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古朵教您如何正确使用标记抗体及蛋白? 标签：标记抗体古朵生物蛋白生物试剂 shengwus 是一个分子量只有244.31Da的小分子，经活化后可与蛋白、抗体等生物大分子结合，不仅可以很好地保持大分子的生物活性，而且与亲和素结合使用时具有多级放大作用，使其广泛应用于微量抗原、抗体定性、定量检测及定位观察研究。那么如何使用生物su 标记抗体或蛋白呢?下面古朵生物给大家分享一下。工具/原料 1.10ul，50ul，200ul，1000ul可调移液器 2. 恒温箱(37℃) 3. 离心机(离心力可达到12,000×g) 4. 生物su标记试剂盒(Cata.No:EBLK0002, Elabscience) 古朵生物详解实验前准备 1.仔细阅读使用说明书。 2.计算待使用NH2-Reactive Biotin的量。 3.提前20min从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温(注：不需要用到的NH2-Reactive Biotin继续放置冰箱中)。 4.溶解NH2-Reactive Biotin：加入30ulDMF至NH2-ReactiveBiotin瓶中，静置10min，待其充分溶解，此时生物su 的浓度为10mM。操作步骤：(本操作步骤按照1mg的量进行标记) 1.取1mg待标记抗体于Filtration tube中，并加入相应体积的Labeling Buffer，使抗体的终浓度为2mg/ml，12,000 x g离心10min。(注：①Filtration tube的大体积为0.5ml②待标记抗体浓度低时，可先超滤离心一次) 2. 加入13.3ul NH2-Reactive Biotin 和适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中，使终体积为0.5ml，并轻轻吹打混匀。放入37℃恒温箱中避光温育30min。12,000 x g离心10min。 3. 加入适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中，使终体积为0.5ml，并轻轻吹打混匀，12,000 x g离心10min。 4. 操作3重复一次。 5. 加0.2ml Labeling Buffer至Filtration tube中，轻轻吹打。将滤芯倒转放置于另一个离心管中，6,000 x g离心10min。 6. 收集离心管中的溶液，即为生物su 标记的抗体。古朵教您如何正确使用生物su 标记抗体及蛋白? 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

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ELISA试剂盒酶标板在什么情况下失效? ELISA试剂盒酶标板在什么情况下失效 ELISA试剂盒的保质期一般都是在一年，如果保存得当的话，不会出现问题的。但不要反复冻融。当然如果是正常的DAS-ELISA检测试剂盒等，应该放在4℃左右冰箱保存。建议ELISA试剂盒解冻后一次用完。已开封或者使用后，剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，ELISA检测试剂盒开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。但要注意的是，如果将ELISA试剂盒刚从冰箱里面拿出来就立即使用的话，可能会影响，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。建议：先从冰箱中拿出来，在室温下放置20分钟以上后，再进行测定，以使试剂盒在ELISA检测试剂盒使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。 elisa的板子什么情况下会失效? 1.通常商品化的酶标板要求密闭4℃保存，长时间暴露或未密闭保存，要么失效，要么结果为非可靠数据;如果是自己包的板，可能效期更短，保存条件要求更高，至于显色剂，正常条件下一天内不会失效的。 2.第三板是否按照前两板加所有试剂，如果缺失其中某一步骤，结果也会无色。 ELISA试剂盒古朵既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂，标准物质、天然植物提取物及中药标准品，核酸、酶、缓冲剂、显色底物，医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种，广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。查看更多

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国产ELISA试剂盒的特色分类您知道吗? 国产ELISA试剂盒的特色分类您知道吗？ (一)国产ELISA试剂盒液体型试剂无论是单试剂仍是双试剂型试剂，如今乃至往后仍以液体型为首要剂型。其利益是液体型试剂的试剂组分高度均一，瓶间差异小，测定重复性好和运用便当;它也无需参与任何辅佐试剂及蒸馏水，避免了外源性水质对试剂的影响，功用较安稳，测定作用较为准确。缺陷是液体型试剂(尤其是酶试剂)保存时间较短，不便于运送。 1.液体单试剂所谓液体单试剂就是将某种生化查验项目所用到的试剂科学地混合在一起，组成为一种试剂。运用时，只须将标本和试剂按必定比例混合，即可进行相应的生化反应，然后用恰当的方法查看作用。运用非常便当。 2.液体双试剂所谓液体双试剂就是将某些生化查看项目所用到的试剂，按用途科学地分红两类，分别配成两种试剂，通常试剂参与后可起到悉数或有些消除某些内源性烦扰的作用，第二试剂为发起被查看物质反应的试剂，两种试剂混合后才共同完成被检项目的生化反应。然后用恰当的方法查看作用。双试剂型试剂盒，它坚持了单试剂的利益，增强了抗烦扰才干和试剂的安稳性，行进了测定的准确性。如今市场上的生化查看试剂盒首要以液体双试剂为主，与其它类型试剂比照具有液体试剂和双试剂的利益：行进了抗烦扰反应的才干、使测定科学合理、安稳功用优异。 (二)粉(片)剂型试剂 ELISA试剂盒所谓粉剂型及片剂型试剂，就是将试剂的各组分用球磨技术粉碎成粉剂或混合后压成片剂，运用前再参与的溶液复溶成液体试剂。 (三)迅速反应试剂盒迅速反应试剂盒首要是为了习气生化剖析的技术行进，缩短反应时间，行进工作效率。如今恳求这种迅速反应的试剂用户不多。 (四)一步法试剂盒这是跟着方法学的改进，特别是免疫技术的行进，运用特异性抗体参与反应的新式试剂。 (五)多项同测组合试剂盒这类型试剂首要是用于三点双项同测结束法、三点双项同测连续监测法和三点双项同测结束速率法测定的试剂盒。 (六)卡式试剂盒古朵生物国产ELISA试剂盒首要装入试剂瓶，瓶上充分运用编码技术，然后根据编码发起分配、运用及换贮存。 ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。查看更多

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古朵生物国产ELISA试剂盒的特色分类您知道吗? 古朵生物国产ELISA试剂盒的特色分类您知道吗？ (一)国产ELISA试剂盒液体型试剂无论是单试剂仍是双试剂型试剂，如今乃至往后仍以液体型为首要剂型。其利益是液体型试剂的试剂组分高度均一，瓶间差异小，测定重复性好和运用便当;它也无需参与任何辅佐试剂及蒸馏水，避免了外源性水质对试剂的影响，功用较安稳，测定作用较为准确。缺陷是液体型试剂(尤其是酶试剂)保存时间较短，不便于运送。 1.液体单试剂所谓液体单试剂就是将某种生化查验项目所用到的试剂科学地混合在一起，组成为一种试剂。运用时，只须将标本和试剂按必定比例混合，即可进行相应的生化反应，然后用恰当的方法查看作用。运用非常便当。 2.液体双试剂所谓液体双试剂就是将某些生化查看项目所用到的试剂，按用途科学地分红两类，分别配成两种试剂，通常试剂参与后可起到悉数或有些消除某些内源性烦扰的作用，第二试剂为发起被查看物质反应的试剂，两种试剂混合后才共同完成被检项目的生化反应。然后用恰当的方法查看作用。双试剂型试剂盒，它坚持了单试剂的利益，增强了抗烦扰才干和试剂的安稳性，行进了测定的准确性。如今市场上的生化查看试剂盒首要以液体双试剂为主，与其它类型试剂比照具有液体试剂和双试剂的利益：行进了抗烦扰反应的才干、使测定科学合理、安稳功用优异。 (二)粉(片)剂型试剂 ELISA试剂盒所谓粉剂型及片剂型试剂，就是将试剂的各组分用球磨技术粉碎成粉剂或混合后压成片剂，运用前再参与的溶液复溶成液体试剂。 (三)迅速反应试剂盒迅速反应试剂盒首要是为了习气生化剖析的技术行进，缩短反应时间，行进工作效率。如今恳求这种迅速反应的试剂用户不多。 (四)一步法试剂盒这是跟着方法学的改进，特别是免疫技术的行进，运用特异性抗体参与反应的新式试剂。 (五)多项同测组合试剂盒这类型试剂首要是用于三点双项同测结束法、三点双项同测连续监测法和三点双项同测结束速率法测定的试剂盒。 (六)卡式试剂盒古朵生物国产ELISA试剂盒首要装入试剂瓶，瓶上充分运用编码技术，然后根据编码发起分配、运用及换贮存。 ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。查看更多

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ELISA试剂盒中常用的防腐剂您知道吗? 标签：ELISA试剂盒检测试剂盒酶联免疫试剂盒古朵生物 ELISA试剂盒是一种敏感性高、特异性强、重复性好的elisa试剂盒，其试剂安稳、易保留、操作简练、作用区分客观等要素，适宜于大规模筛查实验又能够用于少数标本的检查，能够做定性实验也能够做定量分析。古朵生物试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。 elisa试剂盒中常用的防腐剂有： 1、叠氮钠是HRP的抑制剂，凡是和HRP接触的试剂，一定不能用; 2、硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用，但因其有毒，较少使用; 3、市面许多试剂盒产品，用抗生素做防腐剂较多，如庆大。 4、如果试剂仅在实验室短期使用，其实并不需加防腐剂，常规试剂放4度冰箱，抗体、酶等加甘油分装冻存即可。 5、防污染可添加0.02%的叠氮钠，或0.01%的硫柳汞。叠氮钠在多数情况下有用且有效，但在有些实验中却不合适，因为它能阻断细胞的电子传递链，对许多生物体都有毒性，因此不能用于活体实验;因为含有氨基而能干扰许多标记方法;不能用于辣根过氧化物酶标记的抗体。而硫柳汞不含氨基，不影响基质的稳定性。如果将抗体应用于生物活性检测、体内实验，一般不使用任何防腐剂，这些实验用的抗体应少量分装冷存，切忌反复冻融。 6、吐温-20是作为稳定剂，可减少非特异性黏合。 7、甘油是防止冻融过程中的固-液相变而引起蛋白变性，能有效地增强蛋白质的稳定性，-20度冻存时甘油的浓度可以在20~30%。 ELISA试剂盒中常用的防腐剂您知道吗?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

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您知道有哪些对ELISA试剂盒测定结果有影响的原因吗? 您知道有哪些对ELISA试剂盒测定结果有影响的原因吗? 古朵生物 ELISA试剂盒方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定，具有灵敏度高，操作简单等优点，但是在具体实验过程中影响因素较多，并且要按照严格的说明要求，在检验中除正常反应外，有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果) 影响ELISA测定错误结果的原因主要有： ①标本因素; ②试剂因素; ③操作因素。研域小编就标本因素对ELISA测定的影响做如下总结。一、类风湿因子人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合，从而导致假阳性。解决办法 1.用F(ab)2替代完整的IgG; 2.标本用联有热变性(63℃，10 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效); 3.检测抗原时，可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中，使RF降解。二、补体 ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中，抗体分子发生变构，其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来，使C1q 可以将二者连接起来，从而造成假阳性。解决办法 1.用EDTA稀释标本; 2.用53℃，10 min或56℃，30 min加热血清使C1q灭活。三、嗜异性抗体人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig(s) 结合的天然嗜异性抗体，可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来，也能造成假阳性。解决办法可在标本稀释液中加入过量的动物Ig(s)，但加入量不足或亚类不同时无效。四、嗜靶抗原的自身抗体抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，有时能与靶抗原结合形成复合物，在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定结果。解决办法测定前需用理化方法将其解离后再测定。 ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。查看更多

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您知道，抗体是如何保持效价的稳定来长期保存? 标签：抗体抗原抗体免疫组化抗体古朵生物您知道，抗体是如何保持效价的稳定来长期保存? 抗体制备是免疫学研究的基础。制备一个合适的抗体将会决定着免疫实验的成败。抗体制备过程涉及到很多个方面，比如免疫原如何设计、免疫过程的优化、目的抗体筛选、抗体纯化、应用鉴定等。接下来我们将会对一些关键的技术难点进行解答。 1. 免疫原是如何设计的?有什么原则? 解答：免疫原可以是天然蛋白也可以是重组蛋白，甚至是多肽、DNA，所以免疫原的设计主要从两个方面考虑：免疫原分子的特点抗体应用。结合免疫原分子的特点，抗体的应用可以提供预计识别的表位类型，确定使用哪种类型的免疫原和免疫原的序列。 2. DNA免疫的原理和方法是什么? 解答：将含有编码某种抗原基因序列的质粒载体作为免疫原，直接导入动物细胞内进行表达，诱导宿主细胞对该抗原蛋白产生免疫应答，产生针对目的蛋白的抗体，再通过杂交瘤融合或基因文库筛选获得单克隆抗体，或通过血清纯化获得多克隆抗体。 DNA免疫方法，目前主要有3种：肌肉注射加电转、静脉高压注射法和基因枪肌肉注射。 3. 对于同一种抗原，人源的噬菌体库筛出的抗体和人体分离的抗体有什么区别? 解答：应该说各有优势。人源的噬菌体库筛选出的抗体，在一些情况下，可能会产生一些非天然存在的抗体，重链和轻链的配比不一定是天然的。从人体B细胞获得的抗体，是直接分离和测序筛选的，抗体的重轻链处于天然状态。当然，我们也不能说噬菌题库筛选的抗体就不好，因为一般多的是评价它的亲和力和免疫应用，以及后续的生产表达及结构等，需要综合评价。 4. 噬菌体展示淘洗固相筛选和液相筛选效果有差异吗? 解答：结合古朵生物多年的抗体筛选经验，一般会固相淘选，因为这种方法比较简单，不需要使用生物素标记。如果这种筛选方法没有筛选到我们感兴趣的抗体的话，我们也会过渡到液相筛选的方法。 5. 噬菌体淘洗怎么保证库的多样性?筛选上有什么注意的原则? 解答：淘洗过程中很多因素都会影响多样性的结果，比如方法的选择、固相、液相等。其次pH值是淘洗中一个重要参数。还有就是淘洗的力度和洗脱的时间也对多样性结果有很重要的影响。需要多个方面进行试验条件的优化。 6. 应用于IHC的单抗开发，在抗原设计上，有什么侧重点? 解答：因为IHC的实验过程涉及到了对它本身抗原的一个变性的过程，或者说是天然细胞里面靶点的变性过程。所以在设计的时候，我们会倾向于设计成一个线性的表位，所以一般来说我们倾向于使用多肽这种免疫原的方式，来进行免疫组化抗体的开发。 7. 噬菌体展示与杂交瘤制备抗体比较，哪种好? 解答：这个可能多是考虑噬菌体展示和杂交瘤的优缺点。首先从周期上来说的话，相对来说，噬菌体的方式时间短一些，另外从筛选上来说的话，噬菌体展示的方法比较稳定，而且比较简单一些，操作上具有优势。但是杂交瘤的方法，毕竟是从一种类似于细胞内部产生抗体的方式，所以在某些方面的话，它产生的抗体多的是天然的重链与轻链的配比，这一点，在噬菌体上不能做到。 8. 人源化抗体的制备噬菌体展示和转基因小鼠平台的优势比较? 解答：噬菌体展示技术具有周期短、准确、不受氨基酸位点限制等特点，能够通过多种淘洗和检测方式对不同表位进行筛选，生产成本相对低廉。不足之处在于受到库容、表达偏好性和展示效率的影响，抗体多样性会存在一定程度的限制，同时通过表面重塑等方法对提高人源化抗体亲和力的成功率并不稳定。转基因小鼠制备的全人源抗体，不仅大大减少了潜在的免疫原性，而且由于抗体是在体内产生，经历了正常的装配和成熟过程，从而保证抗体具有较高的靶亲和力。大部分转基因小鼠获得的单克隆抗体亲合力在0.1-10nM之间，也有些转基因小鼠单抗能达到皮摩尔级或者次皮摩尔级。但其不足之处在于前期研发投入的周期长，成本高。而且也由于抗体是在小鼠体内装配，因而产生的单抗具有鼠糖基化模式，使得这些单抗终不是全人源化模式。 9. 抗体如何进行长期保存，并保持效价的稳定? 解答：一般情况下，抗体属于比较稳定的蛋白。所以多数情况下，厂家会推荐-20℃~-80℃长期保存即可，为了避免反复冻融尽量分装后保存。此外，也可以通过加甘油避免反复冻融。当抗体浓度低时加BSA减少抗体吸附起稳定剂的作用。对于一些少数抗体，需要通过优化筛选缓冲液已达到保持抗体稳定的效果，优化包括盐浓度、pH、缓冲体系等。您知道，抗体是如何保持效价的稳定来长期保存?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

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怎么运用兔血清以及保存注意事项呢? 怎么运用兔血清以及保存注意事项呢? 兔血清的运用方法： 1、称取本品23.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，拌和加热煮沸至*溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。 2、样品的稀释及处理。 3、依据商检的规范要求或对标本污染状况的估量，兔血清选择2—3个稀释度，分别在10倍递增稀释的一起，即以汲取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。 4、稀释液移入平皿后，应及时将凉至45℃的琼脂培养基(可放置于45℃水浴箱保温)注入平皿约15mL，并滚动平皿使混合均匀。一起将琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。 5、待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h。 6、调查成果并进行计数。25-250个菌落为适宜规模。兔血清保存注意事项： 1、需求长期保存的兔血清有必要储存于-20℃ - 兔血清-70℃ 低温冰箱中，4℃冰箱中保存时间切勿超越1月，由于血清结冰时体积会添加约10%，因而，血清在冻入低温冰箱，有必要预留定体积空间，否则易产生污染或玻璃瓶冻裂。 2、瓶装血清冻结需选用逐步冻结法：-20℃ 至 -70℃ 兔血清低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室温，待悉数溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(当心勿形成气泡)，使温度与兔血清成分均一，减少沉积的产生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结，因温度改动太大，容易形成蛋白质凝集而呈现沉积。怎么运用兔血清以及保存注意事项呢? 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

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对于基底膜六胺银染色液(PASM)的操作步骤您知道吗? 标签：基底膜六胺银染色古朵生物溶液中文名称: 基底膜六胺银染色液(PASM) 分类：碳水染色规格：6×50ml 储存条件：4℃,避光,3个月用途：基底膜粘多糖染色，又叫PASM染色(periodic acid-silver methenamine)。产品说明：基底膜六胺银 (methenaminesilver)染色是一种经典显示基底膜的方法。组织经过氧化，使基底膜内的黏多糖暴露出醛基，醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为稳定的金属金，同时使背景清晰。六胺银染色能清晰地显示基底膜，在肾病变中应用多，常用来观察肾小球毛细血管基底膜在炎性损伤时如断裂、增生、折叠等形态改变。操作步骤(仅供参考)： 1.切片脱蜡至水洗。 2.切片入氧化剂氧化15min。 3.自来水洗、蒸馏水洗2min。 4.入铁明矾溶液染色10min。 5.自来水洗、蒸馏水洗2min。 6.入配制好的六胺银工作液中，60℃水浴染色大约25～30min，切片呈烟草黄色或黑色为止。 7.入蒸馏水中清洗。 8.用氯化金溶液调色1～2min。 9.蒸馏水洗2min。 10.置于海波溶液1min。 11.自来水洗。 12.用淡绿溶液复染1min。 13.自来水洗。 14.95%乙醇开始脱水，二甲苯透明，中性树胶封封固。染色结果：肾小球囊基底膜、肾毛细血管球基底膜黑色背景绿色注意事项： 1.实验中所用玻璃器皿，应预先放入洗液浸泡过并冲洗干净，烤干。 2.六胺银工作液配制后可放入温箱中预热3-5min(选做)。 3.配制好的六胺银工作液是一次性的，不能久放。 4.氯化金调色时，一定要在显微镜下观察。 5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。基底膜六胺银染色液 (PASM) 上海古朵生物科技有限公司，由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，致力于为生命科学研究领域提供产品，为广大科研工作者提供服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。查看更多

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古朵解析：怎么挑选适宜的HA标签抗体? 古朵解析：怎么挑选适宜的HA标签抗体? HA标签系统运用一个HA流感血凝素，influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽交融到方针蛋白。HA标签可坐落蛋白质的C端或N端，该系统已广泛运用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛运用。 HA标签抗体能特异辨认C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的交融蛋白，也可以用于检测和HA tag交融表达蛋白的表达、细胞内ding位，以及纯化、定性或定量检测HA tag交融表达蛋白等。挑选适宜HA标签抗体需求考虑的要素咱们在挑选一个标签抗体时，主要依据自己试验运用上的需求。这里需求考虑的要素包含，HA抗体的运用检测类型、HA抗体的克隆性及制备来源等。比方该HA抗体是否能用于免疫荧光IF的检测?是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP试验?是否需求HRP偶联的单克隆HA标签抗体?仍是一个兔来源的HA多抗更适宜? 一般来说，运用类型越多，在运用过程中的挑选余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性都要优于多克隆抗体，而多克隆。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际运用时的稀释比率。一个效价高的100μl HA抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5000，终究运用液相当于500ml)，要比效价低的1ml的HA抗体(假如WB检测的稀释比率是 1:200，终究运用液相当于200ml)性价比更高。因此在挑选抗体的时分，不光需求考虑抗体的量，还需求考虑抗体的效价，即不同运用的主张稀释比率。 HA标签抗体上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。查看更多

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古朵血清保存的六点注意事项您知道吗? 古朵血清保存的六点注意事项您知道吗？ (1)需要长期保存的血清有必要储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时刻切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%，因而，血清在冻入低温冰箱前，有必要预留一定体积空间，不然易发作污染或玻璃瓶冻裂。 (2)一般厂商供给的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。 (3)瓶装血清冻结需采用逐渐冻结法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(小心勿形成气泡)，使温度与成分均一，削减沉积的发作。切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结，这样因温度改变太大，容易形成蛋白质凝聚而出现沉积。 (4)热灭活是指56℃， 30分钟加热已*冻结的血清。加热过程中须规矩摇晃均匀。此热处理的意图是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非有必要，一般不建议作此热处理，因为热处理会形成血清沉积物显著增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反响有: 滑润肌细胞收缩，肥大细胞和血小板释放组胺，增强吞噬作用，促进淋巴细胞和巨噬细胞发作化学趋化和活化。 (5)切勿将血清在37℃放置太久，不然血清会变得污浊，同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。 (6)血清中的沉积物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及冻结后血清中纤维蛋白形成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm， 5分钟去除，也可不用处理。血清本上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。查看更多

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纤维蛋白原与凝血酶产品特点您知道吗? 纤维蛋白原与凝血酶产品特点：一、纤维蛋白原纤维蛋白原(Fibrinogen，Fg)，即凝血因子Ⅰ，其分子量约340KD，由α、β、γ三对不同多肽链所组成，多肽链间以二硫键相连。α-链分子量63.5 kDa β-链分子量56 kDa γ链分子量47 kDa (约含4% 碳水化合物)。在凝血酶作用下，α链与β链分别释放出A肽与B肽，生成纤维蛋白单体。在此过程中，由于释放了酸性多肽，负电性降低，单体易于聚合成纤维蛋白多聚体。但此时单体之间借氢键与疏水键相连，尚可溶于稀酸和尿素溶液中。进一步在Ca2+与活化的ⅩⅢ因子作用下，单体之间以共价键相连，则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块，完成凝血过程。古朵产品牛血纤维蛋白原纤维蛋白原溶液在50℃以上变性，因此加热温度不宜超过50℃;另外，纤维蛋白原一般应采用37℃的生理盐水溶解，溶解时温度不宜过低，在4℃条件下以及不含盐的溶液中难以溶解。二、凝血酶凝血酶(Thrombin)来源于牛血浆，分子量37KD，是由两条肽链(31KD和6KD)通过二硫键组成的。凝血酶是凝血酶原(凝血因子Ⅱ)激活后形成的蛋白质水解酶，其催化纤维蛋白原(fibrinogen)水解掉A肽和B肽，由此形成纤维蛋白单体，单体进一步聚合，在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。古朵产品凝血酶产品特点： 1、纯度高：SDS-PAGE检测图谱无明显杂蛋白条带; 2、比活高：比活力大于2000单位/mgpr; 3、不含有其他蛋白酶活性; 三、牛血纤维蛋白原检测凝血酶效价纤维蛋白原溶液的制备取纤维蛋白原，用0.9%氯化钠溶液制成含0.1%凝固物的溶液。标准凝血酶溶液的制备取凝血酶标准品，用0.9%氯化钠溶液溶解分别定量稀释制成每1ml中含5.0单位、6.4单位、8.0单位、10.0单位的标准品溶液。供试品溶液的制备取本品5瓶，分别用0.9%氯化钠溶液溶解并定量转移至同一量瓶中，混匀，稀释至刻度，再用0.9%氯化钠溶液定量稀释成与标准溶液相同的浓度。测定法取内径1cm、长10cm的试管4支，各加入纤维蛋白原溶液0.9ml，置37℃±0.5℃水浴中保温5分钟，再分别量取上述4种浓度的标准品溶液各0.1ml，迅速加入上述各试管中，立即记时、摇匀，置37℃±0.5℃水浴中，观察纤维蛋白的初凝时间，每种浓度测5次，求平均值(5次测定之大值与小值的差不得超过平均值的10%，否则重测)。标准品溶液的浓度应控制凝结时间在14秒～60秒为宜。以标准品效价(单位)的对数为横坐标，凝结时间(秒)的对数为纵坐标，进行直线回归(r≥0.99)。吸取供试品溶液0.1ml，按上述方法平行测定5次，求出凝结时间的平均值(误差要求同标准曲线)，用线性回归方程求得单位数，计算，即得。纤维蛋白原与凝血酶古朵公司为广大客户提供高质量的免疫学和生命科学相关产品。质量可靠，被全国各大院校科研机构认可并为Elisa试剂盒标准品对照品长期供应商。我们将以专业执着，精益求精的精神服务于广大科研用户。查看更多

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关于一抗和二抗浓度及孵育时刻比对您知道吗? 关于一抗和二抗浓度及孵育时刻比对您知道吗? 一抗和二抗在试验中浓度及孵育时刻有所改变，请按产品说明书上提示时刻操作，我司为您详细解析一抗和二抗浓度和孵育时刻比对，欢迎参考学习!一抗孵育条件在免疫组化反响中zui重要，包括孵育时刻、温度和抗体浓度。一抗孵育温度有几种： 4℃、室温、37℃，其间4℃作用佳;孵育时刻：这与温度、抗体浓度有关，一般37℃1-2h，而4℃过夜和从冰箱拿出后37℃复温45min。详细条件还要探索。二抗孵育条件：二抗一般室温或37℃30min-1h，详细时刻需求探索，而浓度一般有工作液，若是浓缩液还要探索浓度。但在免疫组化中我们一般先把二抗浓度和孵育时刻先定下，然后去探索一抗浓度和孵育时刻。建议一抗反响在4℃佳，反响温文，但时刻超过16~24h。 1 · 抗体无论是保存还是运送都应尽可能地防止重复冻融，收到抗体后请依据试验的需求，对抗体进行分装，防止同一管抗体重复冻融(重复冻融会导致抗体空间结构变性，导致多聚体形成，从而降低抗体的结合才能)。 2 · 抗体保存得当与否，直接决议了抗体的活性和使用作用，如果抗体保存得当，抗体活性大部分都可以维持数年。请谨记，无论何时请按照说明书引荐的保存条件正确处理和保存抗体。一抗和二抗上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。查看更多

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古朵教你如何挑选ELISA试剂盒? 古朵教你如何挑选ELISA试剂盒？试剂盒的性能挑选，首先了解ELISA规模，ELISA试验中为了确定*佳信号和*背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预试验中进行互相相抗的滴定。同时，应包含在适当规模内的规范品的系列稀释。按试剂说明书惯例提供的规模进行操作。第二、多咨询供货商的技术员，详细了解产品后再考虑购买一般待测抗原规范曲线的线性规模的可通过将规范品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用规范的ELISA操作流程、扩大试剂盒、第三类试剂、或改动酶底物体系可在一定规模内进步灵敏度。为了优化灵敏度，主张孵育规范品和标本。若使用过氧化物酶作为显色体系，应禁止在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物ELISA试剂盒酶的活性。第三、ELISA试剂盒注意事项 1.挑选时间久的试剂盒供货商。 2.浓缩洗涤液呈现结晶后，请于37℃孵育15分钟 3.挑选并购买后在效期内使用，不同批号的试剂不能混用。 ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针查看更多

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蛋白质凝胶电泳凝胶的制备方法您知道嘛? 蛋白质凝胶电泳凝胶的制备方法您知道嘛？【材料与试剂】（1）30%的丙烯酰胺：分别称取29g丙烯酰胺，1g N,N-亚甲双丙烯酰胺加温热的去离子水60ml，加热至37℃溶解，补加水至终体积为100ml,过滤，即配成30%（w/v）丙烯酰胺贮存溶液。丙烯酰胺和双丙烯酰胺在贮存过程中缓慢转变为丙烯酸和双丙烯酸，这一脱氨基反应是光催化或碱催化，故溶液的pH值不超过7.0，应置于棕色瓶中4℃保存。（2）10%十二烷基硫-酸钠（SDS）：称取10gSDS加去离子水90ml加热至68℃，加几滴浓盐酸调节至pH7.2加水至100ml，即为10%（w/v）SDS。（3）浓缩胶缓冲液（1mol/L Tris-HCl pH 6.8）：12.12g Tris溶解在80ml去离子水中，用浓盐酸调节pH至6.8,再加去离子水至100ml。4℃保存。（4）分离胶缓冲液（1.5mol/L Tris-HCl pH 8.8）：18.16g Tris溶解在80ml去离子水中，用浓盐酸调节pH至8.8,再加去离子水至100ml。4℃保存。（5）10%过硫-酸胺（AP）：过硫-酸胺提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所必需的自由基，可用去离子水配制小量10%（W/V）贮存液并4℃保存。由于过硫-酸胺会缓慢分解，故应隔周新鲜配制。（6）TEMED（N，N，N,N-四甲基乙二胺）TEMED通过催化过硫-酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的聚合，由于TEMED只能以游离碱的形式发挥作用，因此pH值较低时聚合反应受到抑制。（7）Tris-甘氨酸电泳缓冲液：分别称取15.1g Tris和94g甘氨酸，溶解在900 ml去离子水中，然后加入50 ml 10%（w/v）SDS，再加去离子水至1000 ml则成5?贮存液。使用时稀释5倍，终浓度Tris为25mmol/L、甘氨酸为250mmol/L、0.1%SDS，缓冲液pH为（8.3）。（8）聚丙烯酰胺凝胶电泳槽和电泳仪（9）加样器和吸头等古朵小编详述【操作方法】（1）根据垂直电泳槽说明书安装玻璃板，确定需配制分离胶的浓度和体积，按“配制Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液”所列成分（见书末附录）配制所需分离胶；（2）迅速将分离胶注入两玻璃板间隙中，留出灌注积层胶所需空间（梳子的齿长再加1cm，用滴管小心地在分离胶上覆盖一层0.1%SDS（当丙烯酰胺浓度≤8%时）或异丁醇或水（当丙烯酰胺浓度≥10%时），覆盖层可防止氧扩散进入凝胶而抑制聚合反应。将凝胶垂直置于室温下；（3）分离胶聚合完全后，倒出覆盖层液体，用去离子水洗涤凝胶顶部数次以除去未聚合的丙烯酰胺，尽可能排除凝胶上的液体；（4）确定需配制浓缩胶的体积，按“配制Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶所用溶液”配制所需浓缩胶，然后直接将浓缩胶灌注在分离胶上，立即插入干净的配套梳子，避免气泡，然后加入浓缩胶溶液以充满梳子之间的空隙。待浓缩胶聚合后，拔出梳子，形成加样孔；（5）用去离子水将Tris-甘氨酸电泳缓冲液贮存液稀释5倍，倒入电泳槽，将加样孔充满，这时加样孔中的气泡可通过电泳缓冲液排除。蛋白质凝胶电泳凝胶上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨；牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针查看更多

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ELISA试剂盒标本保存方法有哪些? ELISA试剂盒标本保存方法有哪些？ ELISA试剂盒标本保存方法有哪些呢?我们在ELISA试剂盒实验中标本是非常重要的，经常会出现ELISA操作员反映在标本保存时出现溶血、凝集不全、受细菌污染等现象发生，古朵生物特针对如何正确保存标本问题做出总结。一、标本保存不当在冰箱中保存过久的标本，血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可形成二聚体，在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性;标本放置时间过长(如一天以上)，有时抗原或抗体免疫活性减弱，亦可出现假阴性。为克服上述干扰，ELISA测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定，5天内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混合后再测定，但混匀时应轻柔，不可强烈振荡。二、标本溶血由于各种人为原因引起的标本溶血，均可因红细胞破坏溶解时释放出大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定中，会导致非特异性显色，ELISA试剂盒干扰测定结果。为克服上述干扰作用，标本采集时必须注意避免溶血。三、标本凝集不全在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下，正常血液采集后1/2~2h开始凝固，18~24h*凝固。临床检验工作中，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果;这类情况于次日复查时因血凝已*，血清中不再有纤维蛋白原存在，故复查结果变为阴性。为避免上述干扰作用，解决的办法最好是血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。四、标本管中添加物质的影响抗凝剂、酶抑制剂及快速分离血清的分离胶等均对ELISA测定有一定干扰作用。五、标本受细菌污染因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶，因此，被细菌污染的标本同溶血标本一样，亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。做好了ELISA试剂盒因素和操作因素之后，确保检测结果的准确性就容易的多了。 ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

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ELISA试剂盒加液过程中需注意什么? ELISA试剂盒加液过程中需注意什么？ ELISA试剂盒在科研领域应用广泛，灵敏度高和特异性强的特点更是被认可。那我们在实验中，如遇到试剂盒需要加液，那加液的过程中是不是也有我们应该注意的地方呢?今天古朵生物生物就给大家带来有关“ELISA试剂盒加液过程中需要注意什么"的解答，下面请看具体讲解。在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清，可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。作为ELISA测定的标本十分广泛，体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液)，有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。古朵ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA试剂盒中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。 ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。查看更多

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古朵接触皿NA 65mm Nutrient Agar您了解吗? 古朵接触皿NA 65mm Nutrient Agar您了解吗？产品名称：表面接触皿(NA) 英文名称：Nutrient Agar 生产标准：GB、SN、中国药典包装规格：内容物15~20ml，65mm×10个/包，三层真空包装产品用途：用于设备、车间、人员、包装材料等表面微生物的测定组成成分：蛋白胨10g;牛肉浸粉3g;氯化钠5g;琼脂15g;蒸馏水1000ml、pH7.3±0.1(℃) 贮藏条件：225℃避光保存有效期限：180天表面接触皿使用方法： 1、从冷藏柜中取出接触皿，并恢复至室温。 2、将包装整体送入取样地点，在此过程中逐步去掉外面两层包装，后一层真空包装在操作间打开。 3、打开接触皿上盖，使培养基充分接触待测表面，必要使用手指轻轻按压接触皿底部中心约10秒，轻轻抬起，将上盖从接触皿一侧小心盖上。 4、在接触皿磨砂区域标记取样地点、取样时间和取样人。 5、用消毒剂或杀孢子剂擦拭测试区域，以消除培养基的残留。 6、将接触皿从洁净室取出，按规定的温度和时间倒置培养。 7、观察、计数。表面接触皿产品性能指标： 1、外观：淡黄色、培养基凸出接触皿边缘适当高度、表面平整、无裂痕、无肉眼可见杂质和气泡。 2、理化：pH合格，凝胶强度500650g/平方厘米。 3、无菌性和持水性：3035℃，培养5天，无细菌生长，培养基无明显失水现象。 4、生长试验：接种大肠埃希氏菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、枯草芽孢杆菌ATCC 9372、白色念珠菌CMCC(F)98001、黑曲霉CMCC(F)98003分别50100CFU，生长良好且菌落直径和菌落特征典型。注意事项： 1、本品经高压灭菌、无菌灌装及辐照灭菌，若使用前接触皿已经干裂或染菌，请勿使用。 2、开封后未使用完的接触皿需及时密封并至于冷藏柜中保存，避免干裂和染菌。 3、在冰箱中储存时间过久或温差较大的情况下，接触皿会出现部分冷凝水，若较多请在洁净环境下将水倾出，并于培养箱中放置一段时间，待其表面干燥后再使用。 4、本品为一次性使用产品，使用后应高压灭菌后丢弃。 5、仅用于工作区域表面微生物检测。表面接触皿NA 65mm Nutrient Agar 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

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【古朵生物】缓冲溶液作用原理和pH值您了解嘛? 【古朵生物】缓冲溶液作用原理和pH值正常人血浆的pH值为7.35～7.45。血浆PH值的相对恒定性有赖于血液内的缓冲物质以及正常的肺、肾功能。血浆的缓冲物质包括NaHCO3/H2CO3、蛋白质钠盐/蛋白质和Na2HPO4/NaH2PO4三个主要的缓冲对，其中以NaHCO3/H2CO3最为重要。红细胞内还有血红蛋白钾盐/血红蛋白、氧合血红蛋白钾盐/氧合血红蛋白、K2HPO4/KH2PO4、KHCO3/H2CO3等缓冲对参与维持血浆PH值的恒定。当酸性或碱性物质进入血液时，血浆中的缓冲物质可有效的减轻酸或碱性物质对血浆PH值的影响，特别是肺和肾保持正常的排出体内过多的酸或碱的功能的情况下，血浆PH值的波动范围极小。 1）缓冲溶液作用原理和pH值当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时，有阻碍溶液pH变化的作用，称为缓冲作用，这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液（如HAc与NaAc），弱碱及其盐的混合溶液（如NH3·H2O与NH4Cl）等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用，是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时，H离子基本上被A-离子消耗：所以溶液的pH值几乎不变；当加入一定量强碱时，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。 2）缓冲溶液的缓冲能力在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱，其溶液pH值变化不大，但若加入酸，碱的量多时，缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲能力缓冲溶液的c组成的缓冲溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大，否则，不能忽视离子间的作用。组成缓冲与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaA溶液的两组分的比值不为1∶1时，缓冲作用减小，缓冲能力降低，当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH最小，缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算：此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远，缓冲能力愈小，甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系，存在有效缓冲范围，这个范围大致在pKaφ（或pKbφ）两侧各一个pH单位之内。弱酸及其盐（弱酸及其共轭碱）体系pH=pKaφ±1 弱碱及其盐（弱碱及其共轭酸）体系pOH=pKbφ±1 例如HAc的pKaφ为4.76，所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76～5.76的缓冲溶液，在这个范围内有较大的缓冲作用。配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力最大，此时c（HAc）/c（NaAc）=1。 3）缓冲溶液的配制和应用为了配制一定pH的缓冲溶液，首先选定一个弱酸，它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值，然后计算酸与碱的浓度比，根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液。以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法。对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法。缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛，如鉴定Mg2离子时，可用下面的反应：白色磷酸铵镁沉淀溶于酸，故反应需在碱性溶液中进行，但碱性太强，可能生成白色Mg（OH）2沉淀，所以反应的pH值需控制在一定范围内，因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液，保持溶液的pH值条件下，进行上述反应。 4）缓冲液的测定使用ph试纸或者酸碱检测仪检测。通过ph试纸上显示的不同颜色与比色卡进行比对，从而得出酸碱值，但是ph试纸的测试的误差较大，用酸碱检测仪检测，可直接得出酸碱值，测量值准确。缓冲溶液上海古朵生物科技有限公司，由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，致力于为生命科学研究领域提供优质产品，为广大科研工作者提供服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂，标准物质、天然植物提取物及中药标准品，核酸、酶、缓冲剂、显色底物，医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种，广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。查看更多

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您知道肿瘤琼脂糖凝胶电泳标本的拍摄方法吗? 您知道肿瘤琼脂糖凝胶电泳标本的拍摄方法吗? 1 材料拍摄肿瘤电泳标本应具备的设备有照像机、近摄接圈、翻拍架、电源稳压器、紫外光灯箱、红滤色镜、快门线等。 1.1 照相机照相机应具备超近距离拍摄的条件; 镜头要有较高的分辨力; 快门机构要有长时间曝光的B 门装置,并且要有能安装快门线的螺孔。一般多使用单镜头反光照相机。如果使用能够双倍伸长暗腔机构的相机则效果佳。 1.2 近摄接圈若使用单镜头反光照相机拍摄,必须加用近摄接圈。只有加用近摄接圈,拍摄时才能使肿瘤电泳标本占满画面。在使用近摄接圈时,因增加了机身与镜头之间的距离,照相机自动收缩光圈的机构失效。因此拍摄时应先放大光圈,进行准确调焦,而后再将光圈调小到所需要的大小进行拍摄。肿瘤琼脂糖凝胶电泳标本古朵 1.3 翻拍架翻拍架的主要作用是固定照相机。在拍摄时,因曝光时间较长,照相机必须稳定在一定的位置上,否则就无法得到清晰的影像。因拍摄时的物距很短,使用翻拍架比使用三角架为方便。 1.4 电源稳压器光源电压的波动,直接影响着光源的亮度稳定,光源亮度的稳定又直接影响着拍摄时曝光值的精度。因此,为保证肿瘤电泳标本拍摄时曝光的准确性,好使用一台稳定光源电压的电源稳压器。在每次实验结果的拍摄之前,必须先核实稳压电源输出电压的标准值。电压如不在标准值上,就应行调整,而后再进行拍摄。 1.5 紫外光灯箱紫外光灯箱的作用是提供肿瘤电泳标本拍摄的紫外光源。因为琼脂糖上所记录的荧光标记条带,在通常可见光的透射下是看不到的,只有受紫外光线的激发时,荧光标记物在灯箱的暗环境下才能显示出清晰明亮的橙红色条带。 1.6 红滤色镜琼脂糖上所记录的肿瘤标本条带,只有在透射的紫外光下观看才能获得佳的视觉效果。拍摄使用的全色胶片对蓝、紫色光以及紫外光的反应较为敏感。使用红滤色镜的主要作用是使肿瘤标本条带的橙红色光多地到达胶片感光面,拉大肿瘤标本条带与琼脂糖表面的密度差,使肿瘤标本的拍摄获得良好的效果。 1.7 快门线因标本拍摄曝光时间较长,为了避免用手直接触动相机的快门使相机受到震动,快门的开启须用快门线来控制。 2 方法操作时首先在相机的机身与镜头之间加上能使装载肿瘤标本的琼脂糖充满取景画面的近摄接圈,镜头前要加装上红滤色镜。装好GB21O黑白胶卷,再将照相机固定在翻拍架上。然后将紫外光灯箱的屏面向上,平放在翻拍架的平台上。再将肿瘤电泳的琼脂糖凝胶平放在紫外光灯箱的屏面上。后打开稳压电源的开关,即可进行拍摄。从拍摄的照片我们可以看到,胶片按比例记录亮度范围的能力得到了充分的发挥。大密度部分已经很浓重了,而琼脂糖凝胶与灯箱屏面的交接线很容易辨别。肿瘤标本条带部分的影调层次几乎没有受到任何损失,高光部分的亮度也得到了良好的体现。我们使用上述方法拍摄的肿瘤耐药基因MDR21 及其他DNA 琼脂糖凝胶肿瘤电泳标本,可见曝光准确、反差适宜、影调层次丰富、银盐颗粒微细、标本条带清晰。 3 讨论在拍摄肿瘤电泳标本的过程中,一定要本着严谨科学的工作态度去操作。 3.1 照相机的定位要领在固定相机与标本位置时,要注意镜头主光轴与标本平面的垂直,标本的中心要摆放在镜头主光轴的垂线上。否则将会产生以下两种现象: 因拍摄时镜头的物距超近,透视作用就必然明显。镜头的主光轴与标本的中心如果不够垂直,将会造成因透视作用产生的变形现象。如果镜头的主光轴与标本的中心不够垂直,标本四周各点到镜头前节点的距离就不相等。这样将会造成拍摄画面的局部焦点不实。拍摄画面的局部将会产生影像虚松现象。 3.2 光圈与快门的曝光组合曝光时要兼顾到有足够的景深清晰范围和倒易律失效的问题: 因加近摄接圈拍摄体积很小的肿瘤标本,镜头的物距相当小,影像的景深范围就会受到很大的限制。为了保证拍摄影像有足够的清晰度,必须收缩一定的光圈级数来提高影像的影深范围加近摄接圈拍摄,因像距的增加,到达感光面的通光量就必然下降; 作为光源的紫外光灯箱的亮度也有局限; 还必须收缩一定的光圈级数来提高影像的清晰度。由于以上多种因素的制约,曝光的时间就必然要延长。如果曝光时间超过了倒易律的允许范围,拍摄画面的影调层次将会受到损失,影像的反差也会发生变化。因此,既要保证影像的清晰度,又要保证画面的影调层次,光圈与快门的组合就显得尤为重要。我们拍摄曝光时的光圈一般控制在F4 至F5.6 之间,曝光时间采取B 门手工控制在2 秒左右(此曝光条件仅供参考)。 3.3 曝光时值的控制只有把曝光的时值控制准确,胶片宽容度能按比例记录亮度范围的能力才能够得到充分的发挥。用手工控制快门的速度,就有一个曝光时值的精度问题需要解决。我们解决这个问题的办法很简单。用一个暗室定时钟,放在翻拍架的旁边。曝光时用眼睛看着定时钟的表盘,当快门揿动的同时,观察表盘上秒针所走时值刻度来计时。采用这种方法控制曝光时值较为准确。我们经过多次重复曝光实验,胶片经过标准的条件冲洗,没有发现胶片密度有不一致的现象。 3.4 胶片的选用拍摄时所用的胶片应选用感光度较高的全色胶片。因感光度高的胶片可提高曝光时快门速度、避免倒易律失效、保证画面影调层次的显现。全色胶片可保证标本条带橙红色光在胶片上的正确反应。我们使用GB210 乐凯黑白全色胶卷,拍摄效果均较满意。因肿瘤标本条带是橙红色的,拍摄时镜头前还要加红滤色镜,所以禁忌使用感色范围狭窄的胶片(分色片、色盲片)。因此类胶片对红色光的反应迟钝,或不反应。 3.5 胶片的冲洗胶片的冲洗我们选用了D-76 微粒显影液,显影药温20 ℃,显影时间7 分钟。在冲洗时尽量做到的定时定温,以此来保证胶片冲洗质量的稳定。总之,肿瘤电泳标本的拍摄质量,直接影响到实验研究的结果。为避免不可挽救的损失,在拍摄时对每一环节的操作都要做到准确无误,才能为科学实验提供高质量的肿瘤电泳照片。肿瘤琼脂糖凝胶电泳标本古朵上海古朵生物科技有限公司，由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，致力于为生命科学研究领域提供产品，为广大科研工作者提供服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂，标准物质、天然植物提取物及中药标准品，核酸、酶、缓冲剂、显色底物，医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种，广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。查看更多

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简介

职业：上海古朵生物科技有限公司 - 销售经理

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个人简介：上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

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