如何使用快速琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒回收DNA片段? 快速琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方,能够快速回收纯化70 bp-10 kb的DNA片段。该试剂盒具有溶胶速度快、纯度高、回收率高等优点,适用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。 操作步骤如下: 1、琼脂糖凝胶电泳后,将目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下,放入离心管中。 2、向胶块中加入溶胶液,进行溶解。 3、将溶液加入吸附柱中,离心去除废液。 4、加入漂洗液,离心去除废液。 5、重复漂洗步骤。 6、离心除去漂洗液,去除残余的漂洗液。 7、加入洗脱液,离心使DNA吸附于吸附膜上。 8、将DNA产物保存在-20℃。 快速琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒的应用 为什么在类病毒cDNA体外连接产物回收中会出现非特异条带? 通过实验发现,在回收类病毒cDNA体外连接产物时,常常会出现非特异条带的存在。这种现象不仅存在于类病毒的cDNA中,也存在于其他类型的DNA中,是一种普遍现象。 参考文献: [1]A rapid and efficient procedure for the purification of DNA from agarose gels.S.C.Girvitz,S.Bacchetti,A.J.Rainbow,F.L.Graham.Analytical Biochemistry.1980 [2]Activation and Repression at the Escherichia coli ynfEFGHI Operon Promoter.Meng Xu,Stephen J.W.Busby,Douglas F.Browning.Journal of Bacteriology.2009 [3]Fangman W L.Nucleic Acids Research.1978 [4]A reliable method for the recovery of DNA fragments from agarose and acrylamide gels.Dretzen G,Bellard M,Sassone-Corsi P,et al.Analytical Biochemistry.1981 [5]刘森.类病毒cDNA体外连接产物回收中出现的非特异条带原因探究[D].华中农业大学,2016. 查看更多
长期食用甜味剂是否会对人体产生负面影响? 虽然木糖醇作为一种糖醇,尚未有研究表明它对人类有任何明显的副作用。然而,木糖醇不易被完全吸收,过量食用会刺激胃肠道,导致腹泻。尽管对大多数哺乳动物来说木糖醇相对安全,但对狗来说却是有毒的。研究发现,小鼠口服木糖醇的安全性剂量为20g/kg体重,而对狗来说,口服0.1mg/kg体重就可能导致致命的低血糖。 最近,科研人员对各种代糖的长期生物学效应产生了浓厚兴趣。一项最近发表在《自然》杂志上的研究中,实验人员让小鼠持续饮用含有10%商业甜味剂的水溶液(由0.5%糖精、蔗糖素或阿斯巴甜和9.5%葡萄糖组成)。经过11周的观察,与对照组(单独饮用水、10%葡萄糖水或蔗糖水)相比,实验组的小鼠体内对葡萄糖的吸收能力严重受损。进一步研究表明,这些不产生热量的非营养性甜味剂通过影响肠道菌群导致小鼠出现葡萄糖不耐受。这个实验结果揭示了长期大量食用非营养性甜味剂的安全隐患,但目前尚缺乏人群调查数据来支持这一结论。由于该实验未测试木糖醇等可产生低热量的营养性甜味剂的效果,因此,我们仍需要进一步详细研究才能得出关于长期食用木糖醇是否与代谢疾病相关的结论。 参考文献: 1. Campbell, A. and N. Bates, Xylitol toxicity in dogs. Vet Rec, 2008; 162(8): 254. 2. Suez, J., et al., Artificial sweeteners induce glucose intolerance by altering the gut microbiota. Nature. 2014;514(7521): 181-6. 查看更多