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PCR产物的检测方法你知道几种? PCR产物的检测方法：琼脂糖凝胶电泳这是实验室最chang用的方法，简便易行，只需少量DNA即可进行实验。其原理是不同大小的DNA分子通过琼脂糖凝胶时，由于泳动速度不同而被分离，经溴化乙锭（EB）染色，在紫外光照射下DNA分子发出荧光而判定其分子的大小。用于电泳检测PCR产物的琼脂糖浓度常为1%—2%，应该使用纯度高的电泳纯级琼脂糖，这种琼脂糖已除去了荧光抑制剂及核酸酶等杂质。（1）制胶琼脂糖凝胶厚度约为3~5mm。过薄则加样孔样品会溢出来，过厚观察时荧光穿透不强以至有些小片段DNA带型不易分辨。如配制2%凝胶100ml，称取琼脂糖2g于三角瓶中，加入100ml 0.5×TBE液，微波炉加热2-5min，使琼脂糖完全溶解（注意不要暴沸），置室温等温度下降至60℃时，加入终浓度0.5μg/ml的EB液，充分混匀后倒板（注意排除气体）。（2）加样和电泳上样时一般取PCR反应液5~10μl，加入3μl溴酚兰液，充分混匀，加入凝胶加样孔中。电泳仪可用一般稳压可调中压电泳仪，电泳工作液为0.5×TBE液，接通电源，使样品由负极向正极移动。60-100V恒压电泳约30-60分钟。（3）检测将凝胶板放在紫外透射仪的石英玻璃台上进行检测，DNA产物与荧光染料EB形成橙黄色荧光复合物。观察各泳道是否有橙黄色荧光带出现，并与扩增时所设的阳性对照比较，判断阳性或阴性结果。也可在电泳时以标准分子量作对照，判断其扩增片段是否与设计的大小相一致。聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖凝胶电泳繁琐，但在引物纯化、PCR扩增指纹图、多重PCR扩增、PCR扩增产物的酶切限制性长度多态性分析时常用到。聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨DNA--pian 段的有效范围： (1)制胶在两块制胶玻璃板中间放上垫片，放上制胶架，拧紧制胶螺丝夹紧玻璃板。制备适量合适浓度的凝胶，使之略多于胶板。制备100μl体积凝胶的配制方法见下表。不同浓度（%）聚丙酰胺凝胶的制法：在加入TEMED和10%过硫酸铵后，立即混匀，倒入放置45℃角的玻璃板内，完全注满（注意不要有气泡），迅速将玻璃板放置水平位置。立即放成型梳子于腔顶并夹紧，待30-60分钟胶聚合后，取下胶板，放入电泳槽中固定。（2）加样和电泳上下槽中加入1×TBE电泳缓冲液，溢过加样孔，拔出梳子，排出加样孔中的气泡，将PCR产物或限制性内切酶消化产物2与1上样缓冲液混匀，用微量注射器加入加样孔底部，使样品在孔底成一层，两侧孔中加入标准分子量的DNA Marker。以2-10V/cm电压电泳，电泳时间足够长，使片断足以分开，待指示剂走到适宜位置时关闭电源，将胶片取出。（3）银染分开两块玻璃板，将凝胶片放入100ml银染固定液中振荡15min，双蒸水洗3次，每次2min，然后将凝胶片转入100ml 0.2%的AgNO3中于摇床上染色约10min，吸去AgNO3液，用双蒸水洗3次，每次30s，加入100ml显色液约7-10min，待DNA带显示清除时，吸去显色液，加入固定液Na2CO3，静置2-3min，取出凝胶观察。查看更多

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实验室试剂、器皿使用管理制度你知道吗? 试剂、器皿使用管理制度 1.试剂、器皿应有专人保管，分类存放，并定期检查使用及保管情况。领用时需填写记录，过期或失效试剂要经审核后作报废处理。 2.实验室内保存的少量易燃易爆试剂要放在远离加热操作台的阴凉通风处保管。 3.剧毒、危害及易制du品试剂应存放在仓库的专柜内，由两人以上人员保管，领用时要填写相关记录。 4.称取化学试剂的器皿应洗涤干净，分开使用。固体试剂的取用遵循“只出不进，量用为出”的原则；液体试剂的取用遵循“只准倾出，不准吸出”的原则。 5.挥发性强的试剂必须在通风橱内取用。使用挥发性强的有机溶剂时要注意避免明火，决不可用明火加热。 6.纯度不符合要求的试剂，必须经提纯后再用。 7.配制各种试剂和标准溶液必须遵守操作规程，配后立即贴上标签，注明名称、浓度、配制日期、有效期和配制人，以免拿错用错。小编提醒您使用和保管各种试液和标准溶液应按照《试剂、标准溶液的使用和保管规定》执行。 8.不得使用过期试剂。实验室内务注意这11点 1、制定内务管理程序。分为不同的工作区域，针对不同的工作区特点，不同的工作区域的内务管理可以不同。 2、在工作面不放置过多的实验室耗材。实验耗材放置在zhi定的位置，最好和相关仪器放置在一起，工作面放置的耗材过多一是不安全，二是耗材比较容易污染损坏。 3、应时刻保持工作区整洁有序。做好工作区域的卫生，工作区域实施、仪器摆放按照一定的顺序摆放。 4、应zhi定专人使用经核准的方法进行内务工作。若果有必要，内务工作需要按照一定的方法进行，特别涉及到生物安全，放射等危害健康的实验室。 5、如果需要，不同风险区的内务程序和装备不应混用。针对如微生物、放射性等危害健康安全的内务，各个区域的程序和装备不同，不要混用这些装备。 6、在安全处置后对被污染的区域和可能被污染的区域进行内务工作。 7、制定日常清洁（如消毒灭菌）计划。 8、zhi定专人监督内务工作，定期评价内务工作的质量。 9、实验室的内务规程和所用材料发生改变时应通知实验室负责人。 10、实验室规程、工作习惯或材料的改变可能对内务人员有潜在危险时，应通知实验室负责人并书面告知内务管理负责人。 11、发生危险材料溢洒时，应启用应急处理程序。查看更多

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实验室测试样品管理的重要性? 测试样品是从整批商品中抽取出来作为产品质量检测所需，它的作用是，依据判定标准和测试结果并将生产出的产品作为买卖交易中商品的交付标准而做一判定。因此，任何一个检测实验室必须对测试样品进行规范管理。如何做好样品的管理，笔者认为，须从以下几个方面做好样品管理工作。测试样品的获取测试样品的获取一般有这么几个渠道，一是顾客送样，二是实验室接受委托，到采样现场进行样品的采集，将采集的样品做为实验室测试样品。这个环节是基础，无论是客户送样还是实验室自己采集样品，都要认真对待。特别是客户委托对产品进行判定的情况下，一定要在样品获取环节将工作做细。一旦因为样品的代表性差，而对产品批质量做出错误的判定，那将给实验室带来很大的麻烦和损失。特别是实验室接受采样委托，到客户现场进行样品采集时，要严格按照采样标准和客户约定的技术要求，做好采样操作和记录，包括样品的详细信息，采样时的环境条件，采样照片或者音视频，样品封签，都必须一一记录。测试样品的流转实验室获取测试样品后，要尽快对测试样品进行测试。样品进入实验室后，按照样品管理程序，对样品进行编号登记，由样品管理员完成上述工作后，将样品按照测试项目的先后，将样品传递到测试实验室。在这个过程中，样品管理员和测试人员对样品的交接和流转一定得仔细认真，不可出现差错。样品的保存样品保存作为实验室管理的重要一环，实验室都很重视，也比较规范。这里要重点讲到的是，保存的环境条件。一些样品在保存中，对存贮条件要求较高，温度、湿度、微生物、细菌，洁净程度等都有要求，一旦存储的环境条件不满足样品的保存条件，在不符合条件的环境下保存样品，样品就会很快变质。如果对改变后的样品进行测试和判断，实验室的责任风险将是必然，因此，必须对样品的保存环境进行控制。针对样品的存贮要求，实验室应配置相应的环境条件控制设施，以便存储温度、湿度、洁净度等满足存贮要求。样品的处置样品的处置，大多实验室做的很好。处置环节，在按照样品处置程序进行处置的情况下，笔者重点提醒的是，对于高价值样品一定要争的客户的处置同意，必要时须有书面的合同约束，一旦发生纠纷可以较好的维护实验室自身利益。查看更多

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如何正确的进行血清灭活? 加热可以灭活补体系统。启动的补体系统参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究中，培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。实验显示，热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的，对于非必须的细胞来说血清灭活对于细胞生长只有微小甚至无任何作用，还可能造成生长速率降低，沉淀物还会显着增多，不利于细胞观察。因此，若非必须，不需要对血清进行灭活处理。将需要进行处理的血清置于56℃水浴30min，建议加放空白对照（同体积水）使用温度计测温，以测得温度为56℃时为计时起始点，加热中可不时轻度旋转混匀血清。查看更多

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标准品、对照品、校准品、质控品及参考品的区别? 1.1标准品是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质，用于生物测定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，按效价单位或（mg）计，以国际标准品进行标定。（摘自《中国药典》2010年版） 1.2对照品是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质，除另有规定外，均按干燥品（或无水物）进行计算后使用。（摘自《中国药典》2010年版） 1.3校准品即：校准物，具有在校准函数中用作独立变量值的参考物质；应具有定值和已知的测量不确定度，其目的应是校准某一测量系统，从而建立此系统测量结果的计量学溯源性。（摘自GB/T21425-2008、《体外诊断试剂校准品（物）、质控品（物）研究技术指导原则》） 1.4质控品用于体外诊断的质量控制物质(定值和非定值)，是一种旨在用于医学用途的检测系统中使用的物质、材料、物品或设备，其目的是评价或验证测量精密度、测量准确度、由于试剂或分析仪器的变化检测系统可能产生的分析偏差等性能特征。质量控制物质(定值和非定值)，可用于能力验证、实验室内质量控制。（摘自《体外诊断试剂校准品（物）、质控品（物）研究技术指导原则》） 1.4.1定值质控品定值质控品有制造商使用合适的分析方法或过程分析的参考值，并指定参考范围； 1.4.2非定值质控品非定值质控品可以在标贴上标示目标浓度（如：低、高、中），但是没有指定的参考范围，可以不用指定非定值质控品应用的分析测试系统，但需满足质量控制的系统规则。 1.5参考品即：参考物质，具有一种或多种足够均匀和很好地确定了的特性，用以校准测量装置、评级测量方法或给材料赋值的一种材料或物质。（摘自GB/T21425-2008）查看更多

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菌落蔓延的原因有哪些? 菌落蔓延主要有两个原因，一是操作不当；二是样品中含有变形杆菌等运动性强的细菌。操作中需要注意3个关键点：（1）倾注培养基时摇晃平皿使其混合均匀，减少菌块；（2）样品稀释后，尽快倾注平板。从稀释到倾注结束时间控制在30 分钟之内，避免样液干涸造成菌落成团；平板凝固后马上倒置。（3）若样品中含有变形杆菌，则可以覆盖一层培养基。查看更多

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细胞坏死性凋亡和细胞凋亡吗? “凋亡”（Apoptosis）对大家来说是非常熟悉的了，它是一种细胞程序性死亡，相对于细胞坏死，细胞凋亡是细胞主动实施的。细胞凋亡一般由生理或病理性因素引起，而细胞坏死则主要为缺氧造成。在细胞凋亡过程中，细胞缩小，DNA被核酸内切酶降解；而细胞坏死时，细胞肿胀，细胞膜被破坏，通透性改变。相比起细胞坏死，细胞凋亡是更常见的细胞死亡形式。细胞坏死性凋亡（Necroptosis）它具有典型的坏死样形态：细胞膜被破坏，细胞、细胞器肿胀，乃至崩解；而核内染色质无明显的形态改变；坏死性凋亡与凋亡和自噬有明显的区别，三者可以通过光、电镜观察和PI染色得到明确的区分。其次, 坏死性凋亡会引起显着的炎症反应，表现为大量的炎症细胞浸润和激活。查看更多

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实验室试剂的有效期怎么定? 试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。在实际使用过程中，人们总是习惯于用生产日期来判断化学试剂的有效性，其实这是不对的。化学试剂不像食品和药品有严格的保质期，化学试剂一般没有保质期的具体要求和界限，这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关。要根据化学性质、保存条件等，再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用。化学试剂一般没有注明保质期，确定试剂是否变质主要是凭经验和做新旧试剂对比试验。化学试剂的有效期随着化学品的化学性质的改变，有着很大的区别。一般情况下，化学性质稳定的物质，保存有效期就越长，保存条件也简单。一般遵循以下几个原则（一般原则，不是绝对原则）： 01、无机化合物，只要妥善保管，包装完好无损，大部分可以长期使用。特殊试剂要根据试剂性质选择保存条件及确定有效期，例：亚硫酸盐、苯酚、亚铁盐、碘化物、硫化物等应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放；水溶液亚硫酸、氢硫酸溶液要密封存放；钾、钠、白磷更要采用液封形式；容易潮解的物质，在避光、阴凉、干燥的条件下，只能短时间（1～5 年）内保存。 02、有机小分子量化合物一般挥发性较强，包装的密闭性要好，可以长时间保存（3～5 年）。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等，在避光、阴凉、干燥的条件下，只能短时间（1～5 年）内保存，具体要看包装和储存条件是否符合规定。 03、有机高分子，尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料，极易受到微生物、温度、光照的影响，而失去活性，或变质腐败，故此，要冷藏（冻）保存，而且时间也较短。 04、基准物质、标准物质和高纯物质，原则上要严格按照保存规定来保存，确保包装完好无损，避免受到化学环境的影响，而且保存时间不宜过长。一般情况下，基准物质必须在有效期内使用。在常温（15?C~25?C）下保存时间一般不超过 2个月。超过两个月要重新标定或检查之后再用。 05、培养基：按规定配制并消毒好培养基，冷至室温，保存在阴暗处（尽可能贮藏在冰箱内），配制好的培养基应在1个月内用完。 06、除另有规定外，试液、缓冲液、指示剂（液）的有效期均为半年。液相用的流动相、纯化水有效期为 15 天。 07、除另有规定外，液体试剂开启后一年内有效，固体试剂开启后三年内有效。 ①空气的影响空气中的氧易使还原性试剂氧化而破坏。强碱性试剂易吸收二氧化碳而变成碳酸盐，水分可以使某些试剂潮解、结块；纤维、灰尘能使某些试剂还原、变色等。 ②光的影响日光中的紫外线能加速某些试剂的化学反应而使其变质（例如银盐、汞盐、溴和碘的钾、钠、铵盐和某些酚类试剂) 。 ③杂质的影响不稳定试剂的纯净与否、对其变质情况的影响不容忽视。例如纯净的溴化汞实际上不受光的影响，而含有微量溴化亚汞或有机物杂质的溴化汞遇光易变黑。 ④贮存期的影响不稳定试剂在长期贮存后可能发生歧化聚合，分解或沉淀等变化。在贮存期和有效期内液体如发现有分层、浑浊、变色、发霉等异常现象，流动相用于样品检测时，样品的保留时间或相对保留时间发生明显变化，固体如发现吸潮、变色等异常现象则应停止使用。查看更多

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如何获得准确的检测结果值? 实验室提高检验质量对检测结果质量控制的技术要点，包括：正确记录测量观察值、准确计算检验结果、合理报告与判定检测结果、严格数据处理与控制。检测结果是质检机构依据国家各级现行标准检验各类样品的质量向社会和政府部门提供的特殊“产品”，它还是技术监督部门、法院等单位执法的重要依据。关于检测结果的处理，在日常检测工作中发现几种不当做法：一是检测过程中记录的有效位数过少。特别是遇到以“0”结尾的数字时，不记录末尾的“0”，认为这样做不影响检测结果。实际上虽不影响检测结果数值的大小，但影响检测结果的有效位数，即影响检测结果的准确程度。二是检测结果保留的有效位数过多。第一种原因是不懂有效数字的计算规则，无意中多保留，第二种原因是故意多保留，希望以此“提高”结果的准确程度。三是在对外出具的检验报告或者提交各级主管部门的总结材料中照搬检验原始数据, 不知按检验方法要求合理保留检测结果的有效数字位数，更不知按评判(限量值、指标值)标准换算计量单位，或换算计量单位时任意增减有效数字位数，这些做法都会影响检验机构的公正性、权威性。因此质检机构的质量管理一个关键环节就是对检测结果的质量控制，它是确保检测数据的准确性，检验结论的科学性和公正性，并具有可追溯性的重要环节。查看更多

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滴定分析结果出现差异咋办? 对于任何滴定分析，shou先要了解什么样的精度要求才是有意义和必须的。然后如果发现一些结果还是超出了误差范围，你就要从以下几点去找原因：如果是滴定仪自身的问题，可从哪方面来进行检查？ a) 馈液管的末端是否有虹吸滴定头，并且工作是否正常? 该滴定头是为了防止滴定剂扩散到样品中去。如果失去滴定头，滴定剂就会流入到滴定池中，并和样品反应。但这部分的消耗量是不被计算在内的，因此就能导致比较大的标准偏差。 b) 滴定管应检查是否漏气？如果接头没有拧紧或阀的工作不正常，就可能出现漏液。在这种情况下，并不是所有滴定仪馈送的滴定剂都加入到样品中去。由于这种影响不具有重复性，就会导致较大的标准偏差。 c) 滴定管中存在有气泡？这通常是由滴定剂中所溶解的气体如CO2、SO2或O2造成的。因此滴定剂在使用前应有个脱气过程，如放置在超声波水浴中。滴定瓶托架作为滴定仪的一个附件可以将滴定瓶提升至与滴定管一样的高度，这就确保在充满滴定管时不会出现负压而造成脱气。卡尔菲休滴定所用试剂由于溶解有SO2，对此极为敏感，因此，在DL31/DL38卡尔菲休滴定仪中，可以适当降低其充液速度。适合滴定分析的化学反应，应该具备什么条件？（1）反应必须按方程式定量地完成，通常要求在99.9%以上，这是定量计算的基础。（2）反应能够迅速地完成（有时可加热或用催化剂以加速反应）。（3）共存物质不干扰主要反应，或用适当的方法消除其干扰。（4）有比较简便的方法确定计量点（指示滴定终点）。滴定结果有误，结果总是平时的一半或两倍，原因是什么？这可能有多种原因。结果恰好是预期值的一半或两倍说明这是由于系统误差造成的。首先要做的就是在安装数据中检查为滴定剂所设定的滴定管体积是否与实际相符。滴定剂清单包含所有与滴定剂相关的信息：名义浓度，滴定管体积，所在驱动器以及在滴定度测定后自动储存的当前滴定度值。如果指定的是5mL的滴定管，但实际使用了10mL的滴定管，那么计算结果就只有预期值的一半，反之亦然。另一种原因可能在于滴定剂的浓度。在结果的计算过程中，名义浓度乘以滴定度才能得到实际浓度，因此错误的名义浓度就可能导致错误的结果。例如：在滴定剂清单中给出的NaOH浓度是0.5 moL/L，而实际上你用的是1.0moL/L的溶液，那么你的结果也就只有预期值的一半了。此外，滴定反应的平衡数z也必须准确，也就是要知道反应的化学计量关系是什么，是不是1:1的反应。错误的平衡数也必将导致结果变成预期值的一半或两倍。滴定终点和等当点有何区别？终点滴定(EP)指传统的滴定步骤：滴定剂持续加入直至反应终止，如用指示剂指定时观察到颜色的变化。对于全自动电位滴定仪来说，持续滴定样品直至达到原先设定的某值，如pH=8.2。等当点是被分析物和试剂的浓度正好相同的那个点。多数情况下，该点完全等同于滴定曲线的回归点，如酸/碱滴定的滴定曲线。曲线的回归点由相应的pH或电位值及滴定剂消耗量(mL)来定义。等当点由浓度已知的滴定剂的消耗量计算得出。通过浓度和滴定剂消耗量能算出已与样品反应的物质的量。全自动电位滴定仪根据滴定曲线应用专用数学评估步骤评估测量点，然后再依据这条评估后的滴定曲线计算出等当点。天平的精度该为多少才能保证或得准度及精度的结果？这个问题的答案涉及许多内容，如预期结果和样品的均匀程度，两者都决定了最佳的样品量、最终结果的小数位及所需的最终结果精度。一般而言，操作者必须对样品量至少设置四个重要指标。以下是一些建议：样品量与小数位的对应关系： 1-10g.............................3 0.1-1g............................4 0.01-0.1g.......................5 电极该保存在哪？要保存一支复合电极，理想的情形是电极处于平衡状态。主要是指电极的参比部分，其经常发生电解质的流动。多数情况下，最佳的介质是电极参比系统所用的电解质，因为这样能保证液络部没有电解质流动。对于半电池电极，有三种主要类型：第一种自然是pH半电池，其最jia的保存介质是pH7缓冲液。第二种常用的半电池则是离子选择性电极(ISE)。短期保存时使用被测离子的稀释溶液(0.001M)能保证电极始终处于备用状态;长期保存时，大多数ISE则干藏。第三种半电池是双液络部(或单液络部)参比电极。如果短期的话，这种电极应保存在盐桥电解质中，如长期则须清空并干藏。该用那种电极进行非水滴定？总的来说，进行非水滴定时有三种主要电极问题。（1）水性电解质和非水溶剂的问题。更换电极电解质马上就能解决问题。（2）问题与样品不导电有关，其会导致测量和参比半电池间或复合电极的某些部分的电路不畅，从而使信号噪声大，这种情况在使用带标准陶瓷液络部的参比电极时尤为突出。这个问题的部分解决方法是使用DG113之类带伸缩性液络部的电极。该电极的电解质为LiCl乙醇溶液，其伸缩性液络部增大了测量和参比部分的接触面，因此降低了噪声。（3）问题则非电极本身的问题，而更多涉及到电极保养。要使一支pH复合电极正常工作，需要氢化电极膜(电极泡)。将电极置于去离子水中调节。在非水滴定中该电极膜会逐渐脱去氢离子并降低电极的响应速度。所以，要避免这种现象发生，电极需要经常浸没在水中反复调节。为何得不到结果，或结果为0，从曲上看突跃很明显？发生这种情况有几个原因，多数是由于方法中的阈值设得太大。将测量数值表打印出来并查看一阶导数的最大值。方法中的阈值必须设得比该值低。通常情况下，我们建议在滴定曲线陡峭时将阈值设成一阶导数最大值的50%左右，滴定曲线平坦时最多设成80%。请记住：得不到结果还与趋势(滴定曲线的走向)定义错误及等当点范围选错有关。查看更多

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细胞不贴壁、生长缓慢甚至死亡咋肥四? 在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，这些问题从细胞生长角度来说，针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好，甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因：胰蛋白酶消化过度；支原体污染；培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；细胞老化；接种细胞起始浓度太低或太高。解决方法：缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度；分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物；使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2；启用新的保种细胞；调节最佳接种细胞浓度。二、培养细胞生长缓慢可能原因：由于更换不同培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；接种细胞起始浓度太低；细胞已老化；支原体污染。解决方法：比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验，让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配置培养液，或补加谷氨酰胺及生长因子；用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物；血清需保存在-10到-20℃。培养液需在2-8℃避光保存。含血清完全培养液在2-8℃保存，需在1周内用完；增加接种细胞起始浓度；换用新的保种细胞；分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。三、培养细胞生长不好可能原因：细胞本身的状态细胞传代次数多，细胞老化；细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染支原体污染；霉菌污染。培养基或血清更换血清或培养基之前未进行验证；选择的培养基是否合适；培养基配制是否准确无误。培养环境 CO2供应是否正常；培养箱或摇床温度控制是否正确。解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；要用合适的血清或培养基，最好经过验证；注意实验室的环境。四、培养细胞死亡可能原因：培养箱内无CO2；培养箱内温度波动太大；细胞冻存或复苏过程中损伤；培养液渗透压不正确；培养液中有毒代谢产物堆积。解决方法：检测培养箱内CO2；检查培养箱内温度；取新的保存细胞种；检测培养液渗透压；换入新鲜培养液。查看更多

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不稳定的化学试剂应该怎么保存? 实验室中不稳定的化学试剂应该怎么保存?化学试剂存放要依据物质自身的物理性质和化学性质，降低或杜绝物质变性、自然损耗。实验室中有很多不稳定的化学试剂。有的易挥发、有的易燃易爆、有的试剂在保存的时候需要密封保存。常用不稳定试剂的分类及要求 (1)与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。如电石(CaC2),生石灰(CaO)，浓硫酸，无水硫酸铜()，各种干燥剂(硅胶，碱石灰，P2O5，CaCl2等)，K, Na, Mg, Na2O2, 更要同时具备所有要求。 (2)易与氧气作用的试剂，如亚硫酸盐，苯酚，亚铁盐，碘化物，硫化物等应将其固体或晶体密封包村，不宜长期存放其水溶液;亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放;钾，钠，白磷更要采用液封形式。 (3)易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。 (4)与二氧化碳反应的物质要密封包村。如碱类，NaOH,Ca(OH)2,Ba(OH)2,等;如弱酸盐类，水玻璃，偏铝酸钠，苯酚钠，Na2O,Na2O2等。由于其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。 (5)易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。如浓硝酸，浓盐酸，浓氨水，AgNO3，液溴(水封)等。试剂管理窍门：一般按用途可以分为通用试剂、高纯试剂、分析试剂、仪器分析试剂、临床诊断试剂、生化试剂、无机离子显色剂试剂等。有四种常用规格： 1.优级纯或一级品(GR 精密分析和科学研究工作)； 2.分析纯或二级品(AR 重要分析和一般研究工作)； 3.化学纯或三级品(CP 工矿及学校一般化学实验)； 4.实验试剂(L.P.)。大多数的试剂具有一定的毒性及危险性。对科研试剂的加强管理，不仅是保证分析结果质量的需要，也是确保人民生命财产安全的需要。试剂应根据毒性、易燃性、腐蚀性和潮解性等不同的特点，以不同的方式妥善管理。保存注意事项：低温、避光、干燥阴凉处封闭贮存，严禁与有毒、有害物品混放、混运。本品为非危险品，可按一般化学品运输，轻搬动轻放，防止日晒、雨淋。我们提供的试剂产品品质优良，都是通过严格的检测体系认证。查看更多

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质粒转染和病毒转染的区别? 两者在本质上并没有区别。无论是质粒转染，还是病毒转染，均是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例；化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术；生物介导方法，有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。查看更多

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黑色素细胞那些事，你了解吗? 生活中我们会发现，不同物种和个体的肤色会表现出区域特异性。不同长度、厚度，不同身体部位的毛发色素沉积使我们有了不同的外观，如：东方人大多是黄皮肤黑头发，西方人很多是白皮肤金头发。基于黑色素的色素沉积不仅赋予人体皮肤抵御紫外线（UV）辐射的能力，而且还促进有害物质（如重金属）从体内排出。黑色素细胞起源于神经嵴，通过真皮迁移到表皮，最后迁移到毛囊。当黑色素母细胞归巢到毛囊凸起区域时，分化为黑色素细胞干细胞，黑色素细胞干细胞向下迁移并分化为毛发基质中的成熟黑色素细胞。成熟的黑色素细胞进一步分化生成黑色素，运输到周围的角质形成细胞，导致色素头发和皮肤的形成。黑色素细胞异常或功能失常引起的色素性疾病可能涉及色素沉着、感觉功能、自身免疫或恶性肿瘤等，不仅导致精神创伤，并显著影响人的社会交往。因此，黑色素细胞的研究深受关注。黑色素细胞研究进展黑色素细胞培养早期可以追溯到50年代，但直到80年代才真正建立可行的培养方法。20世纪60年代Cruickshank最早报道体外黑色素细胞培养，由于当时技术的限制，未能大量培养出纯化的黑色素细胞。随着生物技术的发展，科学家发现在培养基中加入辅助致癌因子、霍乱毒素和血清可以获得大量的黑色素细胞。此后，黑色素细胞开始被广泛研究应用。几乎所有组织中均有黑色素细胞，但在皮肤和毛囊中发现的黑色素细胞数量最多。研究显示，黑色素细胞和角质形成细胞共同表达E-钙粘蛋白细胞粘附分子有助于缝隙连接的形成，并有助于抑制黑色素细胞增殖，表明黑色素细胞的增殖与上皮细胞密切相关。自从美国科学家Lemer首次将体外培养的黑色素细胞成功的自体移植治疗斑驳症，陆续开展了许多临床研究。特别是近些年来研究比较热的白癜风治疗，Jeong等shou次将自体黑色素细胞移植来治疗白癜风，并取得不错的临床效果；Kim发现脂肪来源的干细胞与黑色素细胞共培养移植后，可以很好的治疗白癜风，之后的研究更是不断。此外，黑色素细胞在医学领域还与白化病，黑色素瘤等相关；在美容和化妆品领域更是可以助力制造新的美白产品。古朵生物黑色素细胞生长培养基黑色素细胞培养开始使用的大多为DMEM、MEM等培养基，并添加血清、生长因子及霍乱毒素等成分。但对于原代黑色素细胞来说，由于血清成分复杂，并含有一定的细胞毒性物质和抑制剂，对细胞有去分化作用，影响细胞的功能表达，甚至影响最终研究结果。因此，不含血清或者其他天然成分的高品质培养基对原代黑色素细胞培养至关重要。古朵生物黑色素细胞生长培养基M3特点：不含血清和牛垂体提取物，实现高程度的标准化不含PMA（佛波醇肉豆蔻酸酯），对实验设置无不良影响对每批培养基进行细胞活力和细胞形态特征的测试培养基组分更清晰，批间差异小与所有可用的人原代黑色素细胞兼容查看更多

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化学试剂级别划分的标准是什么? 化学试剂的纯度较高，根据纯度及杂质含量的多少，可将其分为以下几个等级。（1）优级纯试剂亦称保证试剂，为一级品，纯度高，杂质极少，主要用于精密分析和科学研究，常以GR表示。（2）分析纯试剂亦称分析试剂，为二级品，纯度略低于优级纯，杂质含量略高于优级纯，适用于重要分析和一般性研究工作，常以AR表示。（3）化学纯试剂为三级品，纯度较分析纯差，但高于实验试剂，适用于工厂、学校一般性的分析工作，常以CP表示。（4）实验试剂为四级品，纯度比化学纯差，但比工业品纯度高，主要用于一般化学实验，不能用于分析工作，常以 LR表示。以上按试剂纯度的分类法已在我国通用。根据化学工业部颁布的“化学试剂包装及标志”的规定，化学试剂的不同等级分别用各种不同的颜色来标志查看更多

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标准物质GBW和标准样品GSB的区别在哪? 从事检测行业的实验室人员经常都要用到标准物质GBW和标准样品GSB，但是很少人知道标准物质和标准样品有什么区别，今就对标准物质和标准样品的区别详细跟广大做检测和或校准的同行说一下，希望对那些对标准物质和标准样品不知道如何区分的人有帮助：管理机构的区别标准物质GBW和标准样品GSB都是由国际技术监督局标准司批准，国家技术监督局发布，但是标准物质是由全国标准物质管理委员会组织和审查，而标准样品则由全国标准样品技术委员会组织和审查。代号不同标准物质的代号是GBW，标准样品的代号则是GSB。定义不同标准物质是具有一种或多种足够均匀并已经很好地确定其特征量值的物质或材料。用于校准仪器、评价测量方法或确定物料的量值；标准样品是具有足够均匀的一种或多种化学的、物理的、生物学的、工程技术的或感官的等性能特征，经过技术鉴定，并附有有关性能数据证书的一批样品。制备过程的区别标准样品制备要经过制备物料，对成品物料进行均匀性检验、定值，稳定性检验，包装，审查，批准，发布等步骤；标准物质的制备过程与标准样品基本相同，只是要求要高很多。用途不同标准样品是为实施和制定标准的需要而制定，一般只在标准所涉及的范围使用，它在实物标准（相对文字标准而言）不能用作计量的传递；标准物质是计量标准，可以作计量的传递，用于校正仪器、评价测量方法、确定物料的量值，只要适宜可以代替标准样品在制定、实施标准中使用。以上是标准物质和标准样品的五点区别，此外，标准物质分为一级标准物质GBW和二级标准物质GBW(E)。在国外，标准物质和标准样品是没有区别的。标准物质是作为量值的传递的工具和手段。标准样品则是为了保证国家标准或行业标准的实施制定的国家实物标准。如一些产品的技术性能指标，难以用文字叙述清楚，需要用实物作为文字标准的补充，例酒、颜料的外观、颜色色光等。 GBW和GSB区别：查看更多

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刚收到的细胞应该如何处理呢? 细胞活化︰ 1.收到细胞株包裹时，请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形，若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养，或立即冷冻保存(置于–70 °C，隔夜后，移到liq N2)。 2.冷冻细胞解冻程序: 2.1.依据细胞株数据单zhi定之基础培养基种类、血清种类和其它zhi定之成份和比例，制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类，若因实验需要，必须有所不同时，务必以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行所需之实验。 2.2.FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清)，对细胞而言差异很大，请务必依据细胞株资料单zhi定之血清种类培养之。 2.3.将培养基置于37 °C 水槽中回温，回温后喷以70 % 酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，立即放入37 °C 水槽中快速解冻，水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿，否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后，以70%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台。 2.4.依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取10 ml培养基加至T25 或T75 flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T25或T75 flask 内之培养基，混合均匀，放入37 °C，5 % CO2培养箱培养。 2.5.对绝大多数细胞而言，1 % 以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需立刻由解冻.细胞中去除，待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO 敏感或会造成细胞分化之细胞，需立即去除DMSO 者，则可将解冻后之细胞悬浮液放入5 - 10 ml 培养基中，离心300 xg (约1000 rpm)，5 分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培养基，将细胞均匀混合后，转移至培养瓶中，再放入37 °C，5 % CO2 培养箱培养。查看更多

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血清也有真假？古朵教您辨别！？血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。主要是：血清的成份可能有几百种之多，目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚，尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识，这给研究工作带来许多困难；第二血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保证每批血清的相似性极为困难，从而使实验的标准化和连续性受到限制；第三不能排除血清中含有易变物质，这被认为是“瓶中恶化”的原因。鉴别方法：血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血*收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆zui大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。血浆是血液的液体成分，血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆，约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水（体积的90%），其中溶解的物质主要是血浆蛋白，还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞，同时也是运输分泌产物的主要媒介。将新鲜血液离心，使血细胞沉降，上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。查看更多

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组织培养育苗需要哪些仪器设备? 1.仪器设备：光学显微镜（附有相差、荧光和显微摄影装置）、天平（感量1/10克的粗天平、感量1/100克的扭力天平、感量1/1000克的分析天平）、高压蒸气灭菌锅、恒温箱、恒温干燥箱、超净工作台、冰箱、离心机（4000转/分）、生物切片机、手持放大镜、恒温水浴锅、双目解剖镜、pH测定仪、转床、摇床、培养架、空调器及日光灯组。 2.其他物品：除上述大件仪器设备外，还需必备的物品有：培养皿、烧杯、试管、量筒、三角瓶、刻度吸管、滴管、漏斗、洗瓶、滴瓶、酒精灯、解剖刀、解剖针、剪子、镊子、纱布、棉花、牛角匙、牛皮纸、牛皮筋、特种铅笔、电炉、pH试纸。查看更多

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如何鉴定细菌? 细菌的鉴定程序： ①细菌形态学检查； ②细菌生长特性； ③生物化学试验； ④抗原构造及血清学诊断； ⑤噬菌体及药物敏感试验； ⑥毒力测定及动物试验。查看更多

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简介

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个人简介：上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。查看更多

企业简介

企业名称：上海古朵生物科技有限公司

企业性质：贸易商,代理商,

主营业务：质粒载体定制，ELISA检测试剂盒，细胞培养，抗体抗原，蛋白纯化，染色液溶液，标准品对照品,微生物培...

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