合的位点。在没有乳糖存在时，lac操纵子处于阻遏状态，Lac阻遏物能与操纵基因O结合，阻碍RNA聚合酶与P序列结合，从而抑制转录启动。而当有诱导剂（如IPTG）存在时，诱导剂与阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白构象发生变化，导致阻遏物从操纵基因O上解离，RNA聚合酶不再受阻，启动子P开始转录，启动反应发生。在这个操纵子体系中，真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞后，经β-半乳糖苷酶催化，转变为半乳糖，即生理上的诱导剂。而在实验中，通常选用异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）作为诱导剂，IPTG是一种作用极强且不被细菌代谢的稳定诱导剂，因此在实验室中被广泛应用。
显示全部在原核蛋白表达体系中，如E.coli（大肠杆菌表达系统），外源基因通常需要诱导剂的诱导才能进行表达。本文将详细介绍常用诱导剂IPTG的诱导原理，以及外源蛋白诱导表达的原理和实验步骤。
原核生物的大多数基因按功能相关性成簇地排列在染色体上，形成一个转录单位，也称为操纵子，用于协同基因表达。E.coli的乳糖操纵子包含Z、Y和A三个结构基因，分别编码β-半乳糖苷酶、通透酶和乙酰基转移酶。此外，还有调控基因：操纵序列O（operator）和启动序列P（promoter），而I编码Lac阻遏物，不属于乳糖操纵子。
乳糖操纵子的结构基因
IPTG诱导原理：Lac阻遏物是一种具有4个相同亚基的四级结构蛋白，每个亚基都有一个与诱导剂结合的位点。在没有乳糖存在时，lac操纵子处于阻遏状态，Lac阻遏物能与操纵基因O结合，阻碍RNA聚合酶与P序列结合，从而抑制转录启动。而当有诱导剂（如IPTG）存在时，诱导剂与阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白构象发生变化，导致阻遏物从操纵基因O上解离，RNA聚合酶不再受阻，启动子P开始转录，启动反应发生。在这个操纵子体系中，真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞后，经β-半乳糖苷酶催化，转变为半乳糖，即生理上的诱导剂。而在实验中，通常选用异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）作为诱导剂，IPTG是一种作用极强且不被细菌代谢的稳定诱导剂，因此在实验室中被广泛应用。
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川乌，又称鹅儿花、铁花、五毒，生长于山地草坡或灌丛中。主要在四川地区栽培，分布范围包括长江中下游、秦岭、山东东部和广西北部等地。乌头碱是川乌中的主要有效成分，具有广泛的用途。目前，提取乌头碱常采用溶剂萃取或离子交换树脂等方法，但提取率较低。
有研究提出了一种将乌头类双酯型生物碱转化为脂型生物碱的方法。该方法将乌头类双酯型生物碱材料与甲苯混合，并加入长链脂肪酸和吡啶，然后进行加热回流反应，最终得到脂型生物碱产物。该方法转化率高达90%以上，并且可以直接使用中药材作为反应原料，避免了前期提取纯化工作。
新乌头碱能够降低K562细胞中的干细胞比例，并显著抑制K562细胞的克隆形成。体外实验结果表明，新乌头碱对K562细胞的增殖有明显的抑制作用，随着作用时间延长，抑制作用增强。此外，新乌头碱的抑制作用也与浓度相关，浓度越高，抑制作用越强。在浓度为25-50μg/ml的范围内，新乌头碱对K562细胞的抑制效果明显，且没有细胞毒作用。
[1] CN201210489538.4 一种川乌中乌头碱的提取纯化工艺
[2] CN201510050236.0 新乌头碱对K562细胞生物学特性的改变
显示全部川乌，又称鹅儿花、铁花、五毒，生长于山地草坡或灌丛中。主要在四川地区栽培，分布范围包括长江中下游、秦岭、山东东部和广西北部等地。乌头碱是川乌中的主要有效成分，具有广泛的用途。目前，提取乌头碱常采用溶剂萃取或离子交换树脂等方法，但提取率较低。
有研究提出了一种将乌头类双酯型生物碱转化为脂型生物碱的方法。该方法将乌头类双酯型生物碱材料与甲苯混合，并加入长链脂肪酸和吡啶，然后进行加热回流反应，最终得到脂型生物碱产物。该方法转化率高达90%以上，并且可以直接使用中药材作为反应原料，避免了前期提取纯化工作。
新乌头碱能够降低K562细胞中的干细胞比例，并显著抑制K562细胞的克隆形成。体外实验结果表明，新乌头碱对K562细胞的增殖有明显的抑制作用，随着作用时间延长，抑制作用增强。此外，新乌头碱的抑制作用也与浓度相关，浓度越高，抑制作用越强。在浓度为25-50μg/ml的范围内，新乌头碱对K562细胞的抑制效果明显，且没有细胞毒作用。
[1] CN201210489538.4 一种川乌中乌头碱的提取纯化工艺
[2] CN201510050236.0 新乌头碱对K562细胞生物学特性的改变
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黄嘌呤核苷是一种化合物，也被称为9-呋喃核糖-3，9-二氢-1H-嘌呤-2，6二酮。当接触到黄嘌呤核苷时，应采取相应的措施，如将患者移到新鲜空气处、用肥皂水和清水冲洗皮肤、用流动清水或生理盐水冲洗眼睛，并立即就医。如果黄嘌呤核苷被食入，应漱口，但不要催吐，并立即就医。
研究发现，黄嘌呤核苷对骨髓间质干细胞的增殖和分化状态有影响。将黄嘌呤核苷加入骨髓间质干细胞培养体系后，发现细胞的生长速率在黄嘌呤核苷的影响下保持稳定，而对照组细胞则有明显下降。此外，黄嘌呤核苷还能促进骨髓间质干细胞的肝向分化能力，而不影响其分裂方式。因此，黄嘌呤核苷在体外增殖效率方面具有潜在的应用价值。
此外，黄嘌呤核苷还可以用于提高重组谷氨酸棒状杆菌发酵生产咖啡碱的产量。通过向发酵培养中添加一定浓度的黄嘌呤核苷，并采用加压方式对重组菌细胞进行通透化处理，可以促进重组菌对底物黄嘌呤核苷的吸收，从而提高咖啡碱的发酵产量。
[1] 黄嘌呤核苷促进骨髓间质干细胞体外快速扩增的实验研究
[2] CN201610475884.5提高重组谷氨酸棒状杆菌发酵生产咖啡碱产量的方法
显示全部黄嘌呤核苷是一种化合物，也被称为9-呋喃核糖-3，9-二氢-1H-嘌呤-2，6二酮。当接触到黄嘌呤核苷时，应采取相应的措施，如将患者移到新鲜空气处、用肥皂水和清水冲洗皮肤、用流动清水或生理盐水冲洗眼睛，并立即就医。如果黄嘌呤核苷被食入，应漱口，但不要催吐，并立即就医。
研究发现，黄嘌呤核苷对骨髓间质干细胞的增殖和分化状态有影响。将黄嘌呤核苷加入骨髓间质干细胞培养体系后，发现细胞的生长速率在黄嘌呤核苷的影响下保持稳定，而对照组细胞则有明显下降。此外，黄嘌呤核苷还能促进骨髓间质干细胞的肝向分化能力，而不影响其分裂方式。因此，黄嘌呤核苷在体外增殖效率方面具有潜在的应用价值。
此外，黄嘌呤核苷还可以用于提高重组谷氨酸棒状杆菌发酵生产咖啡碱的产量。通过向发酵培养中添加一定浓度的黄嘌呤核苷，并采用加压方式对重组菌细胞进行通透化处理，可以促进重组菌对底物黄嘌呤核苷的吸收，从而提高咖啡碱的发酵产量。
[1] 黄嘌呤核苷促进骨髓间质干细胞体外快速扩增的实验研究
[2] CN201610475884.5提高重组谷氨酸棒状杆菌发酵生产咖啡碱产量的方法
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骨髓中存在着造血基质细胞，但脐血中是否也存在这些细胞以及能否在体外扩增，目前相关研究报道较少。之前的研究成功分离培养了人脐血源黏附细胞，但发现分离培养过程困难。采用3%明胶联合Ficoll分离MNC的方法，发现细胞的贴壁率和原代培养的成功率都非常低。因此，需要在前期研究的基础上，探索不同明胶浓度和淋巴细胞分离液对人脐血源黏附细胞原代培养的影响，以寻找一种适合的分离培养条件，为人脐血源黏附细胞在临床上的应用奠定基础。
目前常用的细胞分离液有Percoll和Ficol1，它们利用细胞密度的差异将血细胞分离在不同的液体层次中。Percoll由表面黏附有聚乙烯吡咯酮的胶体硅组成，而Ficol1主要由葡聚糖和泛影酸钠组成。如果需要分离的标本量较少，使用细胞分离液可以形成较好的MNC层，并且方便收集。但如果需要分离的标本量较多，不仅分离液使用量大，而且离心后部分红细胞可能仍悬浮在分离液中，导致收集的MNC可能夹杂红细胞。此外，过大的界面也不利于MNC的收集。明胶溶液可以破坏红细胞表面电荷，加速红细胞沉降，使其与其他细胞分离。虽然3%明胶沉降红细胞的效果最好，但分离后除了MNC外，还含有其他有核细胞。对于仅需要MNC的研究，使用该液分离并不能达到预期效果。另外，明胶溶液是否能够去除脐血中的幼稚红细胞，还需要进一步的实验研究来证实。因此，目前大多数实验和临床应用中采用明胶联合分离液进行血细胞MNC的分离。
细胞分离液可以用于纯化大鼠胰岛。有研究建立了一种简便、易行和高效的胰岛分离纯化方法，以减少对胰岛细胞的损伤，获得高质量的胰岛组织。该方法选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液，分离消化胰腺组织，然后用淋巴细胞分离液纯化胰岛细胞。实验结果显示，可以获得大量高纯度的胰岛，纯度达到95%以上。体外葡萄糖刺激实验表明胰岛对刺激反应良好，将胰岛移植到糖尿病小鼠体内可以短期纠正其高血糖状态。因此，这种使用单一密度淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的方法是一种操作简单、价格低廉、重复性好的大鼠胰岛纯化方法。
此外，细胞分离液对T细胞阳性花环和非T细胞阳性花环计数结果也有影响。有研究探讨了在使用单克隆抗体SPA红细胞花环法(McAb-A-E法)检验T淋巴细胞亚群时，细胞分离液对阳性花环细胞计数结果以及非T淋巴细胞阳性花环计数结果的影响。实验选择了用细胞分离液法分离的单个核细胞(PBMC)和不加任何物质的抗凝血用自然沉降法分离的混合细胞，并用10倍量稀释液洗涤1次。然后，使用McAb-A-E直接法进行样本对照，并进行统计学处理。
实验结果对比了20例临床标本使用两种不同方法制取单个核细胞悬液的情况。比较了CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+等4组结果，发现CD3+、CD4+和CD8+的结果差异具有统计学意义，均为P<0.001。而CD4+/CD8+的结果比较，差异则没有统计学意义(P>0.05)。此外，两组非T淋巴细胞阳性花环的比较结果也具有统计学意义(P<0.001)。研究结论表明，使用细胞分离液分离的PBMC细胞，在用10倍量的稀释液洗涤1次后，细胞表面黏附的细胞分离液无法完全去除，这会使得阳性花环淋巴细胞计数结果偏高，而阴性淋巴细胞计数结果偏低。
[1] 不同明胶浓度及淋巴细胞分离液对人脐血源黏附细胞原代培养的影响
[2] 应用淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的实验研究
[2] 淋巴细胞分离液对T细胞阳性花环和非T细胞阳性花环计数结果影响的研究
显示全部骨髓中存在着造血基质细胞，但脐血中是否也存在这些细胞以及能否在体外扩增，目前相关研究报道较少。之前的研究成功分离培养了人脐血源黏附细胞，但发现分离培养过程困难。采用3%明胶联合Ficoll分离MNC的方法，发现细胞的贴壁率和原代培养的成功率都非常低。因此，需要在前期研究的基础上，探索不同明胶浓度和淋巴细胞分离液对人脐血源黏附细胞原代培养的影响，以寻找一种适合的分离培养条件，为人脐血源黏附细胞在临床上的应用奠定基础。
目前常用的细胞分离液有Percoll和Ficol1，它们利用细胞密度的差异将血细胞分离在不同的液体层次中。Percoll由表面黏附有聚乙烯吡咯酮的胶体硅组成，而Ficol1主要由葡聚糖和泛影酸钠组成。如果需要分离的标本量较少，使用细胞分离液可以形成较好的MNC层，并且方便收集。但如果需要分离的标本量较多，不仅分离液使用量大，而且离心后部分红细胞可能仍悬浮在分离液中，导致收集的MNC可能夹杂红细胞。此外，过大的界面也不利于MNC的收集。明胶溶液可以破坏红细胞表面电荷，加速红细胞沉降，使其与其他细胞分离。虽然3%明胶沉降红细胞的效果最好，但分离后除了MNC外，还含有其他有核细胞。对于仅需要MNC的研究，使用该液分离并不能达到预期效果。另外，明胶溶液是否能够去除脐血中的幼稚红细胞，还需要进一步的实验研究来证实。因此，目前大多数实验和临床应用中采用明胶联合分离液进行血细胞MNC的分离。
细胞分离液可以用于纯化大鼠胰岛。有研究建立了一种简便、易行和高效的胰岛分离纯化方法，以减少对胰岛细胞的损伤，获得高质量的胰岛组织。该方法选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液，分离消化胰腺组织，然后用淋巴细胞分离液纯化胰岛细胞。实验结果显示，可以获得大量高纯度的胰岛，纯度达到95%以上。体外葡萄糖刺激实验表明胰岛对刺激反应良好，将胰岛移植到糖尿病小鼠体内可以短期纠正其高血糖状态。因此，这种使用单一密度淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的方法是一种操作简单、价格低廉、重复性好的大鼠胰岛纯化方法。
此外，细胞分离液对T细胞阳性花环和非T细胞阳性花环计数结果也有影响。有研究探讨了在使用单克隆抗体SPA红细胞花环法(McAb-A-E法)检验T淋巴细胞亚群时，细胞分离液对阳性花环细胞计数结果以及非T淋巴细胞阳性花环计数结果的影响。实验选择了用细胞分离液法分离的单个核细胞(PBMC)和不加任何物质的抗凝血用自然沉降法分离的混合细胞，并用10倍量稀释液洗涤1次。然后，使用McAb-A-E直接法进行样本对照，并进行统计学处理。
实验结果对比了20例临床标本使用两种不同方法制取单个核细胞悬液的情况。比较了CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+等4组结果，发现CD3+、CD4+和CD8+的结果差异具有统计学意义，均为P<0.001。而CD4+/CD8+的结果比较，差异则没有统计学意义(P>0.05)。此外，两组非T淋巴细胞阳性花环的比较结果也具有统计学意义(P<0.001)。研究结论表明，使用细胞分离液分离的PBMC细胞，在用10倍量的稀释液洗涤1次后，细胞表面黏附的细胞分离液无法完全去除，这会使得阳性花环淋巴细胞计数结果偏高，而阴性淋巴细胞计数结果偏低。
[1] 不同明胶浓度及淋巴细胞分离液对人脐血源黏附细胞原代培养的影响
[2] 应用淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的实验研究
[2] 淋巴细胞分离液对T细胞阳性花环和非T细胞阳性花环计数结果影响的研究
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软木肟酸是一种第二代异羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂，具有抑制肿瘤生长的作用。研究发现，软木肟酸可以选择性地抑制肿瘤细胞的增殖，而对正常细胞无明显不良反应。此外，软木肟酸还可以激活细胞内的Notch1信号通路，进一步抑制甲状腺未分化癌细胞的生长并促进细胞凋亡。
研究结果显示，软木肟酸的抑制作用呈时间和剂量依赖性。在低浓度处理下，软木肟酸可以诱导乳腺癌细胞停滞于G0～G1期，抑制细胞增殖。而在高浓度处理下，软木肟酸可以引起甲状腺未分化癌细胞的早期和晚期凋亡，进一步抑制细胞生长。
进一步的实验结果表明，软木肟酸通过激活细胞内的Notch1信号通路来实现其抗癌作用。软木肟酸处理后，甲状腺未分化癌细胞中的Notch1和HES1基因的表达量增加，进而促进细胞凋亡。此外，软木肟酸还可以降低促凋亡蛋白的表达，进一步加速细胞死亡。
研究人员通过Western实验和定量PCR技术，证实软木肟酸可以激活Notch1信号通路，并呈现剂量和时间的双重依赖性。这些研究结果为软木肟酸作为抗癌药物的进一步研发提供了重要的理论基础。
[1] 软木肟酸激活Notch-1信号通路通过P53诱导甲状腺未分化癌细胞凋亡
显示全部软木肟酸是一种第二代异羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂，具有抑制肿瘤生长的作用。研究发现，软木肟酸可以选择性地抑制肿瘤细胞的增殖，而对正常细胞无明显不良反应。此外，软木肟酸还可以激活细胞内的Notch1信号通路，进一步抑制甲状腺未分化癌细胞的生长并促进细胞凋亡。
研究结果显示，软木肟酸的抑制作用呈时间和剂量依赖性。在低浓度处理下，软木肟酸可以诱导乳腺癌细胞停滞于G0～G1期，抑制细胞增殖。而在高浓度处理下，软木肟酸可以引起甲状腺未分化癌细胞的早期和晚期凋亡，进一步抑制细胞生长。
进一步的实验结果表明，软木肟酸通过激活细胞内的Notch1信号通路来实现其抗癌作用。软木肟酸处理后，甲状腺未分化癌细胞中的Notch1和HES1基因的表达量增加，进而促进细胞凋亡。此外，软木肟酸还可以降低促凋亡蛋白的表达，进一步加速细胞死亡。
研究人员通过Western实验和定量PCR技术，证实软木肟酸可以激活Notch1信号通路，并呈现剂量和时间的双重依赖性。这些研究结果为软木肟酸作为抗癌药物的进一步研发提供了重要的理论基础。
[1] 软木肟酸激活Notch-1信号通路通过P53诱导甲状腺未分化癌细胞凋亡
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