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小鼠elisa试剂盒的测定原理与性能?
小鼠elisa试剂盒的测定原理与性能 小鼠elisa试剂盒 可测定微量样本(标准操作法是5μL)。测定小鼠血清或者血浆(肝素血浆除外)中的抗dsDNA 抗体浓度。1个试剂盒可做96孔。标准品是小鼠源。全部试剂均为液体。全反应时间是4小时20分钟。 一、小鼠elisa试剂盒的测定原理 小鼠elisa试剂盒是标准品、稀释样本在抗原包被的微孔板中进行孵育处理。孵育2小时后清洗,加入过氧化物酶结合抗小鼠IgG抗体,与捕捉的抗体孵育2小时。清洗后,显色剂(TMB)与孔中残留的过氧化物酶反应。添加酸性溶液可终止反应。反应生成的黄色产物在450nm处(副波长620nm)测定。吸光度与抗小鼠dsDNA 抗体浓度成正比。标准品浓度对应吸光度可制作成标准曲线。通过标准曲线获得未知样本浓度。 二、 小鼠elisa试剂盒 的性能 1、测定范围 小鼠抗dsDNA 抗体检测范围在15.6-1000mU/mL内。 2、度实验 (1)批次变动(N=30)平均C.V.值是4.2% (2)日差可重复性实验(N=30、3天)平均C.V.值是4.7% 3、特异性 本ELISA系统使用的标识抗体对抗小鼠IgG抗体具有特异性。与小鼠IgM的反应交差性在检测灵敏度以下。 小鼠elisa试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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植物ELISA检测试剂盒的测定方法?
技术快讯:植物ELISA检测试剂盒的测定方法 要使植 物ELISA检测试剂盒 测定得到准确的结果,不论是定性的还是定量的,必须严格按照规定的方法制备试剂和实施测定。想成功得做好植物ELISA检测试剂盒实验就要了解相关步骤,下面跟随古朵生物技术小编来了解下! 首先植物ELISA检测试剂盒实验*步是加样 在植物ELISA检测试剂盒中除了包被外,一般需进行45加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性,例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管,保持准确的加样姿势,使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中则加样量应力求准确。标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出现气泡。 植物ELISA检测试剂盒第二步保温 在植物ELISA检测试剂盒中一般有二次抗原抗体反应,即加标本后和加结合物后,此时反应的温度和时间应按规定的要求,保温容器是水浴箱,可使温度迅速平衡。各ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒应该是金属的,传热容易。如用保温箱,空湿盒应预先放在其中,以平衡温度,这在室温较低时更为重要。加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应 其次植物ELISA检测试剂盒的洗涤也是非常关键的 洗涤在植物ELISA检测试剂盒过程中不是反应聚,但却是决定实验成败的关键。洗涤的目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯待塑料对蛋白质的吸附作用是普遍性的。因此在植物ELISA检测试剂盒测定的反应过程中应尽量避免非特异性吸附,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。在标本和结合物的稀释液和洗涤液中加入聚山梨酯一类物质即右达到此目的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨c脂肪酸酯,为非离子型的表面张力物质,常作为助溶剂。根据脂肪酸的种类而对聚山梨酯编号,结合月桂酸的为聚山梨酯20,在ELISA中zui为常用。它的洗涤效果好,并具有减少非特异性吸附和增强抗原抗体结合的作用。 洗涤如不*,特别在zui后一次,如有酶结合物的非特异性吸附,将使空白值升高。另外,在间接法中如血清标本内的非特异性IgG吸附在固相上而未被洗净,也将与酶标抗体作用而产生干扰。 一步比色 如阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般可采用目视比色。如用比色计测定结果,准确性决定于ELISA板底的平整与透明度和比色计的质量。 植物ELISA检测试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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古朵阐述:几种血涂片染色方法的比较点击?
古朵阐述:几种血涂片染色方法的比较点击? 血涂片染色广泛应用于医学检验和组织学教学片的制作。传统的染色方法有Wright氏、Giemsa氏和WrightGiemsa混合法,作为医学检验以简单快捷为shou选,而要制作教学标本,则对染色效果、标本存放时间要求高,对此,我们对各种染色方法进行了长期的探索和比较,以期找到较稳定的、效果满意的染色方法用于制作大批量教学标本。 1 材料与方法 1.1 采集标本 用消毒采血针头扎刺手指头或耳垂,滴取黄豆大小血滴于洁净载玻片上,推成均匀血膜,自然晾干,用甲醇固定2 min~5 min。大量制作教学标本可一次推出所需血膜,固定待用。 1.2 染色 1.2.1 Giemsa氏染色法 将Giemsa原液(配制1年后)分别与pH 6.4、6.6、6.7、6.8的磷酸盐缓冲液按1∶10的比例配成工作液;将固定好的血片分别滴染以上4种工作液,每种染液又分别染25 min、30 min、45 min、60 min,自来水冲洗、镜检。 1.2.2 Wright氏染色法 染液按传统方法预先配好,我们使用配制1个月后的Wright氏染液,用前用pH 7的磷酸盐缓冲液稀释1倍,分别染5 min、10 min、15 min,然后用自来水冲洗干净、镜检。 1.2.3 Wright-Giemsa混合法 取Giemsa原液1份、Wright氏原液5份、pH 6.7的磷酸盐缓冲液6份配成染液,滴染10 min、15 min、20 min,然后用自来水冲洗干净、镜检。 2 结果 2.1 Giemsa滴染 用pH 6.7的磷酸盐缓冲液配制的工作液染色45 min的血片,红细胞呈桔红色,白细胞核呈紫蓝色,中性颗粒浅红色,嗜酸性颗粒桔红色,淋巴细胞胞质浅蓝色,单核细胞胞质灰蓝色,血小板紫蓝色。而pH<6.7和染色时间较短者,则核染色偏红或难着色,pH>6.7则核呈蓝色,嗜酸性颗粒颜色偏暗。 2.2 Wright氏染液滴染 染色15 min,细胞核和血小板紫红色,其他结果与Giemsa滴染相似,染色时间过短则核难着色,时间过长,则易使染液挥发而造成污染。 2.3 Wright-Giemsa混合染色 细胞核呈紫蓝色,红细胞紫红色,其他结果与Wright氏滴染相似。 3 比较与讨论 三种染色法均为传统染色法,各有优缺点:Giemsa氏染色法,染色过程易控制、不污染是其大的优点,染色效果对染液pH值要求高,经过反复多次试验,以pH 6.7染色效果zuihao,各种细胞的特性显示清楚,但染色时间长是其缺点,故此法较适于制作教学标本用;Wright氏染色法的优点是染色时间短,结果出现快,较适于临床检验,但其染色过程不易掌握、易污染是其缺点;WrightGiemsa混合法虽能对两种染法起互补作用,但染液变性快、易污染,也不适于教学标本染色。 4 体会 各种涂片染色后,不要倾去染液,否则易使染液沉淀在片上;直接用自来水冲洗比用蒸馏水或缓冲液冲洗方便、*,可通过调大水压及时冲去结合尚未牢固的染料沉渣。 血涂片 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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黏蛋白异染染色液(天青A法)实验注意事项说明书?
黏蛋白异染染色液(天青A法)实验注意事项说明书 中文名: 黏蛋白异染染色液(天青A法) 规格:10ml,5×1ml,100ml,500ml(其他规格电询) 保存:—20℃,避光,6个月 用途:黏蛋白染色 组成:酸性黏蛋白和蛋白多糖呈紫色至红色,背景呈蓝色。 黏蛋白异染染色液(天青A法)实验注意事项 染染色液 操作步骤: 1,切片脱蜡至水; 2,黏蛋白异染染色液(天青A法)染色,去离子水冲洗5min; 3,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,混合封片剂封片。 注意事项: 1,涂片厚薄适宜,固定后方可染色,并且切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。 2,所加染液以覆盖涂片为宜,不能过少,以免蒸发而染料沉淀。 3,所有试剂,溶液以及样品的包装上必须要有标签;标签要完整,清晰,表明试剂的名称,规格,质量。 4,溶液除了表明品名外,还应表明浓度、配置日期等,万一标签脱落,应照原样贴牢,决定不允许在容器内装入与标签不相符的物品。 5,无标签的试剂必须取小样检定后才可使用;不能使用的化学试剂要慎重处理,不能随意乱倒;为了保证试剂不受污染,应当用清洁的牛角勺或不锈钢小勺从试剂瓶中取出试剂,绝不可以用手抓取;若试剂结块,可用洁净的玻璃棒或瓷药铲将其捣碎后取出。 6,液体试剂可用洗干净的量筒到取,不要用吸管伸入原试剂中吸取液体;从试剂瓶中取出的,没有用完的声誉药品,不可再倒回原瓶。 7,固定液应定期换,以免固定不充分导致着色不佳。 8,染色液应定期换,以免影响染色效果。 说明: 黏蛋白异染染色液(天青A法)是利用天青的异染性这一特性,染色后组织或组织成分着染的颜色与染料复合物的原有颜色明显不同而且可形成鲜明的对比。染色后,切片处理对异染染色的稳定性非常重要,宜采用乙醇保存。 染色液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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ELISA试剂盒的原理是什么?有哪些特点?
ELISA试剂盒的原理是什么?有哪些特点? Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗体ELISA检测。 ELISA试剂盒的检测原理: 免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。 ELISA试剂盒 的主要特点: 1、高效、灵敏、特异的抗体; 2、稳定的重复性和可靠性; 3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; 4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; 5、节省实验经费。 ELISA试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。 E L ISA检测试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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您知道显色反应避光对ELISA实验的重要性吗?
接下来,古朵生物为您揭晓显色反应避光对ELISA试剂盒实验的重要性,好消息千万不要错过哦。 这类反应的定性结果可以用肉眼判断。目视标本也无色或近于无色者判为阴性,显色清晰者为阳性。但在ELSIA试剂盒中,正常人血清反应后常可出现呈色的本底,此本底的深浅因ELISA试剂盒的组成和实验的条件不同而异,因此实验中必须加测阴性对照。 阴性对照的组成应为不含受检物的正常血清或类似物。在用肉眼判断结果时,宜用显色深于阴性对照作为标本阳性的指标。此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。 ELISA试剂盒定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显se情况适当缩短或延长反应时间,及时判断。 OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深,再延长反应时间,可使本底值增高。OPD底物液受光照会自行变色,显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD产物用硫酸终止后,显色由橙黄色转向棕黄色。 TMB受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后ELISA试剂盒,约40分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,ELISA试剂盒至2小时后即可完全消退至无色。 TMB的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长测读吸光值。 ELISA试剂盒产品优势您知道多少? 1.极高品质:高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础; 2.特异:特异检测目标分子,结果可重复; 3.高度灵敏:可检测到pg/mL级别的目标; 4.种类齐全:可覆盖人、大鼠、小鼠、棉鼠、猕猴、猪、马、犬和猫等多个种属; 5.优化设计:可拆卸式96孔板(12X8),为血清、血浆、尿样和细胞培养物样本检测进行优化。 6.严格的质控体系:所有试剂盒从原料到成品经过严格的质控,确保试剂盒质量及稳定性; 7.多年实践经验的技术老师,保证我公司ELISA试剂盒完善专业的售后服务; 8.专业的代测服务:WB实验代测,ELISA试剂盒实验代测,IHC实验代测,染色实验代测(上海市客户可上门取样)。 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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ELISA试剂盒阴性对照与阳性对照有啥区别?
ELISA试剂盒阴性对照与阳性对照有啥区别? 阳性对照品 (positive control)和阴性对照品(negative control)是检验试验有效性的控制品,同时也作为判断结果的对照,因此对照品,特别是阳性对照品的基本组成应尽量与检测标本的组成相一致.以人血清为标本的测定,对照品也为人血清,因为正常人血清在各种ELISA模式中可产生不同程度的本底.由于大量正常人血比较难得到,elisa试剂盒国外试剂盒中的对照品多以复钙人血浆(recalcified human plasma)为原料,即在血浆中加入钙离子,使其中的纤维蛋白质凝固,除去凝块后所得的液体,其组成与血清相似.阴性对照品须先行检测,确定其中不含待测物质.例如HBsAg检测的阴性对照品中不可含HBsAg,抗HBs也是阴性.阳性对照品多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质,其中加入一定量的待检物质,此量在试剂说明书中标明.加入的量应与试剂的敏感度相称,在测定中得到的吸光值与受检标本吸光值比较,可对标本中受检物质的量有一个粗略的估计.ELISA试剂盒国外检测HBsAg的检测敏感度约为0.5ng/ml,阳性对照品中含量约为10ng/ml.在对照品中一般加入抗生素(antibiotic)和防腐剂,以利保存. ELISA试剂盒 定量测定的(例如甲胎蛋白质癌胚抗原测定等)应含有制作标准曲线用的参考标准品,应包括覆盖可检测范围的4-5个浓度,一般均配入含蛋白保护剂及防腐剂的缓冲液中. ELISA试剂盒阴性对照及阳性对照:阴 阳性对照若有正确的结果,对试剂盒操作的结果可以有粗略的判断.空白对照:对ELISA试剂来说,空白对照实际上是不加标本不加酶做对照.空白对照主要测系统的吸光率.空白对照在单波长测量时显得尤其重要. ELISA试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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古朵详述| ELISA试剂盒和固相抗结合?
古朵详述| ELISA试剂盒和固相抗结合? 看完上海古朵为您分析的ELISA试剂盒相信大家对它们也有了进一步的了解,如果还有其他的问题可以登录上海古朵的网站咨询上海古朵的工作人员,上海古朵将竭诚为您解答。 已包被抗原或抗体的固相载体在低温并且干燥的条件下,一般可以保存6个月,而有些不完整的试盒,仅供应包被用抗原或抗体,检测人员需自行包被。固相载体和包被过程: 在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作ELISA试剂盒中载体的材料很多,常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性,加之它的价格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。 在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。ELISA试剂盒抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。 加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。 从理论来说,温育采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。 检测试剂盒原材料批量进口与自配的特殊配方稀释剂(预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10 %),经过严格交叉反应和干扰测试及稳定性试验,明确了其高灵敏度对检测的样本达到佳的性能。ELISA(酶联免疫吸附分析)通常用于定性和定量评估细胞因子、趋化因子、生长因子、磷酸化后目标、免疫球蛋白和其他免疫标记,保证了产品的高品质性能的同时兼顾成本。 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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ELISA检测试剂盒的这些事项要注意?
ELISA检测试剂盒的这些事项要注意 使用 ELISA检测试剂盒 进行试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应。 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括: 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。 除此之外还要注意以下事项: 1.确定ELISA检测试剂盒在有效期内; 2.仔细阅读说明书; 3.按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积); 4.标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存; 5.根据检测标本数量确定所需试剂的量; 6.准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等; 7.按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂。 ELISA检测试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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怎么运用兔血清,有哪些保存注意事项呢?
怎么运用兔血清,有哪些保存注意事项呢? 兔血清的运用方法: 1、称取本品23.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,拌和加热煮沸至*溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。 2、样品的稀释及处理,略。 3、依据商检的规范要求或对标本污染状况的估量,兔血清选择2—3个稀释度,分别在10倍递增稀释的一起,即以汲取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。 4、稀释液移入平皿后,应及时将凉至45℃的琼脂培养基(可放置于45℃水浴箱保温)注入平皿约15mL,并滚动平皿使混合均匀。一起将琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。 5、待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。 6、调查成果并进行计数。25-250个菌落为适宜规模。 兔血清保存注意事项: 1、需求长期保存的兔血清有必要储存于-20℃ - 兔血清-70℃ 低温冰箱中,4℃冰箱中保存时间切勿超越1月,由于血清结冰时体积会添加约10%,因而,血清在冻入低温冰箱,有必要预留定体积空间,否则易产生污染或玻璃瓶冻裂。 2、瓶装血清冻结需选用逐步冻结法:-20℃ 至 -70℃ 兔血清低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室温,待悉数溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(当心勿形成气泡),使温度与兔血清成分均一,减少沉积的产生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结,因温度改动太大,容易形成蛋白质凝集而呈现沉积。 动物血清上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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明胶酶谱试剂盒如何操作才会出结果?
很多老师在购买了我们明胶酶谱试剂盒之后,不知道应该如何操作,才能很快做出结果,古朵生物技术给您答疑解惑。 实验中的小贴士告诉大家: 1.做酶谱要测定样品蛋白的浓度(同Western blot,建议用BCA法); 2.酶谱法是测定样品中MMP-2、9活性的,如果煮沸使蛋白变性就没有用了,故禁忌煮沸; 3.上样缓冲液中也不能加β-巯基乙醇,这点由western blot转作明胶酶谱的朋友切记、切记; 4.蛋白上样量必须保证一样,不会出现一致的透明条带,如果不能保证上样量一致,测出的相对活性也没有统计分析的意义; 5.上样时非常重要的一点,必须在4℃环境中操作,一般用的是冰台,同时所用的蛋白样品(-80℃冰箱)不能是以前曾解冻使用过的,必须是新取出的,因为只要解冻就会有部分酶降解,影响你的结果。此外做过一次酶谱的蛋白样品也不要反复使用,下次应使用其它已分装、未解冻过的样品; 6.电泳后的步骤很简单,液体别配错,照着方法做就可以了。 如果你曾做过Western blot,在这里恭喜你了,只要注意几个小细节,明胶酶谱对你非常简单。 另外我司好提供各类实验代测服务,包括WB实验代测,免疫组化实验代测,放免实验代测,生化实验代测等到,上海和南京地区的客户可以提供免费上门取样服务。其他地区的客户,样本用泡沫箱子包好,放干冰或者冰袋寄送给我们。代测时间根据实验内容而定,通常为5到15个工作.提供原始数据,分析数据, 实验操作步骤以及实验所用仪器。 明胶酶谱试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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细胞传代操作步骤?
细胞传代操作步骤 一、 贴壁细胞传代(以一个T25瓶为例) 1、 吸出原培养液; 2、 加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃; 3、 加入1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞,放入培养箱消化; 4、 消化时间跟据细胞特性有所不同,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显分离变圆,侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化,全程不要拍打培养瓶; 5、 加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱落并在液体里反复吹打使细胞,使之尽量呈单颗细胞的悬浮液,这时可以在显微镜看下; 6、 收集细胞悬液离心,1200rpm(约250g) 3分钟,离心完吸出上清丢弃。 7、 加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按需接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。 8、 检查培养箱二氧化碳,温度和水盘。 二、 悬浮细胞传代(以一个T25瓶为例) 1、 轻轻吹散悬浮细胞,部分贴壁松散的悬浮细胞可直接吹打培养瓶底部使细胞悬浮,收集细胞悬液到无菌离心管中,离心1200rpm(约250g) 3分钟,离心完毕吸出上清丢弃; 2、 加入适量新鲜培养基重悬细胞,按比例接种至培养瓶(接种比例按实际情况,不确定可计数后再接种); 3、 常规细胞推荐以3~5×105cells/ml传代,长到2×106cells/ml传出; 4、 建议刚开始几代计数后传代,后面可以根据经验按比例传代。 三、 半贴壁半悬浮细胞传代(以一个T25瓶为例) 1、 培养液(含悬浮的细胞):用移液器吸出培养液转移到无菌离心管中; 2、 贴壁部分:用1ml PBS洗细胞,吸出PBS放入到第1步装有培养液的离心管中收集(不要直接丢弃,里面有细胞); 3、 培养瓶加入胰酶1ml,放入培养箱静置消化; 4、 消化时间跟据细胞特性有所不同,显微镜下看到细胞明显收缩变圆,侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化,全程不要拍打培养瓶; 5、 用3ml含血清的培养基终止消化,将消化下来的细胞悬液吹散细胞后收集到第1步的离心管; 6、 将离心管在1200rpm(约250g) 3min离心,离心完毕弃掉上清,加入新的培养基重悬,按实际情况分瓶,放入培养箱培养。 温馨提示: 1、 每丢弃一个液体前都要想一下里面有没有可能有细胞,避免丢失细胞。 2、 细胞种类、细胞密度、细胞状态、甚至胰酶的品牌,均影响到细胞的消化时间,所以消化的时候不要只看时间,以显微镜下细胞的状态来确定消化终点,部分难消化的细胞消化时间甚至可以长达15分钟。 3、 细胞的传代比例通常说的是等体积的容器,不同容器需要换算;例如:一个T25培养瓶的细胞传到一个10cm培养皿里面,虽然是1传1,但是比例可不是1:1;T25瓶底面积25cm2,10cm培养皿底面积约为55cm2(10cm的培养皿指的是培养皿的外径,而培养皿的内径约为8.4cm,故根据内径可求出其底面积为55cm2),所以实际传代比例为1:2.2。 4、 在有关离心机的实验中,标准的离心条件应该是用RCF(relative centnifugal fieldt)来衡量,而在实际大家实验过程中,往往习惯用rmp即每分钟转速来表示;RCF即表示相对离心场,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示;RCF=1.119×10-5×(rpm)2×r(其中r表示离心机转轴中心与离心管中心的距离,单位为cm);所以每个实验室离心机转速设置是不一样的,常规建议1200rpm 大约250g。 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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猪端粒酶(TE)ELISA检测试剂盒您了解吗?
猪端粒酶(TE)ELISA检测试剂盒您了解吗? 产品名称:猪端粒酶(TE)elisa试剂盒 英文名称:Procine TE ELISA Kit 主要成分:酶标板,试剂,标准品等 产品性状:48T/96T,盒装液体 保存条件:2-8℃低温保存 保质期:六个月 样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。 实验仪器:酶标仪、恒温箱、移液器、烧杯、自动洗板机、离心机。 检测方法:酶联免疫吸附法 仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值 研究领域:炎症研究、神经生物学、新陈代谢、信号通路、免疫学、传染病、其他研究。 实验前:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用。 特别说明:本Elisa试剂盒仅供科研实验,不得用于其他用途;使用前仔细阅读ELISA试剂盒说明书。 样品的处理(是否溶血)、孵育时间和温度、加入终止液后的反应条件、洗板条件、加样手法、抗体的纯度、抗体浓度搭配等等,总之和Western Blot不同,ELISA作为定量方法有时候确实是太过敏感,而且本身方法也算有些复杂,各中实验条件的略微改变都可能影响-终的实验结果。所以操作过程中,必须得严格按照产品说明书进行,以免浪费时间和经费,造成不必要的损失。 实验注明 1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。 2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,*个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。 3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。 4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。 5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请精-确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。 6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。 计算 以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 猪端粒酶(TE)ELISA检测试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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小鼠ELISA试剂盒操作及保存方法是?
小鼠ELISA试剂盒操作及保存方法是? 小鼠ELISA试剂盒操作注意事项 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 小鼠ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 小鼠ELISA试剂盒操作及保存方法是? 古朵既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生 化试剂,标准物质、天然植物提取物及中药标准品,核酸、酶、缓冲剂、显色底物,医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。 品种类超过2万种,广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。
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您知道ELISA实验步骤及注意事项吗?
您知道ELISA实验步骤及注意事项吗? 1、固相载体选择 聚苯乙烯:具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性。 聚氯乙烯:聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值也略高。 良好的ELISA板应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间、同一板各孔之间性能相近。 2、包被 ①板孔的选择:ELISA级别的微孔板 ②抗体选择:选择支持ELISA实验的抗体,根据推荐浓度稀释或摸索适浓度 ③包被缓冲液:pH9.6碳酸盐缓冲液或pH7.2磷酸盐缓冲液 ④包被温度:2-8 ℃过夜包被或室温(37℃)包被2h ⑤包被浓度:包被浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化。一般包被浓度为10ug/ml-20ug/ml。 3、封闭 ①包被之后一定要立即封闭(封闭非特异性抗体) ②选择效果较好的封闭剂(细胞培养级BSA、Tween等) 4、加样及孵育 ①加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。 ②孵育的时间及温度参考试剂盒说明书。如有条件,建议加样孵育时使用shaker震荡仪,推荐轨道直径3mm,转速在500±50rpm; ③检测抗体、酶标物的稀释比例、孵育温度、孵育时间严格根据说明书提示; ④洗板对于ELISA来说,是极其关键的一步,保证ELISA的特异性 ⑤封板膜一定要一次一换,切勿二次甚至多次使用,以防交叉污染 5、显色和终止 ①使用前需检查,底物在加入96孔板之前应为无色透明 ②显色底物需现配现用,避免污染 ③孵育时间,说明书上为参考范围,具体需要根据实验条件自行摸索。可参考标曲浓度大孔的颜色,变为蓝色较明显时即可 您知道ELISA实验步骤及注意事项吗? 古朵既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生 化试剂,标准物质、天然植物提取物及中药标准品,核酸、酶、缓冲剂、显色底物,医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。 品种类超过2万种,广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。
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胰酪大豆胨琼脂培养基您了解吗?
标签:胰酪大豆胨琼脂 古朵生物 培养基 产品名称: 胰酪大豆胨琼脂培养基 (大豆酪蛋白琼脂培养基) 英文名称:Soybean Casein Digest Agar (Casein Soya Bean Digest Agar ) 其它叫法:TSA培养基 产品编号与包装规格: 产品编号产品类型包装规格 028074干粉250g/瓶 产品用途:用于药品中需氧菌总数计数,以及医药工业洁净室无菌程度的监测及消毒剂效果测试。(CP、USP、EP、GB)。 检验原理:胰蛋白胨、植物蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是凝固剂。 胰酪大豆胨琼脂培养基 配方成分: 配方(每升)含量 胰酪胨(酪蛋白胰酶消化物)15.0 g 大豆木瓜蛋白酶水解物(大豆粉木瓜蛋白酶消化物)5.0 g 氯化钠5.0 g 琼脂15.0 g 终pH 7.3±0.2 使用方法:称取本品40g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压灭菌15min。 质量控制:下列质控菌株接种待测试培养基,结果如下: 指标质控菌株及编号培养条件标准值特征性反应 生长率金黄色-葡萄球菌CMCC(B)2600330~35℃,18~24hPR≥0.8淡黄色菌落 铜绿假单胞菌CMCC(B)10104淡黄绿色菌落 枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501灰白色菌落 大肠埃希氏菌CMCC(B)44102灰白色菌落 乙型副伤寒沙门氏CMCC(B)50094灰白色菌落 白色念珠菌CMCC(F)9800130~35℃,48hPR≥0.7乳白色菌落 黑曲霉CMCC(F)9800330~35℃,3~5dPR≥0.7白色菌丝,黑色孢子 储存条件与保质期:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;贮存期三年。 注意事项: 1、称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。 2、干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。贮存于避光、干燥处。未开封产品保质期三年。开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。 废物处理:检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。 对于 胰酪大豆胨琼脂培养基 您知道多少?上海古朵生物有限公司专业供应各种生物试剂、生化试剂,单抗多抗抗体,各种二抗,标 记抗体,抗体抗原,蛋白多肽产品,Elisa酶联免疫试剂盒,各种细胞株、细胞系,各种 动物血清,金标试剂盒,放免试剂盒,培养基,毒素 的产品, 实时价格和产品详细说明。
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无血清培养基一些基本配方您知道吗?
无血清培养基一些基本配方您知道吗? 经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免病毒污染造成的危害。 无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却不适合,如观察一种生长因子对某种细胞的作用,这时需要排除其他生长因子的干扰作用。而血清中可能含有各种生长因子;又如需要测定某种细胞在培养过程中分泌某种物质的能力;或者要大规模的培养某种细胞,以获得它们的分泌产物。因此研制出无血清培养基一直是生物科学工作者努力的目标。 无血清培养基 的基本配方为基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式生长。 添加组分包括以下几大类物质: (1)促贴壁物质:许多细胞必须贴壁才能生长,这种情况下无血清培养基中一定要添加促贴壁和扩展因子,一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。 (2)促生长因子及激素:针对不同细胞添加不同的生长因子。激素也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,有些激素是许多细胞必不可少的,如胰岛素。 (3)酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中必不可少须含酶抑制剂,以终止酶的消化作用,达到保护细胞的目的。zui常用的是大豆胰酶;抑制剂。 (4)结合蛋白和转运蛋白:常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加比较大,可增加培养基的粘度,保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。 (5)微量元素:硒是zui常见的。 无血清培养基 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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植物中脂氧合酶(LOX)试剂盒的测定原理是什么?
植物中脂氧合酶(LOX)试剂盒的测定原理是什么? 测定意义: LOX 广泛存在于动植物组织中,催化不饱和脂肪酸氧化反应,导致膜脂过氧化。在生物体 的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。 测定原理: LOX 催化亚油酸氧化,氧化产物在 280nm 处有特征吸收峰;测定 280nm 吸光度增加速率, 来计算 LOX 活性。 自备仪器和用品: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、可调 式移液枪和蒸馏水。 试剂组成和配制: 试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。 试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。 试剂三:粉剂×1 支,4℃保存。 粗酶液提取: 按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心 20min,取上清置冰上待测。 测定: 1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长到 280 nm,蒸馏水调零。 2. 在试剂三中加入 10mL 试剂二(振荡混匀 1min),在 30℃水浴中预热 10 min 以上。用不 完的试剂 4℃保存。 3. 对照管:依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 样本和 180μL 试剂二,30℃反应 30min 后,记录 A 对照。 4. 测定管:依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 样本和 180μL 试剂三,30℃反应 30min 后,记录 A 测定。 5. ΔA=A 测定-A 对照 LOX 活性计算: (1)按照蛋白浓度计算 活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化 0.01 个单位为 1 个酶活单位。 LOX (U/mg prot) =ΔA×V 反总÷(Cpr×V 样)÷T×100 = 33.33×ΔA÷Cpr (2)按照样本质量计算 活性单位定义:25℃中每克组织每分钟催化吸光值变化 0.01 个单位为 1 个酶活单位。 LOX (U/g 鲜重) =ΔA×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷T×100 = 33.33×ΔA÷W Cpr:上清液蛋白浓度,mg/mL 需另外测定,建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒; V 反总:反应体系总体积,200μL=0.2mL;V 样:加入反应体系中上清液体积,20μL=0.02mL; W :样品质量,g;V 样总:上清液总体积,1mL;T:反应时间,30min。 植物中脂氧合酶(LOX)试剂盒的测定原理 植物中脂氧合酶(LOX)试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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实验应该选择原代细胞还是细胞株?区别在哪?
实验应该选择原代细胞还是细胞株?区别在哪? 原代细胞(primary cell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。 细胞系(cell line)是原代细胞经shou次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。 大多数细胞系已经经过了数十年的培养,虽然它们还能很好的适应二维培养环境,但这些细胞系通常在遗传学和表型上与其起源组织起源细胞不同,甚至形态有改变。 然而,原代细胞不存在这些问题,他们通常是直接从组织中分离的、具有有限寿命和有限增值能力的细胞,因此原代细胞拥有正常细胞的形态,并且能够体现出该细胞在生物体内所应该具备的标记和功能。例如内皮细胞系常缺乏各种功能性标志蛋白的表达,而原代内皮细胞具有这些关键特征。 与细胞系相反,原代细胞是非常敏感的细胞,需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长,需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如,内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别,因此需要特制的内皮细胞培养基。 而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分,以支持细胞的生长。但对于原代细胞,高血清水平可导致细胞分化,或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。 此外,添加血清也受到成本上升及不同批次间差异性的困扰。配制具有很少或没有血清的特殊培养基则可以避免这些问题,并且geng加有利于促进特定类型原代细胞的生长。而且,其他一些实践,例如在geng多的生理学相关底物上接种原代细胞而不是使用合成聚合物,可以显着的促进细胞贴壁、增殖及保持纯度。 尽管原代细胞可能geng难培养,但是使用原代细胞而获得的数据具有geng好的相关性,并且geng能反映体内环境。 原代细胞:从体内直接分离的细胞。功能、代谢、形态类似体内细胞的特点,因此原代细胞适用于分析单个细胞形态、代谢、功能。原代细胞的缺点是:细胞均一性差,因为从特定组织取下来的原代细胞可能处于不同的发育时期。增殖能力差、培养时间受限、转染效率低。 细胞株:原代细胞经过长期培养和筛选后,功能、代谢、形态趋于均一化的无限增殖细胞。适用于整体水平实验。优点是:容易培养、好感染、干扰因素少、便于同步化、实验好操作。缺点是:与整体差别大、可能丧失原代细胞的特性,细胞株在长期传代过程中遗传物质发生变异。所以同一个学名的细胞株,有可能有完全不同的形态、代谢、功能表现。不同代数的细胞株,性质也可能完全不同。 原代细胞由于转染效率低这个问题,应用受到了限制。自从腺病毒诞生后,因为其超强的感染能力,克服了原代细胞难感染的问题,使得原代细胞的使用变得geng加简单。由于细胞实验后,很多时候需要做到动物体内,由于原代细胞有体内细胞的特点,为了细胞实验和动物体内实验的结果geng加趋向一致性,因此用原代细胞来进行细胞实验geng值得考 细胞上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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琼脂糖凝胶电泳缓冲液配制有哪几点?
琼脂糖凝胶电泳缓冲液配制有哪几点? 琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力。在琼脂糖凝胶电泳缓冲液又几种适用于天然双链DNA的电泳。 琼脂糖凝胶电泳缓冲液配置 TBE通常作为5×或10×的贮存液配制和贮存。这种浓的贮存液pH应为8.3左右,它在应用前稀释,并用同一种贮存液制备凝胶溶液和琼脂糖凝胶电泳缓冲液。 上述三种电泳缓冲液都比较好用,三者中TAE的缓冲容量低,长时间电泳会被消耗。此时的凝胶的阳性一侧将发生酸性化,凝胶中向阳极迁移的溴酚蓝的颜色呈蓝紫色到黄色的变化,所以需要定期换缓冲液。 琼脂糖凝胶电泳缓冲液配方注意事项 a.TBE浓储存液长时间存放后会形成沉淀物,为避免这一问题,可在室温条件下用玻璃瓶保存5X溶液,出现沉淀后则予以废弃。以往都以lX作为使用液(即1:5稀释浓储存液)进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5X的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖凝胶电泳都以1:1。 稀释的储存液作为使用液。进行聚丙烯酰胺凝胶电泳使用的lXTBE,是琼脂糖凝胶电泳时使用液浓度的2倍。聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小,通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用1XTBE以提供足够的缓冲容量 b.碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液应现用现配 在配制琼脂糖凝胶电泳缓冲液时,不论哪一种都需要加适量的EDTA,以除去2价金属离子。另外,硼酸与琼脂糖易形成复合物,使凝胶带负电荷,可能会吸附带正电荷的物质。 琼脂糖凝胶电泳缓冲液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。上海古朵生物公司中“古朵”取自good的音译,寓意是质量好,品牌好,服务好!欢迎新老客户洽谈!
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简介
职业:上海古朵生物科技有限公司 - 销售经理
学校: -
地区:上海市
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上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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企业简介
企业名称:上海古朵生物科技有限公司
企业性质:贸易商,代理商,
主营业务:质粒载体定制,ELISA检测试剂盒,细胞培养,抗体抗原,蛋白纯化,染色液溶液,标准品对照品,微生物培...
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上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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