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化工研发
求助该物质产生原理? 如图所示 UZ%EK$DN1R($SZ8E}LT7(Q5.png查看更多 3个回答 . 19人已关注
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黑色TiO2的保存,及储藏条件。? 保持TiO2的高催化活性及结构稳定的条件 查看更多 1个回答 . 7人已关注
微生物扫描电镜(SEM)? 做了两个细菌的SEM图,发现结果有一点奇怪,一个细菌的表面有好多其他物质,把细菌都附着在一起了。貌似是胞外分泌物,但是这个胞外分泌物是不是太多了。另一个细菌倒是没有那么多胞外分泌物,但是细菌看着比较褶皱(细胞膜?还是什么的),看着好奇怪。请问出现这两种情况是怎么回事呢?知道的麻烦帮忙解答一下!!! 360截图20191217203146225.jpg 360截图20191217203213859.jpg查看更多 3个回答 . 20人已关注
按照这个安装方法安装之后XS 等都显示不可以用? 那个大神指导怎么回事?急求 查看更多 1个回答 . 11人已关注
发根农杆菌菌株交换有吗? 本人华南植物园的,有MSU440菌株和A4菌株,有人有K599或者其他菌株交换的么,可以留言私信我查看更多 4个回答 . 8人已关注
比容量计算? 求解怎么进行比容量计算 查看更多 2个回答 . 13人已关注
请问做氨基酸突变研究蛋白功能的时候为什么选择丙氨酸或天冬氨酸? 请教各位大神,最近我读了一篇文献, 作者为了研究某些氨基酸位点的功能,分别把极性氨基酸突变为丙氨酸,而把非极性氨基酸突变为天冬氨酸,他这么做的道理是什么?我以为只要都突变为丙氨酸就好了。这跟突变氨基酸的极性有什么联系吗?查看更多 1个回答 . 15人已关注
全电池? 负极是我自己合成的氧化物和碳 正极是NCA 装的电池一直坏一直坏 不知道是装的缘故还是设置的缘故 做全电池有什么需要注意的地方呢?求助各位大神!不胜感激! 查看更多 3个回答 . 10人已关注
求塔的置换时间? 塔的铭牌上标的容积70立方米,正常控制液位60%怎么求油的体积望朋友不吝赐教提示:当前内容由会员用户名 1111 发布!权益归其所有 仅代表其个人观点 不代表本站立场本站仅提供存储空间,如此内容存在争议或侵犯您的权益,请联系我站删除,可联系页面底部在线客服或致信service@hcbbs.com 网站声明查看更多 2个回答 . 15人已关注
跑胶怎么会太多杂带? 是酶,还是引物啊?还是退火温度影响? 查看更多 4个回答 . 17人已关注
浅析细胞转染效率低下的原因? 1、细胞太少或细胞密度太大 细胞密度对转染效率有一定的影响。不同的转染试剂,要求转染时的最适细胞密度各不相同,即使同一种试剂,也会因不同的细胞类型或应用而异。转染时过高或者过低的细胞密度会导致转染效率降低,乃至表达水平偏低。因此如果选用新的细胞系或者新的转染试剂,最好能够进行优化实验并为以后的实验建立一个稳定方法,包括适当的接种量和培养时间等。 阳离子脂质体具有微量的细胞毒性而往往需要更高的铺板密度或者更多的悬浮细胞数,有的要求细胞90%汇片;而有些多胺或者非脂质体的配方则要求在40%-80%之间,尽量在细胞最适的生理状态下转染,以求最佳的转染效果。 2、电压过大 做电转的时候,如果电压太大,往往会发生细胞大量死亡的情况。不同的细胞,需要的电压是不一样的。 3、未加血清 血清一度曾被认为会降低转染效率,老一代的转染方法往往要求转染前后洗细胞或者在无血清 培养基 条件下转染,但有些对此敏感的细胞如原代细胞会受到损伤,甚至死亡导致转染效率极低。不过转染产品配方几经革新后的今天,对于主流的转染试剂来说,血清的存在已经不会影响转染效率,甚至还有助于提高转染效率,如阳离子 聚合物 等。 转染后未及时加入血清,会导致细胞大量死亡。一般要在转染后的4-6小时换液且换为有血清的培养基。也可以在原来的无血清培养基里面滴加血清。 4、细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的 质粒提取试剂盒 都做不到绝对无菌。 如果同一个实验室同时培养不同种类的细胞,那就可能发生交叉污染,即使遵循最严格的分离操作规程这种情况也有可能发生。 5、 转染载体的构建 转染载体的构建(病毒载体,质粒DNA,RNA,PCR产物,寡核苷酸等)也影响转染结果。病毒载体对特定宿主细胞感染效率较高,但不同病毒载体有其特定的宿主,有的还要求特定的细胞周期,如逆转录病毒需侵染分裂期的宿主细胞,此外还需考虑一些安全问题(如基因污染)。除载体构建外,载体的形态及大小对转染效率也有不同的影响,如前面提到的超螺旋及线性DNA对瞬时和稳定转染的影响。如果基因产物对细胞有毒性作用,转染也很难进行,因此选择组成或可调控,强度合适的启动子也很重要,同时做空载体及其它基因的相同载体构建的转染正对照可排除毒性影响的干扰。 转染用的质粒首先要保证数量,一般为2μg以上。质粒纯度不够或者含有细菌LPS或其他对细胞有毒害作用的物质,也会影响转染效率。这个时候,就应该对质粒进行纯化和浓缩。 6、试剂过期 有时候转染效率低下,还要考虑会不会存在试剂过期的情况。 7、不注意细节 在转染之前更换一次37℃预温的培养基,可提高转染效率。脂质体和DNA/RNA混合物应当一滴一滴地滴下来,从培养皿一边滴到另一边,边滴边轻摇培养皿,以确保均匀分布和避免局部高浓度。这些都是一些细枝末节,但是,如果不注意的话,也会造成转染效率低下。 8、细胞状态不好 有时会存在不恰当的细胞密度,转染时融合度应为70%-90%。细胞状态不好,会导致转染效率低下。一般进行转染的细胞应该处于对数生长期。如果是贴壁细胞的话,贴壁率应该在70-80%;如果是悬浮细胞的话,应该是6X105个/孔(24孔板),一般是转染前一天换液,转染前用无血清培养基或PBS洗细胞一次。转染的整个过程都不应该有抗生素。 9、在转染过程中使用抗菌素 在转染过程中不要使用氯霉素,青霉素或链霉素,因为阳离子脂质体试剂使细胞更敏感。对于稳定转染,筛选抗生素加入的太快,在加入筛选性抗生素前至少预留24-48h使细胞表达抗性基因。查看更多 1个回答 . 15人已关注
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PAMAM合成与纯化(请江湖大神伸手救救将毕业的小硕)? 发帖背景:小硕,半路出家,跟的小老板在做dendrimer,所以毕业课题做dendrons,因为设计的分子不是完整的PAMAM,所以不能买现成的,要自己合 发帖目的:希望江湖大神能够给小女子指点一二、不求倾其所有,但求真心实意;如果有相同的问题待解决,希望能够讨论共同进步 研究困境:(1)依据D. A. Tomalia1985年早期的文献和专利,和一些一级期刊的合成条件合成G0.5、G1.0、G1.5,目前发现G0.5的迈克尔加成反应不像理论上能够完全反应、基本无副反应;过柱子纯化,但只能得到50-60%的G0.5(基本所有的文献都能得到98%以上),对反应 试剂 进行除水重蒸馏、反应溶剂定量、N2保护,反应温度进行控制,均没有得到改善,反应48h后TLC判断反应终点,反应起始物仍有一部分没有反应???不明白噢;(2)G1.5产物纯化困难,使用 EA:MeOH(30:1)洗脱,基本得不到纯的产物,要疯了要疯了。。。(3)PAMAM合成的难点在纯化??? 星语心愿:真心科研、求帮助、求解脱查看更多 3个回答 . 1人已关注
酵母表达公司推荐? 有哪些做酵母表达比较靠谱的公司,可以推荐几个吗 查看更多 2个回答 . 11人已关注
简介
职业:山东鸿基换热技术有限公司 - 化工研发
学校:郑州大学 - 化工学院
地区:黑龙江省
个人简介:最成功的说谎者是那些使最少量的谎言发挥最大的作用的人。查看更多
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