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上海古朵生物
蛋白酶k有什么特性? 蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,从林伯氏白色念球菌中纯化得到。该酶有两个Ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去Ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酶制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/lCa2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入egt(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合Ca2+。查看更多
HIS标签蛋白没有被洗脱下来? 蛋白挂柱后洗脱不下来主要是因为蛋白和柱子结合能力太强或者洗脱条件太温和,我们可以从以下几方面考虑解决问题。 1、洗脱条件太温和:重新摸索洗脱条件,增加缓冲液中咪唑浓度或者适当降低缓冲液pH以确定最佳的洗脱条件或者更、换缓冲液的成分(换成tris-HCl缓冲液)。 2、蛋白在柱子中沉淀:适当降低上样量或蛋白浓度,用咪唑线性洗脱。使用添加剂或者改变NaCl的浓度,或者在变性的条件下洗脱(加4-8M的尿素或者4-6M的盐酸胍)。 3、非特异性的疏水或者其他作用:在洗脱液中加非离子的添加剂(例如0.2%的Triton X-100)或者增加NaCl的浓度。 4、蛋白和柱子接触时间过长:可以减少蛋白和柱子的接触时间。查看更多
病毒感染目的细胞感染不上或效率低? 病毒感染目的细胞感染不上或效率低? 和以下几个因素有关: 1、病毒活性:解冻病毒一定要在冰上进行,尽量避免反复冻融, -80 ℃ 保存半年以上需要重新测滴度; 2、目的细胞:最好预实验测试过,看病毒载体是否合适感染目的细胞。一些难感染的细胞,如悬浮细胞,原代细胞等,或者动物实验适合用腺病毒或AAV; 3、MOI值:一般来说MOI都是要用梯度法来摸索的,同的病毒感染不同的细胞的MOI值也不一样,如果感染细胞所用的病毒量不够的话,感染效率肯定不好;需要确认MOI计算及细胞计数的准确性。 4、感染时间:慢病毒一般在感染后24h换液,感染后换液太早会导致感染效率下降;感染后换液太晚,则对细胞的损伤太大,效率也不高。感染后48h开始观察荧光,由于慢病毒的表达时间较长,有的72h,120h才能看到荧光。 5、其他:是否加入 polybrene 以及荧光显微镜的使用等因素有关查看更多
细胞培养出问题?是否用对血清了?   牛血清是细胞培养中最常用的天然培养基,与合成的基础培养基配合使用,一般添加使用量在10~20%,主要作用是提供细胞生长所需的营养物质、激素和生长因子等。   养过细胞的小伙伴们应该都知道:血清,由于其复杂的内在成分和难以控制的外界因素,它既是细胞生长的必备营养,也是细胞死亡的“致命毒药”,   当我们废寝忘食的,呕心沥血的,鞠躬尽瘁的养着细胞同时,也极有可能因为一时的疏忽和大意选择了品质不好的血清,导致珍贵的细胞意外身外,一切归零,不得不重头开始!   血清质量的差异性大   市场上各种血清产品鱼龙混珠,一不小心,你可能就使用了品质不好的血清。   血清按照采血时间可分为胎牛血清、新生牛血清和小牛血清,三者的优劣顺序为:胎牛血清 新生牛血清 小牛血清。   一般细胞建议使用胎牛血清培养,部分细胞可使用新生牛血清培养,小牛血清则不建议用于细胞培养。   血清在生产中受采血来源,条件和生产工艺等的影响,质量差异较大,即使相同厂家不同批次的血清都会有差异;另外不同种类的细胞对血清的适应也有不同,这可能与血清中所含的生长因子有关,所以血清在使用之前应提前验证一下对所培养的细胞生长的促进作用。   血清的正确保存及使用指南   1)保存:胎牛血清一般在-20℃以下冷冻保存,使用之前应先放到2~8℃冰箱过夜溶解,不建议直接放到室温或37℃水浴溶解(升温过快会导致血清中蛋白质大量沉淀,影响血清质量);若一次使用量不多,可溶解后分装至小包装冻存,避免反复冻融。血清解冻后在2~8℃保存时间一般不超过一个月。   2)灭活:一般血清使用时不需要灭活。灭活的作用是消除血清中的各种补体成分,但事实证明血清灭活之后会产生大量的沉淀,会对血清的营养物质造成较大破坏,对细胞的生长不利。   3)沉淀:血清中的沉淀一般为析出的纤维蛋白,另外新生牛血清中各种蛋白含量明显偏高,溶解时较易产生大量沉淀。血清中出现沉淀一般不会影响血清质量,并且升温至37℃时会溶解(不建议加热血清);若沉淀量较多,可在400×g离心3min,取上清使用。血清和添加了血清的培养基在使用时不需要过滤。   血清使用中的一些问题   1)如何更换使用血清?   需要更换使用不同品牌或批次的血清之前,需提前对要使用的血清进行验证,可使用自己经常培养的细胞进行,保证该血清对细胞生长的促进作用。在更换使用时可以将要更换的血清和原本使用的血清1:1混合使用1~2代,待细胞完全适应后进行更换。   2) 血清颜色的问题   血清颜色主要是黄色或红色,一般淡黄色或微红色为正常。这个主要受血红蛋白含量的影响,若颜色太深(接近培养基的颜色),则有可能是采血过程中出现溶血导致的。   3)血清沉淀的问题   血清中的沉淀主要是纤维蛋白凝集产生的,一般来说每次冻融都会产生一部分的沉淀,但不影响血清质量和使用。另外,血清在加入到培养基中后也是有可能会产生沉淀的,特别是灭活后的血清,会持续产生黑色颗粒,这可能会被错误判断为污染。一般血清产生的沉淀在显微镜下观察为微小的不规则絮状或者颗粒物质,排查是否为污染最好的办法是用琼脂板检测。查看更多
对照品的使用方法你真的知道吗?   同标准品一样,对照品也是实验室中的“常客”,有人说标准品和对照品就如同双胞兄弟,这话其实真没错,虽然两者间是有必然区别,但关系却是密不可分,既然是实验室常客,其用途主要也是用于生化研究,含量测定等,据不完全统计,对照品的品种已经高达几百甚至于上千种,这么多的对照品,我们应该如何正确去使用呢?其标定方法的注意细节你都知道吗?   鉴于对照品的品种众多,对于它的保存方法我们也是一定的要求,一般来说应将对照品置于干燥阴凉处,大家都知道对照品是实验室常客,所以如果保存不当,会直接影响到它的实验精准性,但是对于不同的对照品,保存方法也是不同,建议开瓶后的对照品尽快使用完,避免对照品的分解、污染或吸潮。本文重点为您讲述对照品的正确使用方法_对照品标定方法注意细节。   对照品网浅谈对照品的正确使用方法:   对于对照品的使用方法,我们一般分为四个步骤,比如开启进行时,开启后等,具体的正确使用方法请往下看:   1.正确开启(对照品开启进行时)   很多对照品是置玻璃安瓿中保存,启开时必须严格防止玻璃屑掉入瓶中。具体可按如下操作:轻微震敲安瓿,尽量使内容物聚集于底部,砂轮切割几圈后,平置或头部略向下斜置安瓿,带好防护手套,双手拇指顶住颈部发力,注意拇指与食指不要捏得过紧,以免捏碎头部。启开安瓿后,将安瓿稍许向下倾斜,轻微振敲,因玻璃屑较重,若混入内容物中,此法可将其振出。   2.对照品开启后   应严格密封,或转移至经100℃以上烘干后并置干燥器中冷却至室温的西林瓶中,密封,置干燥器中,某些品种应按使用说明再置冰箱中冷藏;对于易吸潮的对照品,如奥美拉唑等,若用于含量测定,应启开后立即使用,剩余部分日后可用于鉴别,但建议不要再用于含量测定;对于引湿性较弱、稳定性良好的品种,如氯霉素等,启开后若保存得当,亦可用于含量测定,使用时间视储存条件而定,必要时做期间检查。   3.过期对照品   对于过期的对照品,如果继续保存,则需单独放置,以免混淆;必要时(如中检所缺货),亦可应急使用,可用于鉴别;如用于定量,则需有溯源核查数据保证。   4.对照品保存要求   4.1.对照品溶液贮存条件一般是在2~8℃冰箱中贮存,其间隔时限可根据对照品溶液的具体特性来确定;按照药品质量标准,配制对照品溶液,计算该对照品溶液含量,用此对照品溶液按质量标准进行正常产品检验。   4.2.待对照品溶液放置到个期限(通常3天、7天、1个月等,根据对照品的稳定性确定),按照药品质量标准,配制新的对照品溶液(按药品质量标准进行检测)计算含量。   4.3.同时将*初的对照品溶液(当做产品)按药品质量标准进行检测,并计算含量;将所得到的含量求相对偏差,若不大于1.0%(有的规定不大于2.0%,个人觉得偏差有点大),则说明对照品溶液或标准品溶液是稳定的,在个期限内可以用于检验;依此继续重复确定对照品的具体贮存时间。   同时将*初的对照品溶液(当做产品)按药品质量标准进行检测,并计算含量;将所得到的含量求相对偏差,若不大于1.0%(有的规定不大于2.0%,个人觉得偏差有点大),则说明对照品溶液或标准品溶液是稳定的,在个期限内可以用于检验;依此继续重复确定对照品的具体贮存时间。   对照品标定方法时需注意的细节要点   1.供试品的取用量应满足滴定精度的要求(消耗滴定液约20ml)。   2.滴定终点的判断要明确,提供滴定曲线;如选用指示剂法,应考虑其变色敏锐,并用电位法校准其终点颜色。   3.为排除因加入其它试剂而混入杂质对测定结果的影响,或便于剩余滴定法的计算,可采用“将滴定的结果用空白试验校正”的办法。   4.要给出滴定度(采用四位有效数字)的推导过程;标定结果要根据3个以上实验室各不少于15组测定结果经统计分析,去除离群值和可疑值后的结果,并报告可信限。   目前,很多的企业其实对于对照品的管理并不是十分到位,特别是那些对照品本身就不是很了解的企业而言,经常会将对照品配制成浓度较高的储备液,但未能对其稳定性和储存期限进行考查,有些将开启后和开启前的对照品放一起,包装上也没有特别说明。这也让某些对照品失去了原本的实验精准性。查看更多
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自制标准品需求进行的操作规程? 自制标准品需求进行的操作规程是什么? 企业如需克己作业规范品或对照品,应当树立作业规范品或对照品的质量规范以及制备、辨别、查验、批准和贮存的操作规程,每批作业规范品或对照品应当用法定规范品或对照品进行标化,并确认有效期,还应当通过定时标化证明作业规范品或对照品的效价或含量在有效期内保持稳定。标化的进程和成果应当有相应的记录。 1.企业对克己作业规范品或对照品的管理应满意以上条件,不需送样到药检所查验。 2.对作业规范品非常全面的规则了,关键是企业的标定流程和成果一定要符合要求。 法定标准品及标定查验办法: 法定规范品是指USP、EP、CP等规范品的现行批号。要挑选药典的查验办法。不同的规范选用不同的药典查验办法。 规范品质量规范的树立 要首先树立作业规范品的质量规范,总的原则是在原法定规范的基础上树立,该规范要严于药典规范。 标准品的标定进程 a 若需求,应对规范品进行预处理(如枯燥); b 选用两个熟练的人员进行标定; c 各称取一份法定规范品,三份样品; d 系统适应性试验应合格; e 同一化验员含量成果的RSD应不大于0.5%,不同化验员含量成果均匀值的相对偏差应不大于0.3%; f 均匀后作为标定成果。查看更多
微生物与温度的关系你造吗? 任何微生物只能在一定的温度范围内生存,在适宜的温度范围内微生物能大量生长繁殖。根据微生物对温度的不同反应可分为嗜冷、兼性嗜冷、嗜温、嗜热和超嗜热(或极端嗜热)5种类型。它们都有各自的最低、最适和最高生长温度范围。 原生动物的最适温度一般为16~25℃,工业废水生物处理过程中的原生动物的最适温度为30℃左右,其最高温度在37~43℃,少数可在60℃中生存。大多数放线菌的最适温度为23~27℃,其高温类型在50~65℃生长良好,有的放线菌在20℃以下的温度中也可生长。霉菌生长与温度的关系和放线菌差不多。在实验室培养放线菌、霉菌和酵母菌多采用的温度为28~32℃。藻类的最适温度多数在28~30℃ 不同微生物生长温度的一些典型例子。温度的变化都会对每种类型微生物的代谢过程产生影响,微生物的生长速率会发生改变,以适应温度的变化。 微生物能够最快生长的温度叫作最适温度,能够生长的最低或最高温度,分别叫作最低温度和最高温度。低于最低温度微生物停止生长,超过最高温度微生物则会死亡,超过最高温度基点愈高,微生物死亡愈快。一般无芽孢杆菌在60℃时30min致死,70℃时10~15min死亡,在80~100℃情况下,几分钟全部无芽孢微生物都会死亡。芽孢较耐高温,但各种微生物产生的芽孢耐高温的程度不同。在100℃情况下,有的几分钟内死亡,有的能在沸水内2h也不致死。芽孢比菌体耐高温的原因可能是芽孢内结合水含量较高。 微生物对低温抗力较强。低于生长最低温度一般只能抑制其生长,很少有杀死作用。如酵母菌细胞可在-130℃下经24h不死亡,细菌芽孢和霉菌孢子可在-190℃下存活半年。因此,根据微生物对低温的抵抗能力,在实践中常用低温保存菌种。查看更多
影响指示剂变色范围的因素? 影响指示剂变色范围的因素 1、温度: 温度改变,指示剂的变色范围也随之改变。 例如: 18℃时,甲基橙的变色范围为3.1-4.4, 100℃时,则为2.5-3.7。 2、溶剂: 指示剂在不同溶剂中变色范围不同 3、指示剂用量: 浓度小:颜色变化灵敏; 浓度大:终点颜色变化不敏锐; 指示剂用量少一点为佳。查看更多
实验室废液怎么处理? 1).尽量回收溶剂,在对实验没有妨碍的情况下,把它反复使用 2).为了方便处理,其收集分类往往分为:a)可燃性物质b)难燃性物质c)含水废液d)固体物质等。 3).可溶于水的物质,容易成为水溶液流失。因此,回收时要加以注意。但是,对甲醇、乙醇及醋酸之类溶剂,能被细菌作用而易于分解。故对这类溶剂的稀溶液经,用大量水稀释后,即可排放。 4).含重金属等的废液,将其有机质分解后,作无机类废液进行处理。查看更多
如何提高蛋白的可溶性表达?   重组蛋白在大肠杆菌中大量表达时,很容易在胞内形成不可溶的包涵体,为后期的纯化复性带来麻烦。而且,复性所得到的蛋白活性很低甚至没有活性。因此,提高重组蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达是十分必要的。   可以从以下几点进行优化:   1) 选择合适的宿主细胞;   2) 采用合适的融合标签表达;   3) 选择合适的质粒载体;   4) 优化培养诱导条件。 查看更多
哪些营养物质促进微生物生长繁殖? ? 保障微生物生长和繁殖需求的营养来源于碳源/氮源/水/无机盐和生长因子等五方面物质的摄取。 水:水是各种生物细胞所必需的。水是一种良好的溶剂,中.海微生物代谢中的所有生化反应都与水的作用密不可分。 碳源:碳源是合成细菌成分和细菌的原料。微生物的主要能源。总体而言,中 海微生物可以使用的碳源范围非常广泛。从微生物广义可分为有机碳源和无机碳源两种类型。必须使用有机碳源的所有微生物都是异养微生物。使用无机碳源的微生物是自养微生物。糖是使用最广泛的碳源。 氮源:氮源主要用作合成细菌结构的原料,很少用作能源。与碳源相似,整个中海微生物可以使用多种碳源。固氮细菌等某些微生物可以在空气中使用分子氮,也可以使用铵盐和硝酸盐等无机氮化合物来合成有机氮化合物。大多数致病细菌必须提供诸如蛋白one和氨基酸之类的有机氮化合物才能生长。 无机盐:无机盐主要可以为微生物提供除碳和氮以外的各种重要元素。中'海微生物需要许多无机盐,主要是P/S/K/Na/Ca/Mg/Fe等。它的主要功能是形成细菌成分,用于调节渗透压,作为某些酶的成分,并可以激活酶的活性等。 生长因子:某些微生物即使提供了适当的碳源,氮源和无机盐,也无法生长,但它们具有一定的活性。提供一定数量的所谓增长因子。有很多类型,主要是B族维生素的化合物。可以从酵母提取物,血液或血清中获得生长因子。查看更多
琼脂与琼脂糖的区别?   琼脂作为一种独特的食品添加剂,在我国已经有300多年的历史。是由琼脂糖和琼脂果胶所组成的亲水胶体,又被称为寒天、洋菜粉、琼胶、菜燕、冻粉等,是从石花菜或是其他藻类植物中提取出来的海藻胶。琼脂糖又被称为琼胶素或是琼胶糖,是琼脂中不带电荷的中性组成成份,而琼脂果胶是非凝胶部分,是带有硫酸酯(盐)、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的复杂多糖。   条状琼脂为类白色或淡黄色半透明细长条状,粉状琼脂为鳞片状无色或淡黄色粉末,琼脂糖一般为白色粉末。它们在沸水中极易分解成溶胶,在冷水中不溶,但能吸水膨胀成胶块状,溶胶液呈中性反应。   琼脂、琼脂糖因为有特殊的胶凝性质,尤其有显着的稳固性、滞度和滞后性,并且易吸收水分,有特殊的稳定效应;已经广泛应用于食品、医药、化工、纺织、国防等领域。在食品工业中,可用于水晶软糖、定型软糖、水产品、肉类罐头、果汁饮料、果肉饮料、米酒饮料、乳品饮料、乳品蛋糕等的生产。   琼脂糖除了有跟琼脂同样的性质以外,还具有纯度更高、电渗小、凝胶强度高、无色等特性,在临床检验,生化分析, 蛋白质、酶、核酸、抗原、抗体、病毒和多糖的分离纯化,以及高级药物的制备等方面都已广泛应用。   琼脂糖也是制药厂制作胶囊药品外壳胶囊的唯一主料。还可用作代血浆的制造,也常用作安定剂与乳化剂。由于其良好的生物相容性又广泛用于生物分离介质的生产。简单地说,把琼脂中的琼脂果胶去掉,剩下的部分,就是琼脂糖。   据悉,琼脂和琼脂糖的用途约有一千多种。其中,琼脂除了可直接食用外,还在科学研究领域中、工业领域中、医药领域中有着广泛的用途。随着世界科技的发展,认识琼脂和琼脂糖的人越来越多,很多行业人抓住这个机遇,迅速加以利用,在各种相关产品中加入琼脂,使琼脂的利用率快速增长,前景甚好。查看更多
生物指示剂与化学指示剂的区别你知道吗? 基本信息生物指示剂是一类特殊的活微生物制品,可用于确认灭菌设备的性能,灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等。 生物指示剂的定义: 对特定灭菌处理有确定的抗力,并装在内层包装中可供使用的染菌载体。用于确认灭菌设备的性能,灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等。 生物指示剂分类: 1)按结构分可分为片状生物指示剂(strip biological indicator)和自含式生物指示剂(self-contained biological indicator);片状生物指示剂需要使用阳性对照和阴性对照,而自含式生物指示剂只需要阳性对照即可。 2)根据ISO 11138 -1(2006)的分类,目前的生物指示剂有环氧乙烷灭菌用生物指示物、湿热灭菌用生物指示物、干热灭菌用生物指示物、过氧化氢低温等离子灭菌生物指示物和甲醛灭菌用生物指示物。 3)按培养时间可分为通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。通用型生物指示剂根据芽孢复苏后指示菌种新陈代谢引起培养液pH值改变,通过酸碱指示剂变色来进行判读,时间一般在24或48小时以上;而快速型生物指示剂根据芽孢复苏后的酶促反应,通过荧光进行判读,时间一般为3-4小时。同时国外正在研发更加快速的生物指示剂,有望在1小时之内得出结果。 生物指示剂重量质量特性: 1)芽孢含量 2)D值(生存曲线法测定) 化学指示剂 主要的作用是告诉客户,该产品已经经过灭菌处理。但是经过灭菌处理的产品不等于灭菌效果是合格的。如果客户要确认该产品是否灭菌合格,就必须要通过生物指示剂的检测报告来得知。化学指示剂不能确认产品是否灭菌合格的原因,是因为他的原理决定的。只要化学指示剂中的变色油墨接触到环氧乙烷气体,就会产生化学作用而变色。而影响灭菌合格的因素有很多,环氧乙烷气体的浓度,纯度,温度,湿度,压力,时间等等,是一个非常复杂的过程。化学指示剂只能体现其中有没有环氧乙烷这个因素。而没有办法表现其他的因素,所以是没有办法决定最终的灭菌效果的。查看更多
优级纯、分析纯、色谱纯、色谱试剂都有啥区别? 试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯试剂、光谱纯试剂、基准试剂、分光纯试剂、优级纯试剂、分析试剂和化学纯试剂等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。选用不同纯度试剂的标准主要是不同的反应需求,以及该试剂所含杂质对分析要求有无影响。 按照国家标准,根据试剂中所含杂质的多少,划分为三个等级国对比如下: 实验试剂(LR:Laboratoryreagent),又称四级试剂。 除了上述四个级别外,目前市场上尚有:化学试剂;基准试剂:专门作为基准物用,可直接配制标准溶液; 光谱纯试剂(SP):表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥99.99%)。 目前,国外试剂厂生产的化学试剂的规格趋向于按用途划分,常见的如下:生化试剂(BC:Biochemical) 生物试剂(BR:Biologicalreagent) 生物染色剂(BS:BiologicalStain) 络合滴定用(FCM:ForComplexometry)试剂。 定义及分类 试剂纯化工产品纯度就是原料的纯净程度,相对来说也是指原料的含杂程度。纯度越高的原料所含的杂质种类和数量越少。化工原料按纯度可分为工业纯和试剂纯二大类。而试剂纯的原料按纯度高低又可分为四级。对化学试剂,我们习惯上有许多混乱的称谓: 以含量为基础的称谓 标准物质、标准溶液、标准杂质溶液、标准对照品、标准样品、行标试剂、指示试剂、基准物质、基准试剂、化学基准、化学标准、仪器标准、分析试剂、一类试剂、二类试剂、超纯试剂、高纯试剂、当量试剂、医药标准、农药标准、光谱纯、色谱纯、电子纯、钢铁标样、生铁标样、煤标样、矿石标样等…… 以用途为基础的称谓 化学试剂、通用试剂、分析试剂、诊断试剂、教学试剂、实验试剂、分离工具、缓冲溶液、指示试剂、生物染色素、感光材料、合成试剂、中间体、化工原料、水质分析、残留农药测试、分子生物学试剂…… 以来源为基础的称谓 进口试剂、天然物提取、浸膏、干粉、提取物…… 以习惯为基础的称谓:化学药品、精细化学品、药品、冷偏试剂、特种试剂、一类试剂、二类试剂、三类试剂、小品种试剂…… 以性质为基础的称谓 无机试剂、有机试剂、同位素及标记化合物、生化试剂、氨基酸及其衍生物、蛋白质与多肽、核苷酸及其衍生物、单糖与多糖、酶和辅酶、抗生素、维生素、染料及色素、培养基、层析介质、电泳介质、生物缓冲剂…… 化学纯:是指一般化学试验用的,有较少的杂质,不妨碍实验要求。 分析纯:是指做分析测定用的试剂,杂质更少,不妨碍分析测定。 色谱纯:色谱纯试剂是在最高灵敏度下以10-10克下无杂质峰来表示的。是指进行色谱分析时使用的标准试剂,在色谱条件下只出现指定化合物的峰,不出现杂质峰。 实验纯:代号LP,一般使用黄标签,纯度较差,杂质含量不做选择,只适用于一般化学实验和合成制备。 超高纯试剂:UP-S级(也就是MOS级):金属杂质含量小于1ppb,适合 0.35—0.8微米集成电路加工工艺。 等离子体质谱纯级试剂(ICP-Mass Pure Grade):绝大多数杂质元素含量低于0.1ppb,适合等离子体质谱仪(ICP Mass) 日常分析工作。 等离子体发射 光谱 纯级试剂(ICP Pure Grade):绝大多数杂质元素含量低于1ppb,适合等离子体发射光谱仪(ICP) 日常分析工作。 原子吸收 光谱纯级试剂(AA Pure Grade):绝大多数杂质元素含量低于10 ppb,适合原子吸收光谱仪(AA) 日常分析工作。 优级纯与色谱纯的区别 试剂纯度级别:农残级 色谱级 优级纯 分析纯。 优级纯与色谱纯纯度都很高,色谱纯主要是指对吸光物质的限量作为指标考察。但是,优级纯的试剂里含有微量(甚至痕量)的具有紫外吸收的物质,对于化学反应来说,这些物质可能并不影响,但是做液相实验干扰就大了,常用于精密分析试验,可作为基准物质。 色谱纯是指色谱专用溶剂或者试剂,在低波长处的透光率比较好。也特指进行色谱分析时使用的标准试剂,在色谱条件下只出现指定化合物的峰,不出现杂质峰。避免了一些不良影响。 一般情况下都用色谱纯,在气质时用农残级。 色谱试剂与色谱纯试剂区别 两个截然不同的概念,色谱纯是指试剂的纯度而色谱试剂是指试剂应用的对象。色谱纯试剂纯度发很高,除要求含量高以外,还对微尘、水分都有很高的要求,属于高纯试剂的范畴。而色谱试剂是指用于色谱分析、色谱分离、色谱制备的化学试剂。因色谱种类多,过程复杂,故又把色谱试剂分类成各种不同的色谱试剂如:气相色谱试剂、高压液相色谱试剂、薄层色谱试剂、柱层析色谱试剂、离子色谱试剂、离子对色谱试剂等。而各种色谱试剂中根据用途的不同,又分为色谱标准物、色谱固定相、色谱固定液、色谱担体、高压液相色谱淋洗剂、离子标准液、离子对试剂。 色谱试剂通常泛指用于色谱分析,包括各种色谱仪器、色谱方法上所用的试剂,对试剂没有强制的纯度或一定数据数值规定,如用于气相色谱固定液、簿层层析用等;色谱纯试剂已经提升到“纯”的要求和规定,就应该有纯度或一定技术数据和数值的规定,至少要有一项标准规范,不然,不同产地的“色谱纯”会得出相同的结果吗?那么为什么有了液相色谱的HPLC溶剂,还要有农残级溶剂,上世纪液相色谱还有用AR级溶剂作流动相的。所以,GB/T 22388—2008 中的3.2.1 甲醇:色谱纯、3.2.2 乙腈:色谱纯,其“色谱纯”应该更明确一些出处或制定配套标准。 GC级色谱纯与HPLC级色谱纯区别 色谱纯是指试剂的纯度而色谱试剂是指试剂应用的对象.色谱纯试剂纯度发很高,除要求含量高以外,还对微尘、水分都有很高的要求,属于高纯试剂的范畴. 而色谱试剂是指用于色谱分析、色谱分离、色谱制备的化学试剂.因色谱种类多,故又把色谱试剂分类成各种不同的色谱试剂如:气相色谱试剂、高压液相色谱试剂、薄层色谱试剂、柱层析色谱试剂、离子色谱试剂、离子对色谱试剂等.而各种色谱试剂中根据用途的不同,又分为色谱标准物、色谱固定相、色谱固定液、色谱担体、高压液相色谱淋洗剂、离子标准液、离子对试剂. 色谱纯(GC):气相色谱分析专用.质量指标注重干扰气相色谱峰的杂质.主成分含量高. 色谱纯(LC):液相色谱分析标准物质.质量指标注重干扰液相色谱峰的杂质.主成分含量高 化学试剂有效期 化学试剂在贮存、运输和销售过程中会受到温度、光辐照、空气和水份等外在因素的影响,容易发生潮解、霉素、变色、聚合、氧化、挥发、升华和分解等物理化学变化,使其失效而无法使用。因此要采用合理的包装,适当的贮存条件和运输方式,保证化学试剂在贮存、运输和销售过程中不变质。对一些对贮存和运输有特殊要求的应按特殊要求办理。有些化学试剂有一定的保质期,使用时一定要注意。 化学试剂的有效期随着化学品的化学性质的改变,有着很大的区别。一般情况下,化学性质稳定的物质,保存有效期就越长,保存条件也简单。 稳定性判断原则 初步判断一个物质的稳定性,可遵循以下几个原则: 无机化合物 只要妥善保管,包装完好无损,可以长期使用。但是,那些容易氧化、容易潮解的物质,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。 有机小分子量化合物 一般挥发性较强,包装的密闭性要好,可以长时间保存。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。 有机高分子 尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料,极易受到微生物、温度、光照的影响,而失去活性,或变质腐败,故此,要冷藏(冻)保存,而且时间也较短。 基准物质、标准物质和高纯物质 原则上要严格按照保存规定来保存,确保包装完好无损,避免受到化学环境的影响,而且保存时间不宜过长。一般情况下,基准物质必须在有效期内使用。 小结 大多数化学品的稳定性还是比较好的,具体情况要由实际使用要求来判定。如果分析数据作为一般了解,或者分析结果没有特定的准确要求,如一般教学实验,对化学试剂的质量级别就可以做一般要求。但工厂化验数据为指导生产而用,化学试剂的质量指标绝对不能含糊。而用于一般合成制备使用用的化学试剂,在大多数情况下,使用工业级别的化学试剂就可以满足。但研究型和某些特种化学品的合成制备,有些情况下,对原料的质量要求非常严格,需要严格把关。 还要再次提醒,一定要区分好试剂类型和用途,避免出现该用色谱纯的时候用了分析纯这样的低级错误,而导致实验失败,无形中也浪费了实验试剂,得不偿失哦! 查看更多
ELISA显色淡的原因是什么? 原因一:试剂盒在运输途中时间太长,温度太高。 解决方案:尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温。 原因二:试剂盒未充分平衡。 解决方案:试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。 原因三:培养箱温度不足37℃。 解决方案:注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意。 原因四:保温时间不足。 解决方案:校正定时钟准确定时。 原因五:洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加。 解决方案:按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数。 原因六:移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁。 解决方案:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,一次性使用。 原因七:蒸馏水水质有问题。 解决方案:使用新鲜合格的蒸馏。 原因八:底物作用时间不足。 解决方案:准确定时。 显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可。一般来说,显色时间过短,结果偏低;显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加。 查看更多
试剂过期了咋办?如何处理过期试剂? 实验室试剂在开启后受到空气、水分、光照和温度的影响会发生物理化学变化,发生变质。一个实验室,难免会有或多或少过期的化学试剂。那这些过期的实验室试剂我们该拿它们怎么办呢? 一般来讲,试剂的保质期为1—2年,有些性质稳定的保存期就长点,这取决于保存方法是否恰当。未开启的化学试剂,保质期到了未必就不能用,不要直接丢弃或重新购买,我们要杜绝浪费。 试剂过期了不要紧,只要我们处理好,不对环境造成污染就可以了。过期的试剂处理方法主要有以下几种: 一、溶解法,对于一些无毒的无机物,在水中溶解度较大的,直接溶于水倒掉即可。 二、稀释法,对于实验室内的无机溶液,无毒无害的就直接加水稀释后倒掉。 三、中和法,对于酸碱类物质,可加废酸或废碱至pH接近7后倒掉。 四、烘干法,对于实验室产生的硅胶、已变潮的试剂等,不要丢弃,可以选择适当的温度在烘箱烘干后再重复利用。 五、蒸馏法,对于有机溶剂应尽可能采用蒸馏方法加以回收利用。如无法回收,可分批少量加以焚烧处理。切忌直接倒入实验室的水槽中。 六、分解法, 对于含氰溶液,可采用此法处理。将试液调至pH>10后,通入氯气和加入次氯酸钠(漂白粉),使氰化物分解成氮气和二氧化碳。 七、沉淀法,这种方法一般用于处理含有害金属离子的无机类溶液。处理方法是:在待处理溶液中加入合适的试剂,使金属离子转化为难溶性的沉淀物,然后进行过滤,将滤出的沉淀物妥善保存,检查滤液,确证其中不含有毒物质后,才可排放。 当然(小声说),有朋友建议把过期未开启的试剂返给供应商,集中废液回收处理,也不失为一个安全有效的办法~查看更多
分离培养厌氧菌失误的原因有哪些?   主要是厌氧环境没有保护好。厌氧菌采样后,需要及时接种并提供厌氧环境,暴露在空气中厌氧菌会很快死亡,同时在运送过程中最好保温运送。此外,样品采集时也需要采集深部的标本,厌氧菌感染一般发生在组织深部。   厌氧菌(anaerobicbacteria)是一类在无氧条件下比在有氧环境中生长好的细菌,而不能在空气(18%氧气)和(或)10%二氧化碳浓度下的固体培养基表面生长的细菌。这类细菌缺乏完整的代谢酶体系,其能量代谢以无氧发酵的方式进行。它能引起人体不同部位的感染,包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。查看更多
如何实现高通量的单细胞分选?   单细胞分选通过集成基于介电的单细胞捕获释放和电磁阀吸吮技术,实现了高速流动状态下单细胞的捕获、采集、释放和分选,通量达~60个细胞/分钟。   为了进一步提高通量,研究人员提出,单细胞经液滴包裹后,通过耦合介电可实现高通量分选。   首先,液滴表面凸/凹的形状会产生透镜效应,影响激光聚焦,降低空间分辨率,导致无法获取液滴中细胞的信号。   其次,单细胞液滴包裹需要油相的引入,而油相具有强拉曼背景,会严重影响细胞信号的精确获取。   第三,如何实现采集、分析、单细胞液滴包裹及分选的自动化集成未见先例。研究人员巧妙利用先获取单细胞信号,进行单细胞液滴包裹的策略,有效解决了液滴对信号采集的影响;在线集成液滴发生和分选同步进行,简化了系统操作步骤;   第四、实现了采集、分析、单细胞液滴包裹及分选的高度自动化。查看更多
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这些菌株的区别你还没搞懂? 标准菌株 标准菌株亦称模式菌株,在给某细菌定名,分类作记载和发表时,为了使定名准确和作为分类概念的准则,以纯粹活菌(可繁殖)状态所保存的菌种。相当于动植物分类中的模式标本。在进行细菌等的分类和鉴定时,生理学和生物化学特性十分重要,但若就这些性质进行试验,就必须应用许多纯分离的新细胞。 因此,作为分类标准的菌种,也有必要进行纯粹分离,并以活菌(可以分裂)状态保存。在标准菌种中,对于从作过原始记载的作者实际分离或应用的菌株,通过营养繁殖获得和保存的菌株,称为正标准菌株。此外,当原作者使用复数菌株,以后的研究者选择其中之一作为最适当的菌株时,称该菌种为选定标准菌株。 当原作者使用的菌株失掉,以后的研究者就新的菌株研究,记载后,确认可以作为国际上正标准菌株的代替菌株时,称该菌株为新模式菌株。保存菌种时,必须留心不使菌株在保存过程中死亡或发生变异。最常用的保存方法是冻结干燥法。模式菌株应由适当的菌种保存机构保存。 派生菌株 从技术角度来讲,标准菌株都是从国家认可的机构或者国外菌种保藏机构购买得到的,为0代菌种的冻干粉,在使用前需要进行复苏、传代、鉴定和保藏等工作,并且在使用前需要提前一天进行活化,需要梯度稀释后对其进行计数定量。 而商业派生菌株则是由标准菌株派生出来的,通常为冻干形式,一般是3~5代菌种,它的特点是不需要进行活化、传代、鉴定和保藏,即得即用,无需进行提前活化和梯度稀释,按照厂家提供的说明书操作即可得到所需数量的菌液,大大节省了微生物实验室工作人员的工作负担。 从文件管理方面来讲,使用标准菌株时,从标准菌株到标准储备菌株,再到工作菌株,这一系列的使用过程均应有相应的程序文件和记录,相关的人员一定要进行必要的培训,具备齐全的培训记录;而使用商业派生菌株则只需要由生产厂家提供质检报告和溯源性报告,保证其与标准菌株所有相关特性等效,同时保证其可溯源性。 除此之外,与商业派生菌株相比,标准菌株的使用过程中对于硬件设施及耗材的投入相对较大,成本也并不比商业派生菌株低。 在微生物检验领域,商业派生菌株的应用范围和标准菌株并无明显区别,可用于药检中的灵敏度试验、促生长试验、无菌检查、培养基适用性检查、控制菌检查等;食品检验的定量、定性对照、培养基质控等;化妆品微生物检验质量控制。 质控菌株本质上是标准菌株的商业衍生产品,其应有可靠的溯源证明追溯至其使用的标准菌株来源,在微生物实验室仅可作为工作菌株进行使用,在使用前也应进行特性和纯度的确认。 质控菌种基本上分为两类: 第一种满足低浓度接种量的要求,细菌含量一般小于100cfu,这是各种微生物培养基促生长试验、微生物阳性对照试验的接种量要求,无菌工艺模拟试验中培养基的灵敏度检测、无菌或微生物限度检查实验方法验证等。 为了满足高浓度接种的需要,其他种类的细菌含量一般为105-106cfu。是对防腐剂、抑菌剂、消毒剂等抗菌活性物质功效的试验或挑战性试验。这种实验对对数滴的微生物有统计要求,因此需要相对高浓度的细菌溶液。 质控菌种的优势: 1、精确的CFU已知应变个数降低实验失败率 这个优势真的很棒。实验室至少需要3-6个月的时间,才能建立稳定的各种菌株的稀释定量方法。培养人员有效实施该方法需要3个月的时间。购买菌株的原始情况不同。即使同一菌株、同一复苏方法、培养条件、培养时间、同一稀释方法各不相同,但稀释的细菌数量仍不相同。 每一个微生物实验室必须在同一天对供试品进行稀释和添加后,发现第二天的计数结果超标,或第二天在冰箱中取出的菌液中的菌株全部死亡,没有阳性反应,这些实验都需要重做,如果是原料试验或成品试验,很难解释,因此质量控制菌菌株的稳定、定量特性对实验室具有重要意义,大大提高了微生物实验的成功率。 2、质控菌种的CFU数量稳定,减少了样品之间的差异 这在各种微生物检验中非常有用,因为需要对各种样品进行比较。如果加菌量相差较小,则评价结果更为准确。例如,试验样品阳性的实际添加量为10 CFU,阳性对照的实际添加量为90 CFU。虽然它们都满足 如果只看无菌试验中菌株的生长情况,可能对弱生长和好生长有不同的判断,也可能影响定量试验的回收率。但如果我们使用质控菌种,我们可以更准确地判断结果,避免此类问题。 3、大大缩短实验准备时间,使用方便,降低成本 传统的菌种实验需要经过菌种回收、培养、稀释等过程,还需要准备培养基和消耗品配合实验。例如,黑曲霉的培养需要5-7天,加上实验,至少在制备前7天。 但质控菌种实验只需要无菌水和具有一定无菌操作能力的人员加上使用移液枪的能力普通实验室人员可以胜任对实验中难以控制的菌株如铜绿假单胞菌和黑曲霉的控制。另一方面,也可以降低人员成本。查看更多
化学试剂开瓶后还能用多久? 按照中华人民共和国GB15346-94化学试剂包装标准规定: 第9.1.1.M规定:要求注明有效期的必须注明有效期;生产日期或生产批号。 我国化学试剂的分类: 优级纯(GR,绿标签):主成分含量很高、纯度很高,适用于精确分析和研究工作,有的可作为基准物质。 分析纯(AR,红标签):主成分含量很高、纯度较高,干扰杂质很低,适用于工业分析及化学实验。 化学纯(CP,蓝标签):主成分含量高、纯度较高,存在干扰杂质,适用于化学实验和合成制备。 实验纯(LR,黄标签):主成分含量高,纯度较差,杂质含量不做选择,只适用于一般化学实验和合成制备。 指示剂和染色剂(ID或SR,紫标签):要求有特有的灵敏度。 指定级(ZD):按照用户要求的质量控制指标,为特定用户订做的化学试剂。 电子纯(MOS):适用于电子产品生产中,电性杂质含量极低。 当量试剂(3N、4N、5N):主成分含量分别为99.9%、99.99%、99.999%以上。 化学试剂有效期 :化学试剂在贮存、运输和销售过程中会受到温度、光辐照、空气和水份等外在因素的影响,容易发生潮解、霉素、变色、聚合、氧化、挥发、升华和分解等物理化学变化,使其失效而无法使用。因此要采用合理的包装,适当的贮存条件和运输方式,保证化学试剂在贮存、运输和销售过程中不变质。对一些对贮存和运输有特殊要求的应按特殊要求办理。有些化学试剂有一定的保质期,使用时一定要注意。 化学试剂的有效期随着化学品的化学性质的改变,有着很大的区别。一般情况下,化学性质稳定的物质,保存有效期就越长,保存条件也简单。初步判断一个物质的稳定性,可遵循以下几个原则: 无机化合物,只要妥善保管,包装完好无损,可以长期使用。但是,那些容易氧化、容易潮解的物质,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。 有机小分子量化合物一般挥发性较强,包装的密闭性要好,可以长时间保存。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等,在避光、荫凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否合乎规定。 有机高分子,尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料,极易受到微生物、温度、光照的影响,而失去活性,或变质**,故此,要冷藏(冻)保存,而且时间也较短。 基准物质、标准物质和高纯物质,原则上要严格按照保存规定来保存,确保包装完好无损,避免受到化学环境的影响,而且保存时间不宜过长。一般情况下,基准物质必须在有效期内使用。 以上实验室的各种化学试剂开瓶后的有效期介绍!希望能给大家带来帮助。查看更多
简介
职业:上海古朵生物科技有限公司 - 销售经理
学校: -
地区:上海市
个人简介:上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多
企业简介
企业名称:上海古朵生物科技有限公司
企业性质:贸易商,代理商,
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