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琼脂和琼脂糖简介及用途您知道吗?
琼脂和琼脂糖简介及用途您知道吗? 琼脂和琼脂糖产品用途简介琼脂(Agar),又名琼胶、菜燕、冻粉,是一类从石花菜及其它红藻类(Rhodophyceae)植物提取出来的藻胶(phycocottoid),在我国及日本已有三百多年(1658年)的历史。琼脂糖Agarose,缩写为AG,是琼脂中不带电荷的中性组成成份,也译为琼胶素或琼胶糖。 一、性状条状琼脂为类白色或淡黄色半透明细长条状;粉状琼脂为白色或淡黄色粉末。琼脂糖一般为白色粉末。在沸水中极易分解成溶胶;在冷水中不溶,但能吸水膨胀成胶块状,溶胶液呈现中性反应。 二、用途:琼脂、琼脂糖因为有特殊的胶凝性质,尤其有显著的稳固性、滞度和滞后性,并且易吸收水分,有特殊的稳定效应;已经广泛使用于食用、医药、化工、纺织、国防等领域,据不完全统计,琼脂、琼脂糖的用途已有1000多种,被上称为 新奇的东亚产品 。在食品工业中可用于生产:水晶软糖、定型软糖、水产品、肉类罐头、果汁饮料、果肉饮料、米酒饮料、乳品饮料、精品、乳品蛋糕。 琼脂的用途: ⑴ 学研究用 ●测定土壤品的PH时,以琼脂与氯化钾作电桥,应用迅速,结果正确而方便。 ●琼脂并可用于电化学和扩散的研究,并可以以琼脂研究凝胶和溶胶的性质而广泛应用在军事科学上。 ●在植物学研究中,5%的琼脂溶液可以封藏小块的植物为切片之用。植物生理学的标准燕麦试验法,即以一小块琼脂作为燕麦芽鞘的培养载体。琼脂还用于植物组织培养, 在组培苗培育中发挥重大作用. ●琼脂被广泛用于细菌培养基。酿造、医药、水产及许多生物上的研究中,都用琼脂作为细菌及其他生物的培养基。 ⑵ 食品用:直接食用:夏季将琼脂、酱油、醋或糖、香料等调味剂混合而食,是防暑降温、缓通肠胃的食品。许多酒家把作为燕窝鱼翅的代用品(故琼脂又称菜燕)。琼脂在食品工业中,具有增量剂、增稠剂、乳化剂、胶凝剂、稳定剂、赋形剂、助悬剂、水分保持剂的好功效。在制糖中用琼脂起凝固作用;在作冰淇淋中,起着稳定剂的作用,这是其它材料所无法取代的。 琼脂 琼脂糖 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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鸡免疫球蛋白M试剂盒检测原理及注意事项您知道吗?
鸡免疫球蛋白M试剂盒检测原理及注意事项您知道吗? 【检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被鸡免疫球蛋白M(IgM)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成,颜色的深浅与样品中鸡免疫球蛋白M(IgM)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中鸡免疫球蛋白M(IgM)含量。 【注意事项】 1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。 2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。 3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。 4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。 5、本试剂盒定量范围为25-800μg/mL,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(25-800μg/mL范围内),乘以总稀释倍数即为样本zui终浓度。 6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。 7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。 8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。 9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。 鸡免疫球蛋白M试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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牛血清的主要成分有哪些?
牛血清的主要成分有哪些? 牛血清是一种成分复杂的混合物,其大部分成分已为人所知,但还有一部分仍不清楚,而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。今天古朵生物技术小编介绍一下牛血清主要成分。 1、蛋白质类 包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)、纤维粘连素(促进细胞附着生长)。 2、多肽类 主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用。 3、激素类 激素对细胞的作用是多方面的。包括: (1)胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关。 (2)类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用。 (3)促生长激素:促进细胞增殖的效应。 4、氢化可的松 血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。 5、其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培养基中这些成分的作用并不明显,与蛋白相结合的微量元素对细胞生长起促进作用。 牛血清上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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如何提高ELISA的重现性?
如何提高ELISA的重现性? 免疫检测法的性表现为单次实验孔间(批内)的重复性和多次实验之间(批间)的重复性。CV值高则表明度低,那么古朵生物技术小编就和跟你们分享一下如何提高ELISA的重现性。 移液技术 1. 移液时,枪头应对准孔中央,避免接触孔壁及底部。 2. 移液后轻轻晃动混匀试剂。 3. 如果您的样品具有黏性,请预先润洗枪头以消除表面张力的影响。吸液时等待片刻使体积平衡后再取出。 4. 移液不充分或移液体积不均,说明移液器需要校正。必要时请检查移液器并重新校正。 5. 加样时,不同的试剂标准品和样本间都要确保换枪头,避免交叉污染。 6. 确保使用合适的枪头。不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积。 洗涤技术 1. 如果使用自动洗板机或多通道移液器,请确保进出口能正常运作。 2. 后一次洗涤后,翻转酶标板倒出多余的洗涤液,并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低度。不能让孔内液体自然风干,需立即进行下一步操作。 3. 按照说明书,添加足量的洗涤液至孔内,并保证洗涤完全。 4. 由于洗涤液不是通用的,当试剂盒内的洗涤液用完时,请不要使用其他试剂盒中的洗涤液。如有需要,可联系技术支持寻求帮助。 5. 不要减少或增加洗涤时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤。 6. 按照说明书上推荐的洗涤次数清洗,随意改变洗涤的次数会影响实验的性。 ELISA试剂上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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ELISA实验洗板的方法?
ELISA实验洗板的方法? 在做ELISA实验时,洗板有两种方法:手工法洗板和洗板机洗板。二者没有本质的差别,只要操作合乎要求,均能得到正确、可靠的结果。 手工洗板是每次反应温育后,将反应液吸出或甩干,然后在板孔中加满洗液,放置2~3 min后,将洗液吸出或甩干再在吸水纸上拍干。重复上述洗涤步骤3~4次,后在吸水纸上拍干即可。手工洗板人为因素比较大,实验人员必须经验丰富,洗涤次数要足够,冲击力又不要太大,加入的洗液量以刚满反应孔为限,防止孔口内有游离酶未能洗净,同时防止孔与孔之间液体交叉。洗涤结束后扣干亦非常重要,否则易造成假阳性。每次洗完板后,在吸水纸上轻轻拍干,拍板时要垂直,避免交叉感染。用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;吸水纸要一次性使用,应使用不易脱落碎屑的吸水纸为宜。酶结合物不耐干燥,特别在较高的温度下易失活,所以拍干的反应板应尽量缩短在空气中暴露的时间,时间越长,吸光度值越低。 洗板机洗板是将手工操作改由洗板机进行,人为因素少,速度快,条件恒定,但是使用洗板机洗板的一个特点是,每次洗板后不能拍干,故有较多的液体残留,需增加洗板次数来减少这种误差。洗板机洗板次数越少,假阳性越高,本实验中,洗板1次,假阳性率高达90%;洗板2次,假阳性率为38%;洗板3次,假阳性率为2%;洗板4~5次,未出现假阳性。洗板次数并非越多越好,太多不但浪费人力、物力,并且也会导致假阴性结果,所以一般试剂盒要求洗板4~5次即可。洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出。为了洗涤效果较好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1~2次,能达到理想的洗涤效果。 ELISA试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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血清样本和血浆样本的区别你知道吗?
血清样本和血浆样本的区别你知道吗? 一、血清和血浆有以下三点区别: 1.血清中没有纤维蛋白原 2.血清中无参与凝血中的血浆蛋白 3.血浆无一些凝血进程中血小板开释的物质 二、在药代研究中两者各有优缺点: 1.血浆中含有抗凝物质(肝素或EDTA),可能会搅扰化合物的检测(结合等),血清则无。 2.血浆中蛋白稍多,可能会在SPE中发生比方堵柱子等状况,搅扰样本制备进程(这一点其实不同不明显)。 3.血浆制备快速,直接低温或常温离心后即可别离,血清制备耗时较长。这一点对药代试验影响较大,因为给药后4小时内一般取血点都较为密布。 4.血清的凝血进程可能会因为与药发生吸附作用,然后减少血清的含量,并且有可能造成不平行。 三、血清血浆的收集方法: 1.血清: 室温血液自然凝固 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。细心收集上清。保存进程中如有沉积构成,应再次离心。 2.血浆: 应根据标本的要求挑选 EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心 20 分 钟左右(2000-3000 转/分)。细心收集上清。保存进程中如有沉积构成,应再次离心。 所以,我们在判定目标检测可以挑选适用血清或者血浆,比方,检测凝血功能一般挑选血浆,免疫类目标适用于血清。关于其他类型目标包括细胞因子的改变,都可以挑选。血清和血浆都有各自的长处和缺点。 ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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γ谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(比色法)测定原理?
γ谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(比色法)测定原理? 测定原理: 在ATP和Mg2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同时ATP去磷酸化产生无机磷分子,通过测定无机磷增加速率,即可计算出GCL活性。 自备仪器和用品: 冷冻离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、浓硫酸和蒸馏水。 试剂组成和配制: 试剂一:液体105mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加6 mL蒸馏水充分震荡溶解。 试剂三:粉剂×1管,4℃保存。临用前加入蒸馏水1.5 mL充分震荡溶解。 试剂四:液体7mL×1瓶,室温保存。 试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入12 mL蒸馏水,充分震荡溶解后,缓缓加入400μL浓硫酸(自备),边加边搅拌。 粗酶液提取: 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。 血清等液体:直接测定。 GCL测定操作: 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到660nm,蒸馏水调零。 空白管:取1.5mLEp管,依次加入试剂一48μL、试剂二52μL、试剂三12μL和蒸馏水24μL,混匀后盖紧,37℃水浴准确反应15 min;再加入试剂四60μL,混匀后,室温(25℃左右)8000g,离心10 min,取上清100μL,加入试剂五100μL,混匀后盖紧,45℃水浴10min,冷却后测定660nm处光吸收,记为A空白管。 测定管:取1.5mLEp管,依次加入试剂一48μL、试剂二52μL、试剂三12μL和上清液24μL,混匀后盖紧,37℃水浴准确反应15 min;再加入试剂四60μL,混匀后,室温(25℃左右)8000g,离心10 min,取上清100μL,加入试剂五100μL,混匀后盖紧,45℃水浴10min,冷却后测定660nm处光吸收,记为A测定管。 注意:空白管只需要测定一次。 γ谷氨酰半胱氨酸连接酶试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
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免疫荧光染色事项注意您知道吗?
免疫荧光染色事项注意您知道吗? 从事免疫荧光染色该注意哪些方面呢?免疫荧光染色属于常规病理染色,从事这类染色该注意以下几点: (1) 古朵生物提醒:由于荧光容易淬灭,一般仅能维持几个小时,因此,荧光二抗应避光保存,即从加入荧光二抗以后的步骤中都要尽量避光操作。封片后应尽早照相,目前有市售的荧光增强剂,可使荧光在4℃保存1-2周仍不淬灭。 (2) 免疫荧光染色常用的荧光素有以下几种,绿色荧光:FITC、 Alexa Fluor 488和GFP;红色荧光:TRITC、Cy3、Alexa Fluor 568&594和MitoTrackerRed;蓝色荧光:Hoechst、DAPI;黄色荧光:YFP、Fluo-3和Rhoda-minel23等。 (3)不同的荧光素激发的波长不同,因此,选用滤光片时要注意。一般紫外线的激发波长为334-365nm,蓝光的激发波长为435-490nm,绿光的激发波长为546nm左右。 (4) 荧光显微镜应提前至少15 min打开汞灯预热。关闭30min后方可再开启。 (5)免疫荧光染色的组织要求很高,载玻片及盖玻片要干净无杂质。进行荧光染色时,需注意染液的pH、浓度和染色温度,还要避免对荧光有熄灭作用的物质的接触。 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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解冻血清出现沉淀现象的原因您知道吗?
解冻血清出现沉淀现象的原因您知道吗? 血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。 一些实验新手在刚刚接触实验的时候,将购回的血清产品解冻后发现有沉淀现象,从而怀疑产品质量问题。其实这是没有根据的,在解冻血清的时候,按照建议的逐步解冻法,若血清解冻时改变的温度太大,实验显示非常容易产生沉淀物。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,在没有必要的情况下,可以无须做此步骤。 解冻血清出现沉淀现象是什么原因呢?如何避免?上海古朵生物指出:将血清在37℃放置太久会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。 ① 解冻时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 ② 推荐在-20℃储存,避免反复冻融。 血清上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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苏木素伊红(HE)染色液的染色原理您知道吗?
苏木素伊红(HE)染色液的染色原理 苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色,简称HE 染色,是病理学常规制片中基本的染色方法,应用机器广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。苏木素伊红染色试剂盒中,苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成,不含氧.化.汞、甲醇等有害物质,对细胞核染色。其特点:长期保存,不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。 染色原理: 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH 值密切相关。当染液的pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE 染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,故分化之后,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。 注意事项: 1、切片脱蜡应尽量干净。 2、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇应经常换新液。 3、1%的盐酸乙醇分化液的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和1%的盐酸乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。 4、yi醚-乙醇混合固定液是由yi醚和95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。 5、冷冻切片染色时间尽量要短。 6、促蓝液常使用0.2~1%氨水水溶液或Scoot 促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液。 7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 8、使用场所应通风,并远离火源。 苏木素伊红(HE)染色液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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苏木素伊红(HE)染色液的染色原理?
苏木素伊红(HE)染色液的染色原理 苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色,简称HE 染色,是病理学常规制片中基本的染色方法,应用机器广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。苏木素伊红染色试剂盒中,苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成,不含氧.化.汞、甲醇等有害物质,对细胞核染色。其特点:长期保存,不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。 染色原理: 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH 值密切相关。当染液的pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE 染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,故分化之后,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。 注意事项: 1、切片脱蜡应尽量干净。 2、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇应经常换新液。 3、1%的盐酸乙醇分化液的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和1%的盐酸乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。 4、yi醚-乙醇混合固定液是由yi醚和95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。 5、冷冻切片染色时间尽量要短。 6、促蓝液常使用0.2~1%氨水水溶液或Scoot 促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液。 7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 8、使用场所应通风,并远离火源。 苏木素伊红(HE)染色液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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免疫荧光抗体的选择小技巧?
免疫荧光抗体的选择小技巧 一、根据样本选择一抗: 一抗选择需满足IF应用,一抗种属应尽量选择与检测样本不同来源,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应。 举例:检测小鼠样本,则尽量避免选择小鼠或大鼠源的一抗(如果选了同种属一抗建议加个同型对照),好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(荧光素、生物素等)的抗兔IgG。 二、根据一抗种属选择二抗: 根据一抗类型与亚型:如果一抗是IgM,就选择抗IgM二抗。 二抗的类型:细胞或组织表达Fc受体较高,全长二抗的Fc端容易与Fc受体结合,选择F(ab)2片段抗体避免非特异性结合。 二抗的纯化方式:经交叉吸附处理的二抗在纯化后再次通过固定了其他种属的血清或抗体的纯化柱,降低种属间交叉反应,在多色分析具有突出的优势。 荧光基团:选择光谱不重叠且稳定明亮的荧光基团;颜色搭配时也要适当考虑强弱搭配。 3大技巧: 对于多色分析,原则上一抗尽量来源于不同种属,且荧光标记二抗与一抗的种属要匹配,避免二抗发生交叉反应;两种抗体荧光素的光谱重叠效应应小。 实验前好先验证单标对特定组织或细胞是否有效,再进行多标实验。 如果采用TSA技术,则不需要考虑一抗种属来源问题 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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七色多重免疫荧光经常会遇到的技术问题?
七色多重免疫荧光经常会遇到的技术问题 FAQ(问题): 1. 问:为什么会串色? 答:串色与多种因素有关系:A 可能与成像设备滤光片带宽有关系,尽量选用窄波长带宽的滤光片;B 可能与上一轮抗体未被完全洗脱关系,对于一些亲和力比较高的抗体比如CK等,抗体洗脱条件需要延长(提高洗脱温度 时间等);C 可能与信号不平衡有关系,比如相邻两个通道染料,一个强度过高,一个过低,导致强的信号发生外溢;D其他可能存在的原因,比如抗体弄混,下一轮抗体忘记洗脱/修复等。 2. 问:TYR-xxxPlus荧光染料与TSA buffer稀释比例怎样优化? 答:本试剂盒灵敏度比较高,是常规TSA试剂盒的10-50倍,注意信号不要过强;信号过强 则降低染料浓度/反应时间/一抗浓度,信号过低 提高染料浓度/反应时间/一抗浓度;本试剂盒的特点,浓度越高,将成指数倍增强信号;1:50能获得强信号,1:500相当于常规TSA信号。 3. 问:抗原修复方式/抗体洗脱方式怎么选择? 答:建议轮抗原修复9.0 EDTA,95度15-25min;第二轮或以上抗体洗脱/抗原修复,建议柠檬酸6.0 95度25min-40min,针对一些容易掉片的组织,抗体洗脱可以采用抗体洗脱液(我司有卖:mIHC专用抗体洗脱液),抗体洗脱液时间过长可能会导致抗原识别降低/dapi核弱染,注意把控抗体洗脱液时间(一般室温或者37度5-15min,1-2次能到到比较理想的结果)。 4. 问:染料是否需要避光? 答:本试剂盒荧光染料抗淬灭性强,全程无需日光灯下避光,使用过程中也无需在暗环境中操作,但不能在太阳光下照射。 5. 问:做多标时,指标/抗体顺序如何选择? 答:难以洗脱的抗体,摆在后一轮,不然容易串色,比较难做的指标放在前面几轮做(比如foxp3),轮通常做适合EDTA 9.0修复的指标;根据我司经验,轮通常采用EDTA 9.0/高压6.0 第二轮及其以上通常采用6.0,多抗建议6.0 。 6. 问:为什么有时候有非特异性或者非特异是怎么产生的以及怎样改善? 答:非特异的产生有几种可能,A:抗体是多克隆的,容易产生非特异,可以换用单克隆抗体或者降低浓度以及修复强度来改善;B:信号放大过强,可以降低染液反应时间或者浓度;C:一抗浓度过高或者修复过度,采用比较低的稀释抗体比例,或降低修复强度(温度或者时间或者修复液PH)。 7. 问:做石蜡切片mIHC,抗体应该怎样选择? 答:尽量选用单克隆抗体,抗体应用选用IHC /mIHC/ IHC-P,优先选用经过敲除验证的抗体等。 8. 问:本试剂盒对于其他进口/国产试剂盒优势在哪里? 答:A:超高的性价比,其他品牌试剂盒动辄过万,我司试剂盒价格在2k-1w之间;B 稳定性好:即使试剂盒不小心被放在常温,也能在一个月的放置后,可以继续使用 以及检测信号灵敏度无差异,茹创生物开发的此款试剂盒,采用了新配方,有各种保护剂 防腐剂 H2O2稳定剂等成分,极大提高了试剂盒稳定性;C 超高灵敏度:高灵敏度可以达到市场其他公司的10-50倍。 细胞爬片 冰冻切片 骨组织 TSA多色免疫荧光上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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你知道ELISA试剂盒是如何进行计算的吗?
你知道ELISA试剂盒是如何进行计算的吗? ELISA试剂盒 用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。 它的实验原理: ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。 ELISA试剂盒 的计算: 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 它的注意事项: 1、ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4、请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6、底物请避光保存。 7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。 8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9、本试剂不同批号组分不得混用。 10、如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 ELISA 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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小鼠白介素1β (IL-1β)试剂盒操作步骤?
小鼠白介素1β (IL-1β)试剂盒操作步骤? 检测范围: 96T 2.5ng/L-80ng/L 使用目的: 本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素1β (IL-1β)含量。 小鼠白介素1β (IL-1β)试剂盒操作步骤 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 80ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 40ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 20ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 10ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 5ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。 8. 洗涤:操作同5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 小鼠白介素1β 试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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酶联免疫吸附实验的原理以及常用方法?
酶联免疫吸附实验的原理以及常用方法 酶联免疫吸附试验(ELISA)是目前临床实验室检测免疫学指标受欢迎、应用范围广泛的方法之一,广泛应用于乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病以及结核等传染类疾病的诊断及激素的检测,具有灵敏度高、特异性强、快速简便、重复性好、成本低、环保且适合大批量人群筛查等优点。 什么是酶联免疫吸附试验 酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)是一种特殊的试剂分析方法,在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,其试剂易于保存、结果判断较为客观,是目前实验室检测抗原抗体经济、普遍的试验诊断方法。 酶联免疫吸附试验原理 ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来,使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。 酶联免疫吸附试验常用方法 1.直接法(direct ELISA) 将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。 优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。 缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。 2.间接法(indirect ELISA) 此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。 优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它多的免疫反应性。 缺点:交互反应发生的机率较高。 3.双抗体夹心法(sandwich ELISA) 被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取,才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。 优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。 缺点:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。 4.竞争法(competitive ELISA) 样本里的抗原(自由抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竞争相同的抗体,当样品里的自由抗原越多,就可以结合越多的抗体,而固定抗原就只能结合到较少的抗体,反之亦然。经清洗步骤,洗去自由抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较,根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。 优势:可适用比较不纯的样本,而且数据再现性很高。 缺点:整体的敏感性和专一性都较差。 酶联免疫吸附试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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多色免疫荧光也叫做多重免疫组化吗?
多色免疫荧光也叫做多重免疫组化吗? Multiplex IHC,简称mIHC,直译多重免疫组化,也叫多重荧光组化、多色免疫荧光、荧光多色标记等,到底是组化还是荧光?初次接触的人有些懵,下面就要从它的原理给大家解释下,为什么呈现的是荧光图像而同时我们又称之为组化又没错,要想充分明白这个问题,我们从以下几个方面来解释: 1-mIHC的基本原理 mIHC实验是基于使用酪胺-荧光基团检测开发的。其实验步骤使用序列标记策略,每轮标记包含一抗孵育和二抗孵育。随后是酪胺-荧光基团偶联物沉淀。接下来将抗体hrp剥离,或在微波炉或者高温中加热,去除样本中的抗体,所有沉淀的荧光基团,仍与样本共价结合。mIHC的基本原理:内源性过氧化物酶封闭--抗原修复--一抗孵育--hrp二抗--显色(荧光显色沉淀),由此可见,这基本就是免疫组化的经典原理;只不过mIHC重复了组化的两次(双标) 三次(三标)甚至六次(六标七色),后一步再做个负染dapi(类似于组化的苏木素负染)! 2-为什么使用多重而非单染色IHC? 如果您的研究方向是探索不同细胞类型之间的交互作用,或者需要评价多个生物标志物和组织的表达或共定位,可以使用mIHC实验。 3-mIHC实验的抗体使用 使用经过高度验证的抗体,确保得到可靠的结果。通常而言经过IHC-P验证的抗体,同样也能在mIHC中使用,但需要再进行实验步骤优化。 四色多重荧光染色试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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胎牛血清的保存方式有哪些?
胎牛血清的保存方式有哪些? 胎牛血清从上市以来一直备受争议,从厂家,价格,鉴别到产品质量,产品如何正确的保存都是些大问题,今天古朵生物就带领大家一起来学习如何正确的使用和保存血清。 标准血清的鉴别方法: 血清凝固析出的淡黄色透明液体,如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转化成维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。 胎牛血清的作用: 胎牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。 血清保存要点: 1.需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃的低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月,由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻于低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或者玻璃瓶冻裂。 2.热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清,加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。 3.瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。 4.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。 5.血清中的沉淀物,絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”,常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,换另一批号的血清。 6.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量保存/运输:-5°C~-20°C。了解多,欢迎咨询本司业务员! 胎牛血清 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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古朵带您了解ELISA原理?
古朵带您了解ELISA原理? 酶联免疫吸附试验(Enzyme linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)于1971年分别由瑞典学者和荷兰学者报道,开创了运用酶标记免疫技术,进行液体标本中微量物质测定的实验方法。 ELISA基本原理是把抗原或抗体在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面,测定时,将受检样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物,经洗涤去除反应液中其他物质,加入酶反应底物后,在酶的催化下变为有色物质,后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中被测物质量。 ELISA方法具有高度敏感性和特异性,易于自动化,应用非常广泛,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可使用,ELISA质量保证是一个复杂的过程,许多重要环节都影响到检测结果。大分子物质常用的测定模式有:双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM捕获法等,小分子物质常用竞争法,竞争法由于存在游离抗原和酶标抗原在操作时差、免疫亲和力、结构改变等方面的差异,影响因素多,加难于控制。 目前免疫学方法在环境监测、食品安全、药物监测、激素监测等领域,获得长足发展,大量的竞争法ELISA试剂盒被开发,质量控制越来越严格。 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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FISH操作中的常见问题及对策?
FISH操作中的常见问题及对策? FISH检测要求使用中性福尔马林(不恰当的pH值会损伤DNA)固定24-48小时。 固定时间不足会导致组织较软,在预处理过程中会丢失部分组织和信号。 固定时间过长导致组织变脆,不利于切片,也会导致大分子交联情况严重,很难进行消化。 福尔马林固定石蜡包埋的组织需要用蛋白酶进行消化以去除多余的组织来暴露细胞。 如果消化不足(酶浓度低、温度不适合、时间太短),镜下会出现云雾状组织覆盖在细胞上,无法观测到暴露的细胞核,从而降低杂交效率并很难选择细胞进行计数,这种情况需要重新制片。 如果消化过度,则细胞核被损伤,失去正常的圆形完整形状,变得支离破碎,甚至像鬼影一样,这种情况只能重新制片。 FISH实验中可能因为各种原因导致高背景 可能原因包括: 1、不适合的探针量 2、不适合的杂交后洗 3、样本中有过多的重复序列 解决方法包括: 1、使用合适的探针量 2、改善杂交后洗环节: a、准备新鲜配制的洗涤液;b、检查洗涤液的pH、c、检查水浴缸的温度(71-73度,一次不超过6片洗涤,每次洗涤后重新升温);d、洗涤时震荡洗涤缸;e、延长洗涤时间(zui长5分钟)。 3、使用DNA阻断剂,如Cot-1 DNA等。 常见的DNA竞争性阻断剂是COT-1 DNA,它适用于阻断人基因组中的Alu和L1家族序列,其效能是鲑精DNA的十倍。当FISH检测出现高背景,且排除预处理和杂交后洗过程中可能出现的问题时,实验者可适当加入1μg COT-1 DNA/10μl探针,以阻断可能引起非特异性结合的重复性序列,从而减少背景的产生。 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。
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简介
职业:上海古朵生物科技有限公司 - 销售经理
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地区:上海市
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上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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企业简介
企业名称:上海古朵生物科技有限公司
企业性质:贸易商,代理商,
主营业务:质粒载体定制,ELISA检测试剂盒,细胞培养,抗体抗原,蛋白纯化,染色液溶液,标准品对照品,微生物培...
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上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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