如何使用DNPH比色法测定蛋白质羰基含量? 2,4-二硝基苯肼(DNPH)比色法是一种经典方法,用于测定蛋白质羰基含量。当蛋白质被氧化后,羰基含量会增加。羰基与2,4-二硝基苯肼反应生成红棕色的2,4-二硝基苯腙沉淀。通过将沉淀用盐酸胍溶解,并在分光光度计上读取370nm下的吸光度值,可以准确测定蛋白质的羰基含量。2,5-二甲基苯甲醛-2,4-DNPH是一种常用的化学物质,可用作医药合成中间体。在使用2,5-二甲基苯甲醛-2,4-DNPH时,如果吸入,请将患者移到新鲜空气处;如果皮肤接触,请脱去污染的衣着,用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤,如有不适感,请就医;如果眼睛接触,请分开眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗,并立即就医;如果误食,请立即漱口,禁止催吐,并立即就医。 DNPH与羰基化合物的反应高度选择性,可用于检测衍生的羰基化合物。此外,只有在氨基硝基芳族化合物的正离子化中,才能观察到用于触发MS3断裂的羟基自由基的特征损失,从而可以选择性地检测和断裂DNPH衍生的羰基。此外,由于衍生剂的引入,可能的假阳性识别减至最少。研究人员还使用DNPH与羰基化合物表征由特定暴露产生的有毒和遗传毒性的羰基化合物,并用于监测羰基化合物的内源性形成,例如与脂质过氧化和氧化应激相关的炎症过程。 主要参考资料 [1] A High Resolution/Accurate Mass (HRAM) Data-Dependent MS3 Neutral Loss Screening, Classification, and Relative Quantitation Methodology for Carbonyl Compounds in Saliva 查看更多