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上海古朵生物

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细胞培养的基本条件!？细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞，也可以是细胞群。以下是细胞培养的基本条件：一、合适的细胞培养基合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。二、血清目前，大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。三、无菌无毒细胞培养环境无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物质污染，或者自身代谢物质积累，可导致细胞中毒死亡。因此，在体外培养细胞时，必须保持细胞生存环境无菌无毒，及时清除细胞代谢产物。四、恒定的细胞生长温度维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定适宜的温度。五、合适的气体环境气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。查看更多

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一起来为进口标准品做一个分类吧!？近日，有几位购买了我公司进口标准品的客户到了一个分类的问题，对此，上海古朵的技术人员做出了一个分类总结，下面我们一起来看一看吧。 *，我们可以按照它的技术特性来分类： 1、化学成分标准物质，具有确定的化学成分，并用技术上正确的方法对其化学成分准确的计量，用于成分分析仪器的校准和分析方法的评价。 2、物理化学特性标准物质，具有某种良好的物理化学特性，并已经过准确计量，用于物理化学特性计量器具的刻度校准或计量方法的评价。 3、工程技术特性标准物质，具有某种良好的技术特性并经准确计量，用于工程技术参数和特性计量器具的校准、计量方法的评价及材料或产品技术参数的比较计量。第二，还可以按照学科或专业分类：可分为地质学、物理化学等十几类，Iso采用这种方法汇编了标准物质指南。上海古朵进口标准品提供实验技术指导，您收到产品之后，如果有什么技术方面需要咨询的问题，我们随时可以给您去的。上海古朵欢迎您查看更多

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古朵生物讲述:脱落酸的相关知识？脱落酸是植物五大天然生长调节剂之一，生物学种常用作植物组织培养。脱落酸在衰老的叶片组织、成熟的果实、种子及茎、根部等许多部位形成。水分亏缺可以促进脱落酸的形成。脱落酸的作用： 1.一直与促进生长，外施脱落酸浓度大时抑制茎、下胚轴、根、胚芽鞘或叶片的生长.浓度低时却促进离体黄瓜子叶生根与下胚轴伸长，加速浮萍的繁殖,刺激单性结实种子发育。 2.维持芽与种子休眠，休眠与体内赤霉素与脱落酸的平衡有关。 3.促进果实与叶的脱落。 4.促进气孔关闭。脱落酸可使气孔快速关闭,对植物又无du害，是一种很好的抗蒸腾剂。检验脱落酸浓度的一种生物试法即是将离体叶片表皮漂浮于各种浓度脱落酸溶液表面，在一定范围内，其气孔开闭程度与脱落酸浓度呈反比。 5.影响开花，在长日照条件下,脱落酸可使草莓和黑莓顶芽休眠,促进开花。 6.影响性分化，赤霉素能使da麻的雌株形成雄花,此效应可被脱落酸逆转，但脱落酸不能使雄株形成雌花。脱落酸的注意事项： 1. 脱落酸有顺式和反式两种构型，以及右旋（+）和左旋（-）两种旋光体。天然存在的脱落酸是右旋的。化学合成的脱落酸是左旋和右旋混合体（±）。两种异构体都有生物活性，但研究发现左旋不能促进气孔关闭。另外较低浓度下（1-10μM），（+）-脱落酸活性明显高于（-）-脱落酸。 2.用于细胞实验，溶解后，需用一次性针头滤器过滤除菌。 3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。脱落酸是植物体内产生的一种抑制植物生长发育的倍半萜类的植物激素。脱落酸有调节蒸腾的作用。此外，脱落酸还有抑制营养器官的生长，促进叶片等器官的衰老和棉花幼果的脱落等作用。脱落酸在植物界广泛分布，它抑制种子的萌发，调节芽的休眠，促进离层形成与器官的衰老、脱落。脱落酸的原理：脱落酸分子式是C15H20O4，分子量是264.31，PKa 4.5，难溶于水或苯，易溶于甲醇、丙酮、乙醇、乙酸乙酯或碱性水溶液。它含有一个不对称的碳原子(C-1′)，形成两种光学异构体。天然ABA呈现右旋旋光性，标志为(+)-ABA或(S)-ABA，熔点160℃。人工合成品为外消旋混合物，由(+)-ABA与(-)-ABA(或以(R)-ABA表示)各半组成，熔点190℃。ABA还存在着几何异构体现象，它的侧链上的两个双键都具有顺( Cis)与反(trans)的构型。天然的ABA几乎都是2-顺-4-反型。番茄叶片原来只含痕量2-反型(反-反型)，但于提纯时经光(特别是紫外光)照射，生理活性很低的2-反型经异构化而渐增，直至与2-顺-4-反型成等量的混合物，所以应于漫射光下提取与检测ABA。用脱落酸处理能萌发的种子，可以使之休眠。这种对萌发的抑制作用可以用赤霉素或细胞分裂素处理来抵消或逆转。脱落酸能拮抗赤霉素的代替长日照导致长日植物抽苔开花的作用。它还能使少数短日植物在非诱导周期的条件下开花。反之，脱落酸的几种作用也可用赤霉素抵消。例如使用赤霉素就能克服脱落酸对遗传性高秆玉米的伸长和对种子萌发及马铃薯发芽的抑制作用。此外，脱落酸的作用也与细胞分裂素相反，脱落酸在植物体内既有拮抗赤霉素的作用，也有拮抗细胞分裂素的作用。但是这些拮抗作用非常复杂。例如莴苣种子萌发需要光，赤霉素可以代替光。而脱落酸可以抵消赤霉素的促进萌发的作用，但继续提高赤霉素的浓度却不能克服脱落酸的作用、恢复对萌发的促进。脱落酸在控制核酸和蛋白质合成中起作用。脱落酸抑制大麦粒中α-淀粉酶的合成，并在这一过程中与赤霉素发生拮抗。对酶合成的抑制作用与 RNA合成的抑制剂8-氮鸟嘌呤和6-甲嘌呤所产生的作用类似，表明脱落酸的作用可能是抑制对决定 α－淀粉酶结构的 RNA的合成，或者阻止 RNA结合到有活性的酶单位中去。在蒲公英的叶子中脱落酸抑制RNA的合成，而在品藻中则抑制DNA的合成。脱落酸的配制： ①从嫩棉叶中分离。 ② 以5-(2，6，6-三甲基-1，3-环己二烯基-3-甲基-2，4-戊二烯酸为原料，在苯和乙醇的混合溶液中，以曙红为光敏剂，与氧反应，先生成[2]，再在稀氢氧化钠水溶液中，于100℃下反应，生成，再重结晶精制，可制得脱落酸成品。查看更多

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虾青素制取有那些种类？虾青素，又名虾黄质、龙虾壳色素，是一种类胡萝卜素，也是类胡萝卜素合成的高级别产物，呈深粉红色，化学结构类似于 β-胡萝卜素。而β - 胡萝卜素、叶黄素、角黄素、番茄红素等都是类胡萝卜素合成的中间产物，因此在自然界，虾青素具有较强的抗氧化性。广泛存在于生物界，特别是虾、蟹、鱼、藻体、酵母和鸟类的羽毛中含量较高，是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一。虾青素化学名称：3，3′-二羟基-4，4′-二酮基β-胡萝卜素， CAS No: 472-61-7，分子式C40H52O4，分子量为596.86。由于两端的羟基（-OH)旋光性原因，虾青素具有3S-3 'S、3R-3' S、3R-3'R（也称为左旋、内消旋、右旋）这三种异构型态，其中人工合成虾青素为三种结构虾青素的混合物，极少抗氧化活性，与鲑鱼等养殖生物体内的虾青素截然不同．酵母菌源的虾青素有部分抗氧化活性；这两种来源虾青素主要用在非食用动物和物资的着色上。只有藻源的虾青素，具有较强的生物学活性。虾青素有人工合成和生物获取两种方式：人工合成即为化学方法，是从胡萝卜素制得虾青素；生物获取天然虾青素的方法，其生物来源一般有三种：水产品加工工业的废弃物、红发夫酵母和微藻（主要是雨生红球藻）。虾青素可以用化学方法从胡萝卜素制得。这是鱼饲料中虾青素的最主要来源，除了从藻类提取外，由于添加虾废料提取或产虾青素酵母提取两种方法比较贵，这也是化学合成的方法比较常用的原因。生物获取生物获取虾青素一般有三种：水产品加工工业的废弃物、红发夫酵母和微藻（雨生红球藻）。废弃物中虾青素含量较低，且提取费用较高。天然的红发夫酵母中虾青素平均含量也仅为0.40%。相比、雨生红球藻中虾青素含量却高达1.5%～3.0%，因此被看作是天然虾青素的“浓缩品”。海产废弃物提取从水产品加工工业的废弃物、各种海产加工废料中提取。酵母提取酵母中的红发夫酵母菌落因菌体产生虾青素等类胡萝卜素而呈红色，类胡萝卜素均匀地分布于细胞脂质中。天然的红发夫酵母中虾青素平均含量为0.40%。藻类提取天然的虾青素主要来自雨生红球藻。雨生红球藻中虾青素含量为1.5%～3.0%，被看作是天然虾青素的“浓缩品”。研究表明雨生红球藻对虾青素的积累速率和生产总量较其它绿藻高，而且雨生红球藻所含虾青素及其酯类的配比（约70%的单酯，25%的双酯及5%的单体）与水产养殖动物自身配比极为相似，这是通过化学合成和利用红发夫酵母等提取的虾青素所不具备的优势。雨生红球藻被公认为自然界中生产天然虾青素的较好生物。对比人工合成虾青素的稳定性和抗氧化活性亦比天然虾青素低。由于虾青素分子两端的羟基（-OH)可以被酯化导致其稳定性不一样。天然虾青素90%以上酯化形式存在，因此较稳定，合成虾青素以游离态存在，因此稳定性不一样，合成虾青素必须要进行包埋才能稳定。合成虾青素由于只有1/4左右的左旋结构，因此其抗氧化性也只有天然的1/4左右。吸收效果人工虾青素的生物吸收效果也较天然虾青素差，喂食浓度较低时，人工虾青素在虹鳟鱼血液中浓度明显低于天然虾青素，且在体内无法转化为天然构型，其着色能力和生物效价更比同浓度的天然虾青素低的多。生物安全利用化学手段合成虾青素时将不可避免的引入杂质化学物质，如合成过程中产生的非天然副产物等，将降低其生物利用安全性。查看更多

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ELISA法是免疫诊断中的一项新技术？首先，谈一下市场。首先R&D和Bender等一些着名品牌的 elisa试剂盒照旧很值得信任的，也得到了市场的承认，特别是R&D的试剂盒，我们销量很好，价格也是很公道，当然经费不是很充分的实行室很难消耗的起。　　ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。　　ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA试剂盒法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。【ELISA试剂盒的奇迹之旅】　　企业要从事进口ELISA试剂盒业务，需拥有科研进出口权，具备科研试剂经营资质或科研流通许可证。如果是大包装产品，进口到国内进行分装销售的进口公司必须具备科研实验生产加工资质，即使只是涉及分装查看更多

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胎牛血清和小牛血清间的差别？做实验对很多人来说就是家常便饭，很是熟悉。而血清在实验中也是经常使用到的，尤其是动物血清。胎牛血清和小牛血清都不陌生，如果可以选择的话，想必很多人都会选择胎牛血清。那么胎牛血清和小牛血清有着哪些差别？一、来源不同胎牛血清（Fetal Bovine Serum ,FBS）是在屠宰怀孕母牛的时候，通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛（小牛）血清（Calf serum, CS）采自出生10至14天的小牛。二、组份与比例不同两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。三、总体分析胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要比后两者好。上海纪宁生物建议一般选用血清种类可以根据ATCC及实验需要来选择。其实，除了一些比较娇贵的细胞，如干细胞之类的，其余的大部分细胞培养，用国产的足以。查看更多

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正确使用抗体检测试剂盒？抗体检测验剂盒除了正确的运用方法，在运用过程中还需求注意以下几点： 1、运用过的测验卡、口腔采样拭子、搜集瓶等器件不要随意乱扔，应严厉依照《医疗废物办理条例》以及《全国艾滋病检测技术标准》的要求履行。 2、检测前请细心阅览说明书全文，并依照要求细心操作。 3、某些抗病毒药物医治爱滋病患者和艾滋病患者晚期由于其免疫功能严峻受损或异常，不以精确判别。 4、用于本产品检测的样本有必要严厉依照说明书的样本搜集方法收集。 5、阳性成果的色彩深浅与样本中的HIV抗体水平无直接联络。 6、抗体检测验剂盒为一次性体外确诊试剂，不可重复运用；过期产品请勿运用。 7、采样前若有咀嚼口香糖、很多漱口水、饮食或抽烟等可能影响采样质量及检测成果的行为，应考虑恰当推延采样时刻，至少在上述行为发作15分钟后方能采样。 8、呈阳性成果的受检者须依照国家HIV办理标准，送HIV承认实验室进行承认。 9、初次收集样本后，如30分钟内再次收集样本进行检测，可能会造成灵敏度下降，因而应防止30分钟内重复取样。 10、实验应在4-30℃条件下进行，低温保存的检测卡需求康复室温后再翻开，避免吸潮。 11、检测过程中，口腔采样拭子、计时器或手表、一次性手套和生化污物桶是必要的运用物品，请自行准备。 12、抗体检测验剂盒翻开铝箔袋后应赶快运用。查看更多

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核酸凝胶电泳染料该如何选择呢? 凝胶电泳是我们基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动，因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质，从而降低了对流运动，故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinderTM、GoldViewTM、SybrGreenI、GelRed和GelGreen。下面对这几种核酸染料一一进行分析。 1.EB 溴化乙锭（EB）由于其价格便宜、使用方便已成为常用的核酸染料，被广泛应用于观察、检测琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶中的DNA或RNA。然而EB是一种强诱变剂，具有中等毒性，对皮肤、眼睛、口腔和上呼吸道系统有刺激性作用，对人体有潜在危害性。且废弃的EB染液易污染环境。EB本身在紫外下不发光，与单链、双链或三链DNA结合后发出明亮的荧光，EB-DNA结合物会导致染料的光漂白和DNA单链断裂，且具有潜在的诱变作用。EB的使用方法简单，可在制胶时将其加入进行前染，也可在电泳结束后进行后染。前染有利于节约时间，但是易出现条带变形拖尾等问题，后染较费时，但效果较好。 2.GeneFinder GeneFinderTM是新型的核酸染料，可以代替EB作为各种核酸电泳的染色剂。与强致癌性的EB不同，GeneFinderTM属于花青类染料，毒性较低，GeneFinderTM与dsDNA结合发出荧光，其检测核酸的灵敏度比EB染色法高。GeneFinderTM染料zui大吸收峰为470nm，与该染料结合的核酸在紫外线下呈现绿色荧光，另外，该染料同样能引起有机体突变，在使用时候一样要采取适当的保护措施。 3.GoldView GoldViewTM也是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA时，GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。GoldView对于大片段DNA的染色效果较好，但对于500 bp以下的片段效果并不理想，而且它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭，一般约5-10min条带就会消失。所以应尽快拍照、观察。另外，GoldView灵敏度差，本底色严重，不适用于切胶回收。且其毒性较大，尤其在紫外灯下，其诱导突变能力极高。 4.SybrGreenI SybrGreenI也是一种常用的核酸染料，它与双链DNA(dsDNA)结合后，荧光大大增强，检测的灵敏度也高于EB。在紫外照射透视下，与双链DNA接合的SybrGreenI呈现明亮的绿色荧光，但其稳定性较差(怕光、怕热)，使得染色的重复性较低。它对于50 bp以下的DNA片段染色能力缺失而对小于l00 bp的DNA片段检测灵敏度也较低。SybrGreenI的使用同样简单，致变性也比EB低，但仍然不能保证实验者的安全性，同时其高昂的价格也限制了它的广泛使用。 5. GelRed和GelGreen GelRed和GelGreen是集高灵敏、安全和高稳定性于一身极佳的荧光核酸染料。其通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。目前大多数商业化的核酸染料总是在灵敏度、稳定性和安全性等方面不完全令人满意，而GelRed和GelGreen的上市改变了这一现状。GelRed和GelGreen无论用于预制凝胶染色还是凝胶电泳后的染色，都表现出了的实验效果。为配合紫外凝胶成像系统而设计的GelRed，其使用方法与EB一样极其方便简单。GelRed在预制凝胶中使用时仍然有极高的灵敏度，且在检测低浓度、微量DNA方面也表现出极高的灵敏度，尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。GelGreen则可以满足使用蓝色可见光激光凝胶扫描仪或者可见光激发的DarkReader的研究人员的使用。GelGreen无论是在预制凝胶还是凝胶电泳后的染色中都优于SybrGreenI，且不存在后者的不稳定性问题。GelRed和GelGreen均有较强的稳定性，可以长期在室温下保存，且这两种染料的热稳定性也极高，在电泳缓冲溶液中时，均可用微波炉加热且不发生变性。含有染料的预制凝胶可成批制备，长期保存备用。GelRed和GelGreen与EB或SybrGreenI等其他核酸染料相比安全性得到了极大的提高。独立的测试服务公司进行的标准艾姆斯氏测试结果表明，GelRed和GelGreen的特殊化学结构使其难以穿透细胞膜进入细胞，正是这一特性保证了实验者的安全，使实验者可以更加放心做实验。查看更多

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如何评价总RNA或mRNA的质量?？一个细胞有很多种的RNA，如mRNA,rRNA, tRNA 总RNA指的是一个细胞（一种生物）里面所有种类的RNA平时说的提取总RNA指的就是提取一个细胞里面的所有种类的RNA 。 mRNA的功能：把DNA模板链上的碱基序列转录为RNA分子上的碱基序列（mRNA），再从mRNA上的碱基序列通过合成蛋白质的机构获得氨基酸序列。如何评价总RNA或mRNA的质量?? 1. 相关概念 RNA质检参数OD260/OD280、OD260/OD230的意义。 260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值。 A230: 测定其它碳源物质，如酚，糖类等。 A260：核酸的吸收峰测，测RNA，DNA，引物等的浓度用的。 A280：蛋白质的吸收峰。一般的，我们只看OD260/OD280(Ratio，R)在1.8~2.1范围内时，我们认为 RNA中蛋白的污染是可以容忍的，不过要注意，当用 Tris 作为缓冲液检测吸光度时，R 值可能会大于 2（一般应该是 2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了。纯RNA的OD260/OD280的比值为2.0。 2. RNA质量检验 RNA样品的品质检测一般分为总量，纯度与完整性三大项。总量：微量分光光度计测260nm吸收值计算。纯度：微量分光光度计测260nm/230nm吸收值的比值，用于评估有机溶剂残留；260nm/280nm吸收值的比值，用于评估蛋白质污染比例。完整性：以Agilent Bioanalyzer进行毛细管电泳(capillary electrophoresis)，并以软件的RIN(RNA Integrity Number)分数评估，10为RNA完整性zui好，0为zui差。 l RNA纯度 RNA在纯化过程中容易受到DNA、蛋白质及有机溶剂的影响，这些残存物将会影响以后的操作。光谱分析(NANODROP)利用物质对不同波长光的吸收度的不同，可以鉴别出溶液纯度及浓度。RNA溶液的A260/A280的比值是一种RNA纯度检测方法，比值范围一般为1.8-2.1。各项实验对RNA纯度要求不一，比如即使比值超出这个范围，RNA样品也一样可以用于一些普通实验中，如Northern杂交、RT-PCR、荧光定量PCR和RNA酶保护等实验。查看更多

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生物试剂的洗涤方法？生物试剂的洗涤方法点击次数：50 发布时间：2019/6/20 洗涤这是实验操作过程中看似很简单但又至关重要的一个步骤，所以今天结合技术人员的建议和指导来给你们普及一下这方面小知识。生物试剂的洗涤方法： 1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。 2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次生物试剂实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。 1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。 3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。 4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。 5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。 6.每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。 7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。 8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。 9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。查看更多

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ELISA试剂盒检测结果的三大条件？ ELISA试剂盒质量保证是一个复杂的过程，许多重要的环节都影响到检测的质量。在实验室，对试剂准备一般不太注意，通常的做法是，在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。 ELISA试剂盒检测结果也是有三大条件的，下面就让我们来具体看看是哪些吧！一、ELISA加样步骤在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清天然凝固、血kuai收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液，再在其加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液、分泌物和排泄物等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份，ELISA试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。二、固相载体 ELISA的操纵因固相载体的形成不同而有所差异，海内医学检修一般均用板式点。除特殊情况外，在医学检修中均以血清作为检测标本。加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。每次加标本应更换吸嘴，以发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。的试剂，良好的仪器和准确的操纵是保证ELISA试剂盒检测结果正确可靠的必要条件。ELISA顶用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。有些标本可直接进行测定，有些则需经预处理。三、标本因素血清标本可按常规方法采集，应留意避免溶血，红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。如在冰箱中保留过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。本文将叙述板式ELISA各个操纵步骤的留意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，严格遵照划定操纵，必能得出正确的结果。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不可溅出，不可产气愤泡。有此测定需用稀的血清，可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。查看更多

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血清在动物细胞培养中起到的作用？血清在动物细胞培养中起着多方面的作用： ①提供细胞生存和增殖所必需的生长调节因子。 ②补充基础培养基中没有或量不足的营养成分。 ③含有一些可供贴壁细胞型细胞贴壁生长的基质成分。 ④提供载体蛋白，可结合维生素、脂质、金属离子等。 ⑤在一些情况下，中和毒性物质保护细胞不受伤害。 ⑥给培养液提供良好的缓冲系统。 ⑦提供蛋白酶抑制剂，保护细胞免受死细胞释放的蛋白酶的伤害。但是血清也存在一些弊端，比如存在不少有害成分（补体、免疫球蛋白和一些生长抑制因子等）；血清成分不明确，影响对结果的分析；不同动物、不同批次的血清成分和活性有很大不同，使得培养结果不稳定。尽管如此，血清仍然是培养液中zui基本的添加物，尤其是在原代培养或细胞生长状态不良时，常常会先使用有血清的培养液进行培养，待细胞生长旺盛后再换成无血清培养液。血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清，动物血清还可起到酸碱度缓冲液的作用。查看更多

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间接法ELISA不能直接用酶标记的原因？ elisa试剂盒SCI文章在ELISA实验中，用间接法测定抗体，不能直接将待测抗体直接用酶标记，然后直接加底物。而要加酶标抗抗体呢？如果将酶标记到待测抗体上，相对经典的间接法更加繁琐，而且您在摸索标记条件时不能保证操作失误导致待测抗体失活；酶标二抗现在是已经商品化了的，被大规模生产，购买后使用方便。如果你的间接做的好的话，方法被优化了后，一抗二抗显色，总共的时间加起来，出结果不会超过2-3小时。可以用直接ELISA法，就是用抗体包板，在抗原上标记酶，然后显色，这样与间接法相比就减少了一步，缩短了时间。但是，直接法和间接法，他们各有优缺点， elisa试剂盒SCI文章需要根据实验具体要求而定。 1.待测抗体一般是免疫后产生的抗体，其中有免疫失败和抗体过少等因素存在，用酶标记有许多不确定性，如用酶标记前期有测不出效价的可能，造成不必要的困惑。 2.ELISA酶联免疫中酶标抗抗体和抗体结合后有巨大的信号放大作用，可以将信号扩大千倍以上，适合于较低抗体量的测定。 3. elisa试剂盒SCI文章筛出单抗后可以考虑直接酶标抗体，不过在确定测定体系上要费不少功夫。查看更多

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不看不知道,ELISA试剂盒实验的要害进程？在七月的风里，有您我寻觅的嫣然，炙热的心跳；七月的风，穿越了时空地域，拂在脸上，激越了灵魂深处的神往。一同尽缠绵，说风流，共唏嘘。在这新的一天里，上海古朵实为您揭晓ELISA试剂盒实验的要害进程，您都知道吗？ ELISA试剂盒白介素类检测的样本是有多种类型的，如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等，不同类型的检测样本前期的处理办法是不一样的。实验样本的处理可谓是ELISA实验的要害进程之一，所以科研朋友一定要多加留心。一、浓缩因为净化进程中引进的溶剂，可能会下降待测组分的浓度或许不适宜直接分析，需求去除悉数有机溶剂。即试剂盒前处理进程中把样本在60℃氮气下吹干，再用复溶液溶解单调残留物。浓缩办法：氮气吹干除杂、压缩空气吹干除杂。二、均质 ①组织样本：肉、肝食品类切细，用绞肉机重复绞碎，混合均匀。 ②水产样本：去除样品的非食用部分，食用部分切细，用均质器均浆；材料表面较脏时,需适当用蒸馏水清洗。 ③蛋类：鲜蛋去壳，蛋黄和蛋白充分混匀。 ④生果、蔬菜类：先用水洗去泥沙，ELISA试剂盒然后除去表面的水分，取食用部分。三、ELISA试剂盒白介素类振荡提取将提取溶剂参与到装有样品的具塞容器中，振荡，使提取溶剂与容器内的样品充分接触以深化到样本组织内部，提取待测组分。 ①振荡办法：振荡器上进行上下、往复式振荡、手摇式上下振荡。 ②在组织样本中参与有机溶剂之间提取时，应边加边振荡，避免组织凝聚成团，不利于提取。上海古朵实ELISA产品优势 1.极高质量：高质量的抗体和试剂是ELISA试剂盒的根底； 2.特异：特异检测政策分子，成果可重复； 3.高度活络：可检测到pg/mL等级的政策； 4.种类彻底：可掩盖人、大鼠、小鼠、猪、马、犬多个种属； 5.优化规划：可拆卸式96孔板(12X8)，为血清、血浆、尿样和细胞培养物样本检测进行优化。 6.严格的质控体系：一切试剂盒从原料到制品通过严格的质控，保证试剂盒质量及稳定性； 7.多年实践经验的技术教师，保证上海纪宁ELISA试剂盒完善专业的售后效力； 8.专业的代测效力：WB实验代测，ELISA试剂盒实验代测，IHC实验代测，染色实验代测查看更多

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细胞增殖检测：3H同位素渗入法实例？一、原理淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下，产生增殖反应，DNA和RNA合成明显增加，如在培养液中加入 3 H－胸腺嘧啶核苷（ 3 H-TdR），则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。二、仪器和材料 RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯基乙醇（2-ME）、青霉素、链霉素、刀豆蛋白A（ConA）、Hank's液、PBS缓冲液（pH7.2-7.4）、 3 H-TdR、闪烁液[2，5-二苯基恶唑（PPO）0.5g、1，4-双-（5-苯基恶唑基）-苯（POPOP）0.25g、二甲苯500mL混匀] 200目筛网，96孔培养板（平底），手术器械、二氧化碳培养箱、超净工作台、液体闪烁仪、多头细胞取集器、49型玻璃纤维滤纸。三、实验步骤 1、脾细胞悬液制备无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank's液的小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，制成单细胞悬液。经200目筛网过滤，用Hank's液洗3次，每次离心10min（1000r/min）。然后将细胞悬浮于2mL的完全培养液中，用台酚兰染色计数活细胞数（应在95%以上），zui后用RPMI1640完全培养液将细胞数调成5×106个/mL。 2、淋巴细胞增殖反应将脾细胞悬液加入到96孔培养板中，200μL/孔，每一份脾细胞悬液分装6个孔，3孔加ConA（5ug/mL），另3个孔不加ConA 作为对照。置5% CO 2 ，37℃培养72h，培养结束前6h，每孔加入 3 H-TdR 20μL，使其终浓度为（3.7-18.5）×10 4 Bq/mL。用多头细胞收集器将细胞取集于玻璃纤维滤纸上。滤纸片充分干燥后置测量瓶中，加入7mL闪烁液，用液闪仪测定每分钟脉冲数（cpm）。 3、数据处理及结果判定一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值以每分钟脉冲数（cpm）表示增殖程度，用刺激指数（SI）来表示实验孔cpm SI= ───────── 对照孔cpm 受试样品组的SI值显著高于对照组的SI值，即可判定该项实验结果阳性。查看更多

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干细胞试验操作安全知识？干细胞试验操作安全知识： 1.参加试剂之前，把它混匀一下，防止放置时刻长了浓度不均。冻存的试剂更是要等悉数消融后才干运用。 2.试剂标签要写上制造者名字和日期，日期不仅要包含月和日，年也要写上。可能一瓶试剂存在的年头比您在试验室的时刻都长。 3.有机玻璃不能用酒精擦洗，不然会变白，模糊不清。 4.不要把注射器丢弃在一般垃圾桶内，不然会有费事。不要把针头从针套拿出来，把针头带着针套连同针管一同丢在尖利物品收回的盒子里。 5.进入动物试验室坚持戴口罩的习气，防止患上过敏症。 6.关于试验室的女人来说，特别要注意： ① 制止在试验室化装、处理隐形眼镜；不发起在试验室佩带首饰。 ② 长发有必要盘在脑后并扎起来，防止触摸手、样品、容器或许设备。 ③ 不发起穿短裙和露脚趾的鞋子。 7.发起从事试验作业的女人应在计划怀孕前三个月开端脱离试验室中切当的危险要素或少触摸(包含男方)，并进行有关优生优育方面的查看。查看更多

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肠道菌间沟通具有大作用？近一项研究表明，肠道内的微生物彼此之间可以倾听与交谈。这些微生物交流所使用的一种小分子，可改变肠道中某种细菌的数量，并恢复长期抗生素治疗造成的巨大损害。在这项研究中，研究人员发现，一种称为自诱导剂2（AI-2）的化学信号——细菌用其来进行相互交流，能促进接受抗生素治疗的小鼠肠道微生物平衡。这一研究结果为“利用细菌化学语言来促进健康肠道微生物群落”的治疗策略，奠定了基础。我们肠道中的细菌，对我们健康的许多方面都有着极其重要的意义。如果我们学会调整它们的物种组成及其有利于我们的功能，就可以利用这些细菌来防止感染，并为炎症性肠道疾病和饮食引起的菌群失调开发治疗方法。抗生素使用和饮食因素可以改变肠道微生物的组成，强烈减少细菌的多样性，通过增加宿主对有害菌（如沙门氏菌）的敏感性，对人类健康构成严重威胁。特别是，拟杆菌和厚壁菌——哺乳动物肠道中的两个主要门类——之间的平衡变化，与肥胖、糖尿病、慢性肠道炎症性疾病和胃肠道癌相关。通过操纵天然信号和其成员之间的相互作用，驱动这一菌群从疾病状态向健康状态转化的能力，为治疗效益提供了巨大的潜力。为了验证这个想法，Xavier和她的团队专注于一个小的扩散性分子（称为AI-2）——可促进整个细菌王国的种间沟通。一个菌种产生的AI-2可以影响另一个菌种的基因表达，从而使整个菌群能够同步调整行为（如毒力和生物膜的形成）。这些特点使得AI-2成为哺乳动物肠道中介导细胞间相互作用的一个出色候选者，肠道中有数百种细菌共存和互动。为了操纵小鼠肠道中的AI-2水平，研究人员制备了大肠杆菌突变体，该突变体不能从环境中吸收AI-2。当这种突变被引入抗生素治疗小鼠的胃肠道中时，会造成肠道AI-2水平增加，改变肠道微生物的组成，以有利于厚壁菌的扩张，这种菌已经几乎被抗生素消除。因为在抗生素治疗过程中，肠道中高的AI-2水平对于健康状态起决定性作用，那么就有可能通过处理这种化学信号来防止抗生素的不良影响，纠正饮食引起的菌群失调，以及治疗人类胃肠道疾病。下一步，研究人员将研究在抗生素治疗后AI-2是否会促进肠道微生物对病原体和传染病的防护功能恢复。他们还将通过研究AI-2信号如何影响细菌中的基因表达，确定它的各种功能，以及识别AI-2的的新细菌受体和其他化学信号。这些受体可以作为新的药物作用靶点，来改变细菌间的交流。这种控制细菌的策略，可能是避免‘细菌对今天使用的抗生素产生耐药性’这个日益严重问题的一个很好选择。查看更多

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竟然因为好奇，去尝了那些化学试剂...？这些化学试剂的味道，是一位不怕死的网友品尝后写的心得，现搜刮出来与大家一起分享，以满足自己和各位的好奇心，顺便为大家鸣个警钟！大家千万要记住实验室所有的试剂都是谢绝品尝的。盐酸(HCl) 稀：比较酸，感觉嘴里滑溜溜的，典型的呕吐物感，微辣。浓：极度的酸，吐掉以后回味苦，然后整个嘴里发凉，10分钟后好转。硫酸(H2SO4) 稀：淡淡的酸味，回味感觉油腻，微热，甜，无任何不适感。较浓的（40%左右的）：超烫，感觉喝烫稀饭了，然后微甜感和痛感并存，持续2天才退，（98%的纯正浓硫酸不敢喝）。硝酸(HNO3) 稀：先是苦，然后整条舌头麻了，然后痛，起了白斑，持续疼痛，3-4天后消退，同时嘴里感觉大吸了一口汽车尾气。浓：不敢喝（猜测是浓硫酸的加强版，哪位屌丝试试给小编说一下）。硫酸铜(CuSO4) 一开始没味道，吐出后回味淡淡的苦涩。（当咖啡喝不错??）四氯化碳(CCl4) 这个最恐怖了，整个嘴里感到烧塑料的味道，极浓郁，吐掉以后出现说不出的怪异甜味，直感觉全身松软（的确，闻起来还可以，尝起来就郁闷了）过氧化钠(Na2O2) 一般的咸（Na盐基本都这个味道）无水乙醇嘴里完全没味道，之后花露水的味道在鼻子里挥之不去。氯化铁(FeCl3) 凉，然后酸，与硬币放嘴里感觉差不多（Fe盐都这味道） NaOH 稀：比同浓度的Na2CO3（我尝过，咸的），多一些辣感（对蛋白质腐蚀性强的都会有辣感）。浓：含在嘴里十分的辣(可能是已经反应起来了) 然后舌头烧坏,呈黄色,肉腐烂，1个月不能说话,口里有赤痛感而且舌头麻木，有辛辣感半年后出院,说话变得不准,味觉几乎消失,嘴部留下疤痕（这东西对蛋白质的反应不是闹着玩的??）。亲，欢迎你安全来到文末~小编看完这篇文章真的是头皮发麻，并无比庆幸自己从来没有产生过品尝化学试剂的念头！！！再次强调千万不要试图去证明这些化学试剂的味道，出了任何意外小编概不负责~ 查看更多

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NK细胞与CIK细胞在功能方面有何不同？同样作为细胞治疗的方式，NK细胞与CIK细胞在功能方面有何不同 NK细胞和CIK细胞在抗肿瘤方面，二者细胞类型不同，表型不同，对肿瘤细胞的杀伤机理不一样。抗肿瘤方面，各有优点，NK细胞单个细胞杀伤活性强，CIK增殖的倍数较大。也就是说CIK数量可以较大，但是NK数量有限，针对肿瘤患者治疗过程中，还是以CIK为主，NK可以作为提高免疫力方面进行协同治疗。 NK临床应用特点： NK细胞能够增强患者的免疫功能，同时具有抗恶性肿瘤和抗病毒的作用。适用于以下几种情况： (1)对大部分恶性实体肿瘤均有较好的疗效。 (2)在手术切除、介入、射频、氩氦刀等治疗的同时或治疗后使用疗效更佳。 (3)部分暂时不宜做手术、介入或其他治疗的肿瘤患者，也可先进行NK细胞治疗，以提高机体的免疫功能。 CIK临床应用特点： CIK细胞免疫治疗增殖速度快，杀瘤活性高；杀瘤谱广；对多耐药瘤株同样敏感；杀瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制剂影响；能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas-FasL凋亡；安全性高，对患者身体一般条件要求低，对于早、中、晚各期肿瘤均适用。查看更多

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ELISA、IFA、RIA各自优缺点比较？近二十几年来，免疫学分析方法发展很快，特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后，使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光（IFA）和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后，在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。方法种类比较指标 ELISA RIA IFA 敏感性高高较低特异性取决于抗原制备同左较高重演性尚满意尚满意尚满意结果判断客观客观有主观因素抗原制备较容易或复杂同左较容易结合物制备正在标准化已标准化已标准化在野外条件下用于大量人群标本的普查可以困难尚可以分析自动化可以可以困难主要设备酶标比色计粒子计数器荧光显微镜试验成本低高较高试剂半衰期长短长对人的危害性无或很少有无或很少主要检测对象抗体或抗原抗原抗原或抗体应用范围小的诊断实验室大的中心实验室小的诊断试验室查看更多

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简介

职业：上海古朵生物科技有限公司 - 销售经理

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地区：上海市

个人简介：上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

企业简介

企业名称：上海古朵生物科技有限公司

企业性质：贸易商,代理商,

主营业务：质粒载体定制，ELISA检测试剂盒，细胞培养，抗体抗原，蛋白纯化，染色液溶液，标准品对照品,微生物培...

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