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样品空白做不好的原因在哪里?
作用: 1、样品空白可以抵消加入测试试剂前由于样品自身存在的色度或浊度而引起的正误差。 2、在使用样品空白对测试仪器进行调零后,只有样品与测试试剂发生反应而产生的色度被测定了。由于样品的背景色度和浊度往往各不相同,样品空白经常用来对仪器进行调零。 如:显色反应,按照与显色反应相同的条件,取同样量的样品溶液,但不加显色剂作为空白溶液,这适宜于样品基体有色,显色剂无色也不与样品基体显色的情况。 如,用硫氰酸盐测定钼时,通常以不加硫氰酸盐(其它操作不变)作空白,以消除Cr3+,Ni2+,Cu2+等有色离子的影响。 样品空白与空白样品 1、二者在取样上存在不同,一个是取纯水,另一个是取待测样品。 2、二者所用的分析方法不同,一个采用参照分析法,在分析的过程中不加任何显色剂成分,另一个则完全靠分析方法操作。 3、校正内容不同,一个是校正样品本身在某一波长下的吸光度,而另一个则校正试剂以及纯水中所含的待测成分与相应的干扰成分。 工作中常见情况分析 以空气中有毒物质检测为例: 在工作场所空气中有毒物质检测过程中,样品空白经常出现的现象有以下几种: (1)采集的样品空白测定结果均与实验室空白(试剂空白) 基本一致; (2)采集的样品空白中,其中一个与实验室空白(试剂空白) 基本一致,其余的测定结果偏大; (3)采集的样品空白测定结果均较大。 出现(2)、(3)现象时,如果空白测定结果明显偏大,甚至高于样品测定值,则空白样品可能已被污染。 产生污染的原因 (1)空气收集器未经质量验收,空气收集器的本底值较高,影响检测结果。如用于采集钠等金属元素的微孔滤膜中可能会含有微量的钠等金属,采样后,可能会出现样品空白的吸光度高于样品吸光度的现象,使得检测结果为负值。 (2)空气收集器未清洗干净,使得样品空白值高于实验室空白。 (3)采样过程不规范,导致样品空白值异常。 (4)样品运输和保存不规范,导致样品被污染,样品空白值也较高。 如,使用沾污的样品保存箱运输、保存样品,或者中途无意打开样品空白等,都会影响样品空白值。 (5)样品预处理、测定步骤不规范,实验室环境交叉污染等同样会导致样品空白被污染。 如何处理? 样品空白值小于等于测定方法的检出限,说明样品在各个环节没有受到污染; 若大于检出限,小于方法空白样,则修正样品测得值; 若大于方法空白值,甚至大于样品值,说明样品被污染,检测结果应舍弃。 样品空白值如何取舍? 试剂空白值应小于所用测定方法检出限的1/2,样品空白也应小于或等于检出限。 如果两个样品空白值差异比较小,可以取均值或者取较大的那一个。 如果两个样品空白值差异较大,超出10%,就要分析原因,如果无法解释,则意味着本次采样失败,需要重新采样! 样品空白的意义 1、样品空白是由样品本身决定的,即使是无吸光值的蒸馏水,在实验的过程中如若不进行校正,那么分析的结果就会有误差,进而影响分析数据的准确性; 2、减少分析过程中出现的误差; 3、减少开支; 4、简化分析操作过程。 关于样品空白常见疑问解答 1、原子荧光实验设置参数中的样品空白是什么? 不加入样品,与样品一起加入同样的处理试剂和经过同样的消化、赶酸、定容步骤后得到的溶液即为样品空白,将该溶液所在位置设为样品空白,则样品的上机获得的荧光值均需减去该溶液的荧光值,得到真正的样品检测荧光值。 2、实验中做的试剂空白和样品空白,两者有何异同? 答:试剂空白是指由于测试试剂本身而带来的测试结果的微小的正误差。样品空白是指在某项测试程序中,使用某个样品的浓度作为仪器的零基准。样品空白可以抵消加入测试试剂前由于样品自身存在的色度或浊度而引起的正误差。一般情况下,试剂空白要求用高纯度的去离子水做。 3、本人最近一段时间用原子吸收石墨炉法测铅时,发现样品空白很高,大概有0.05左右(原来的是0.01~0.02左右,换了试剂做还是这样),做了很多次都是这样,而且有两个样品空白,平行性很好,为什么样品出现负值? 答:样品前处理用的试剂质量有问题,不知道你用的是微波消解、干法消解还是湿法消解?微波消解使用试剂量较小,出现上述问题的状况较少。干法消解还是湿法消解对试剂的要求较高,样品处理时反应剧烈,有损失,注意控制消解时的反应强度。
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微生物
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灭菌后小倒管内留有气泡咋办呢?
大肠菌群、大肠杆菌检测时,所用培养基LST、BGLB、EC肉汤等这些需要用小倒管(杜氏管)考察产气的培养基,灭菌后,偶尔会有小气泡留在小倒管内,导致培养基不能使用。重复灭菌不仅费时,更重要的是会破坏培养基的有效成分。为了避免这类问题的发生,根据实验经验,做出以下几种可能原因分析: 原因一:高温高压灭菌锅工作压力不够,使气体不能完全排出 高压锅在灭菌过程中产生的最大压力不够,不能将小倒管内的气体挤出,导致灭菌后任留有小气泡。此外,高温高压灭菌锅若是温度上升缓慢或者达不到灭菌温度,也会出现类似现象。 解决办法:使用检查灭菌效果的用品-压力蒸汽灭菌指示卡,对高温高压灭菌锅的灭菌情况进行监测。 原因二:试管塞塞得太紧 在灭菌时,试管塞塞得太紧(有些硅胶塞与试管不配套)会导致试管内压力与灭菌锅内压力不一致。当灭菌锅升温升压时,锅内压力会大于试管内压力,试管内压力不够,不能将小倒管内气体排尽,就留有气泡;当灭菌锅降温降压时,锅内压力小于管内压力,可能会使试管塞和培养基崩出,培养基报废。 解决办法:改用塑料帽、不锈钢管帽,或者与试管相匹配的硅胶塞。 原因三:小倒管口太小 小倒管在加热加压后,一方面液体培养基要进入小倒管,另一方面小倒管内部的空气要被排出,如果小倒管管口太小,液体不容易进去,里面的空气不容易被排出,就会导致有小气泡生成。 解决办法:改用开口比较大的倒管。 以上提供几种可能形成气泡的主要原因,还有几点建议: 1.可以在高压锅压力降下来后,温度不太高的时候将培养基从锅中拿出,迅速放在冷水中,急冷,注意要使冷水高度超过试管中液面高度。利用热胀冷缩的原理,可以使小倒管中气泡排出。 2.若使用非全自动高温高压灭菌锅(此类锅一般需要在100℃手动关闭放气阀),则不要在锅刚达到100℃时就关闭放气阀,可以让高压锅在100℃时多排一会儿热气,这样有助于小倒管中气体排出。 此外,尽量不要采用将灭菌后的试管颠倒或大角度倾斜的方式,使小倒管内气体排出。此种方法可能会导致培养基通过试管口或试管塞受到污染,或者导致试管内液体流出。
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工艺技术
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材料科学
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微生物检测培养基质量控制问答?
微生物检测培养基质量控制问答 1、培养基灭菌后成份会有所蒸发减少,如何处理这个问题? 答:正常情况下蒸发量较少,可忽略不计。 2、培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的?应如何避免? 答:可能的情况有: 1. 培养基配置用水不符合规定; 2. 灭菌过程温度升温慢或降温慢; 3. 培养基储存不当; 4. 融化时沸腾时间较长等。 3、准备好的培养基有效期如何验证? 答:定期取出培养基验证其无菌性,促生长能力等方面。 4、培养基配制好灭菌后,在高压容器中保温降至50℃左右,可不可行? 答:建议最好不要,避免过度受热。 5、脱水培养基对湿度是否有要求?多少适宜? 答:按要求室温干燥环境储存即可。 6、培养基pH值测定温度在25℃,这个温度应怎么控制? 答:可水浴控制培养基温度。 7、配制培养基过程中,按说明书称定量,加规定的纯化水,煮沸溶解,为了避免煮沸过程总减少水分,是否要在配制过程适当增加水? 答:可适量增加,自己掌握。 8、商品培养基一定要当天配当天用吗?可否在一周内用完? 答:不是即配即用的培养基的话,储存的当,可以使用。 9、称量培养基时,注意不要吸入粉末,这粉末是指何物? 答:就是你所称量的干粉培养基 ,因为培养基的粉末对呼吸道有刺激作用,而且培养基中的某些成分,如亚硒酸盐、叠氮化钠、乙酰胺等,长期吸入并在体内累积到一定量会对人体健康有危害。所以培养基配制称量需做好个人防护,且最好选择少粉尘环保型颗粒培养基。 10、煮培养基,用不锈钢锅在电磁炉上煮可行?硫乙醇培养基是否要煮沸?如何煮沸?用不锈钢锅在电磁炉上煮沸可行吗?可不可以水浴煮沸呢? 答:硫乙醇应煮沸,量大时,我实验室用不锈钢锅在电磁炉上煮沸。不建议水浴煮沸,因为水浴煮沸琼脂粉很难溶,导致琼脂分装不均匀,前段分装的琼脂含量少,后段分装的琼脂含量高,导致有的管或瓶中的FT凝固。 11、如培养基在高压灭菌器中温度需自然下降20度才开盖吗? 答:高温灭菌器有安全阀,温度下降到安全阀可打开时将培养基取出室温冷却,各型号灭菌器安全开盖温度不尽相同。 12、平板涂布和平板划线培养基表面水分过多,菌落蔓延如何解决? 答:对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25℃~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
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一滴水中有多少微生物?
在生物课上你可能已经做过这个实验了:从池塘里取一些水来,用滴管吸一些,小心地滴一滴到载玻片上,再盖上盖玻片,然后迫不及待地将其放在显微镜下进行观察……你会看到在这一滴池塘水中,有很多奇妙又微小的生物在里面游动。这些只有在显微镜下才能够被我们观察到的生物,就是“微生物”。 你一定认识那只长得像草鞋的微生物——大草履虫。在微生物群体中,它可算得上是大块头了,体长300微米左右,是微生物群体中原生动物类的代表。你听说过大肠杆菌吗?作为典型的细菌,一个大肠杆菌从头到尾的长度只有2微米。还有体型更小的类群呢——病毒。一般病毒的直径只有0.3微米左右,用那个刚才你用来看草履虫的光学显微镜想看到病毒是不可能的。要想看清病毒的模样,必须使用放大倍数更高的电子显微镜。 将一滴水展平在载玻片上,直径大概是1厘米(相当于10000微米)。如果你想知道一滴水中有多少微生物,那么只需要做几道算术题,就能得到答案了。如果能够将微生物首位相接,一字排开地码放在展平后的水滴直径上,草履虫能放33只,大肠杆菌可以码5000个,病毒的承载量至少是33000个…… 可是,自然水域中的微生物世界并没有这么有秩序,它们不会一字排开、只待在水滴中央不动,而是根据不同水体中的资源分布情况,趋利而生。所以,要问一滴水中有多少微生物?答案会因为水体的不同、微生物种类不一而出现多种多样的答案。2012年美国加州大学圣巴巴拉分校的海洋微生物学家发现,在百慕大海域,海洋表面的“噬菌体”病毒的数量达100万。而同样是取自海面之下的海水中的一滴水中,“噬菌体”病毒的数量就骤减了。如果从微生物的种类上来考虑,最丰富的集散地莫过在池塘中了。一滴池塘水中,可能同时发现有:轮虫、绿藻、草履虫、细菌和病毒……平常看起来波澜不惊的池塘里,原来是这么的热闹啊。 千万不要小看这些肉眼看不见的小家伙,在我国2006年新制定的《生活饮用水卫生标准》中,新增加了4项与微生物相关的指标。其中包含着对于一种名叫“隐孢子虫”的检查。在这之前的25年中,隐孢子虫一直被认为是威胁人类的重要病原之一。隐孢子虫的虫体随着动物粪便排出体外,通过活卵囊在环境中传播。当卵囊进入水体或动物体内后,就会威胁到人类的健康。1993年美国wisconsin州的密尔沃基(milwaukee)市爆发了由隐孢子虫引发的水传染病,共使40万人致病,50人死亡。记住!在自然界中,并不是肉眼看起来清澈的水就是可以喝的,当心水中那些对你有害的小家伙们。 现在在水体检测的过程中,仍然需要使用显微镜对微生物进行检测。那么,你知道谁是第一个用显微镜观察到微生物的人吗?是荷兰的商人兼科学家列文虎克(antonivanleeuwenhoek),他利用自己改造的显微镜首先观察并描述了单细胞生物、肌肉纤维、细菌、精子以及毛细血管中的血流状态等,人们称他为微生物学之父。列文虎克在一生中磨制了500多个镜片,并制造了400多种放大倍数不同的显微镜,下次进入实验室的时候,好好看一看你手中的显微镜,它们就是从列文虎克时代流传下来不断改造而成的,它们是打开微生物世界大门的金钥匙。
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PCR实验常见问题及其解决方案?!?
PCR产物的电泳检测时间,一般为48h以内,有些最-好于当日进行检查,大于48h后带型不规则甚至消失。 但有时仍会与到这样那样的问题,影响检测结果的判断,具体归类为以下常见的4点,描述如下: 问题一:无扩增产物 现象:正对照有条带,而样品则无。 原因: 1、模板:含有抑制物,含量低。 2、Buffer对样品不合适。 3、引物设计不当或者发生降解。 4、反应条件:退火温度太高,延伸时间太短。 对策: 1、纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量。 2、更换Buffer或调整浓度。 3、重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物。 4、降低退火温度、延长延伸时间。 问题二:非特异性扩增 现象:条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带。 原因: 1、引物特异性差。 2、模板或引物浓度过高。 3、酶量过多。 4、Mg2+浓度偏高。 5、退火温度偏低。 6、循环次数过多。 对策: 1、重新设计引物或者使用巢式PCR。 2、适当降低模板或引物浓度。 3、适当减少酶量。 4、降低镁离子浓度。 5、适当提高退火温度或使用二阶段温度法。 6、减少循环次数。 问题三:拖尾 现象:产物在凝胶上呈Smear状态。 原因: 1、模板不纯。 2、Buffer不合适。 3、退火温度偏低。 4、酶量过多。 5、dNTP、Mg 2+浓度偏高。 6、循环次数过多。 对策: 1、纯化模板。 2、更换Buffer。 3、适当提高退火温度。 4、适量用酶。 5、适当降低dNTP和镁离子的浓度。 6、减少循环次数。 问题四:假阳性 现象:空白对照出现目的扩增产物。 原因: 靶序列或扩增产物的交叉污染。 对策: 1、操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。 2、除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及加样枪头等均应一次性使用。 3、各种试剂最-好先进行分装,然后低温贮存。
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滴定液的配制注意事项?
1.所用溶剂“水”,系指蒸馏水或去离子水,在未注明有其他要求时,应符合中国药典“纯化水”项下的规定; 2.采用间接配制法时,溶质与溶剂的取用量均应根据规定量进行称取或量取,并使制成后滴定液的浓度值应为其名义值的0.95~1.05; 3.采用直接配制法时,其溶质应采用“基准试剂”,并按规定条件干燥至恒重后称取,取用量应精确至4~5位有效数字的精密称定,并置1000mL量瓶中,加溶剂溶解并稀释至刻度,摇匀; 4.配制浓度等于或低于0.02mol/L的滴定液时,除另有规定外,应于临用前精密量取浓度等于或大于0.1mol/L的滴定液适量,加新沸过的冷水或规定的溶剂定量稀释制成; 5.配制成的滴定液必须澄清,必要时可滤过;并按药典中各该滴定液项下的条件贮存,经标定其浓度后方可使用; 6、试液配制后,其标签有规定的颜色,如指示剂要用红色,标准液用绿色,普通试液用蓝色等,化学试剂按其纯度分成不同的规格,国内生产的试剂分为四级分别为: 一级品:保证试剂“优级纯”标签用绿色,用作基准物质,用于分析鉴定及精密的科学研究; 二级品:分析试剂“分析纯”标签用红色,用于分析鉴定及一般性科学研究; 三级品:化学纯粹试剂“化学纯”标签用蓝色,用于要求较低的分析实验和要求较高的合成实验; 四级品:实验试剂,棕、黄或其他,用于一般性合成实验和科学研究。
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试剂耗材真假难辨,到底怎么区分是真是假?
试剂耗材作为高校/实验室的常用物资之一,也是试验人员必不可少的物品。但是试剂耗材不管是在申购、购买还是在使用上都会有一系列的问题摆在试剂耗材管理人员及使用人员面前,具体是哪些问题呢,下面我来给大家简单来说下。 对于试剂耗材的购买,因为它们信息的不对称,再加上试剂耗材供应商雇佣了推销人员进行销售,经过一层层的加价后造成价格虚高。导致同一高校/实验室、同一层楼隔壁的两个实验室购买同一种试剂的价格都相差巨大。并且大多数科研/试验人员无法鉴别供应商的资质,导致收到了“假货”、“水货”,以至于到最后辛苦做了大半年的实验,却因买到的是假试剂导致实验结果完全无效。试剂耗材造假严重影响科研和试验结果,让科研工作者花费大量时间、金钱、精力做的研究没有成效的事并不鲜见。有的造假手段隐蔽性很强,这种ELISA试剂盒,也会用某种指标的产品冒充其他指标试剂盒。但比之前VEGF一种产品包打天下的做法“高明”之处在于,用于替换的指标更加多样化和隐蔽,让人防不胜防。 那么该怎样找到正品试剂耗材,少吃亏上当呢?下面列举了几个方法: 一、找对耗材试剂供应商 购买试剂耗材,肯定要从源头上避免买到假的试剂耗材。那么,如何选择对的试剂耗材供应商非常重要。选择供应商可以从两点出发,1 是选择两家以上的大品牌、口碑信誉好的供应商;2建立健全的供应管理体制。对试剂耗材供应商建立考核标准,登记好每次供应试剂耗材的质量情况,如有违规要有惩罚机制,比如在一个供应周期内禁止其参与招标和供应等。选择两家以上的供应商,可以用来对比双方的质量以及价格,以便于给高校/实验室相关人员提供更好更多的选择。 二、学会简单的辨识技巧 试剂耗材的辨识技巧有多种,下面只是简单的列举2个: 1、看包装 我们在拿到试剂耗材时,都应该最先确认封条未被撕开或没有其它任何动过的痕迹。检查是否有动过的封条时,注意封条图案、图形的线条是否连接正确。如果图案、图形的线条不匹配,则包装已被动过。 2、看变色/涂层防伪标 最直观的辨别试剂耗材的方法,就是变换观察角度,可看到变色防伪标呈现以下两种颜色。首先,刮开包装上的“涂层防伪标”,得到防伪码,然后登陆相应官网查询即可。 现在国内市场上的假冒试剂产业还是比较猖獗的,虽然目前还是没办法彻底制裁这些假冒试剂制造者,但是我们可以各种方法去辨别和采用合理方法来规避买到假冒/伪劣试剂。购买试剂耗材只是耗材管理中的其中一项,如何做好试剂耗材管理光靠人工肯定管理不好,必须结合专业的试剂耗材管理系统才能事半功倍。
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实验室如何确保不搞混样品?
对实验室管理人员来说,选择科学、有效的样品标识表示形式可以提升样品管理水平,提高检测工作效率,确保样品管理的可靠性和准确性。实现高效、便捷的样品管理,建立科学的样品标识系统是核心和关键,它为每个样品赋予识别和记录的唯一标记,也就是样品的身份证明。有了科学的标识管理,再也不用为弄混样品而烦恼了。 01、样品标识的重要性 样品的代表性、有效性和完整性将直接影响检测结果的准确度,因此必须对样品的取样、贮存、识别以及样品的处置等各个环节实施有效的控制,确保检验结果准确、可靠。并做好样品的保密与安全工作。 标识是信息传递的一种重要的手段,例如:对于有追溯性要求的要素,须有唯一性的标识以便于追溯;对受控对象加以标识可使受控的状态明确;为使环境物品整洁有序,提高工作效率,减少差错,可进行定置标识;危险标识、操作禁示等使员工能正规操作,避免危险等。规范、科学的标识是质量体系安全、高效、经济运转的前提条件。 02、标识的功能 标识是以文字、数字、符号、图案及颜色等形式体现的,能够清楚鲜明地表明对象或过程的质量、数量、特性、要求和状态等的一种信息载体,标识常用的方法有记录、卡、标签、标牌、图标、印章等。标识具有识别、定位、导向、提示、警示、说明的功能,它的特点是及时、简明、直观、易于目视。 03、标识管理的优点 1、标识管理是以人为本的管理方法,可使工作人员在短时间内知道程序的要求。 2、标识形象直观,容易认读和识别,简化管理,使工作有序,减少差错,有利于降低管理成本,提高工作效率。 3、标识可作为证据或依据,标识管理是源头管理,完整规范的标识是实现追溯的手段。 4、标识管理透明度高,为目视管理、自主管理创造了条件,便于现场人员默契配合、互相监督,发挥激励作用。 5、标识具有安全保障作用。 04、样品的标识 1 样品的识别包括不同样品的区分识别和样品不同检测状态的识别。 2 样品区分识别号可贴在样品上或贴(写)在样品包装物上。识别号由收样部门统一编排。 3 样品所处的检测状态,用“待检”、“在检” “检毕” 和“留样”标签加以识别。 4 样品在不同的检测状态,或样品的接收、制备、流转、贮存和处置等阶段,应根据样品的不同特点和不同要求,如样品的物理状态、样品的备样要求(如分样或混样)、复检样要求、样品形状的大小、样品制备、加工及分解要求、样品的包装状态和其他有特殊要求的样品,根据检测活动的具体情况,做好样品标识的转移工作,以保持清晰的样品识别号,保证各检测室内样品编号方式的唯一性和必要时的可追溯性。 根据要求,实验室应具有检测和/校准物品的标识系统。实验室通常都会设计样品标签来标识样品,有条件的实验室甚至采用条形码的方法来标识。不过在使用标签或条形码标识样品时会遇到如下的问题: 1、使用标签或条形码标识系统不仅仅是给样品分配一个唯一性编号,样品有了唯一性编号可以避免在文件中出现混淆,但为避免实物出现混淆,还需要清楚地标识出样品的目前状态,比如:待检、检测中、检测完成等,对于要顺序开展多个试验的样品,甚至还需要清晰地标识哪些试验项目已经完成等信息。 2、如果试验样品体积较小或试验环境十分恶劣,会导致样品标签或条形码无法粘贴到样品上或在试验过程中发生标签脱落丢失的情况,但这些样品无法有效地标识会导致产生混淆。 针对如上的两个问题,推荐的解决方法如下: 1、如果实验室的样品体积足够大,建议设计能够容纳较多信息的样品标签,标签上除了标注样品的编号和基本信息外,还可以留出空间让实验室检测操作人员能够在检测过程中实时地标注样品的状态,比如标注哪些检测项目已经完成。如果无法做到上述要求,建议建立每个样品的检测历史记录表,通过记录表的内容可以清楚地了解样品的状态,也就是将标签和记录表结合在一起做为样品的标识系统。 2、如果样品体积太小或试验环境恶劣,无法有效进行标识时,建议建立样品分配表和样品的检测历史记录表来做为样品的标识系统,样品分配表是为了将样品的编号与样品对应而建立的记录表格,通常即使体积再小的样品在其生产时也会有相应的且唯一产品编号,将该产品编号与试验过程中的编号对应起来而建立的表格就是样品分配表,如果样品没有产品编号又体积特别小,那么可以有实验室人员在可能的空间上对样品进行灵活的唯一性标识,然后同样地将该标识和实验室检测过程的编号相对应建立分配表,同时结合上述介绍的样品的检测历史记录表来建立样品的标识系统,从而避免实物的混淆。 提醒: 为了使样品在接收、处理、保管、检测等 各环节汇总,保持其完整性, 防止不同样品和不同检测状态样品 不发生混淆的现象,并保护实验室利益, 检测实验室需加强对样品标识的管理。
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免疫组化常见问题的处理?!?
当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。 对照/标本无染色 ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。 ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点是非常重要的。比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。 ④检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液。 ⑤检查抗体的有效期和保存条件,尤其是标记了酶或荧光素的抗体,现在大多数试剂公司的抗体均要求在4~8℃条件下保存,应避免反复冻融,试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室,以免降低抗体的效价。 ⑥检查标本的储存条件,最-好用已知阳性的标本来同时做阳性对照。 ⑦检查色原/底物溶液,最-简单的检测方法是将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中,如果底物发生预期的颜色变化,则可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后应在一定时间内用完,否则会失效。 ⑧检查冲洗液是否和反应试剂匹配,溶液的pH值很重要,与过氧化物酶底物匹配的溶液中不应含有叠氮钠。 ⑨检查复染剂和封片剂是否和所使用的色原匹配。 弱阳性 如果阴性对照没有染色而阳性对照标本弱阳性,除了考虑上述因素外,还应考虑: ①标本的固定方式,不当的固定方式或固定时温度过高,都会影响到所检测的抗原的数量和质量。 ②不适当的抗原修复方式,由于石蜡切片在制作的过程中固定剂对抗原的封闭作用,必须用抗原热修复或酶消化或两种同时使用的抗原双暴露法,至于使用哪一种方法,应参照生产厂家的说明,同时结合标本的具体情况而定。 ③抗体的稀释度是否过高或者孵育的温度/时间是否正确。一般试剂生产厂家都会对试剂给出一定的使用范围,但是由于使用者的标本来自各种组织,处理过程也不尽相同,所以应参照使用范围,对所使用的一抗进行梯度测试,找出最-佳的使用浓度。 ④切片上遗留了过多的冲洗液,当抗体加至切片上时,等于人为地对抗体进行了进一步的稀释。 ⑤孵育时切片是否放置水平,否则会导致抗体流失。 如果阴性对照没有反应,阳性对照反应良好,而标本弱阳性,则可能是由于阳性对照不是同一种组织、或固定方式不同等原因所致。 非特异性染色 ①是否有效地去除了内源性酶和生物素。应注意的是,并不是每一种组织均需要进行此步骤,但对于内源性酶或生物素丰富的组织,如肝脏、肾脏等,需考虑此原因。处理的方法为: 灭活碱性磷酸酶:最-常用的方法是将左旋咪唑(24mg/m1)加入底物液中,并保持pH值在7.6~8.2,即能除去大部分内源性碱性磷酸酶,对于仍能干扰染色的酸性磷酸酶,可用50mmol/L的酒石酸抑制。 饱和处理内源性生物素:消除内源性生物素的方法是事先滴加亲和素,以饱和内源性生物素,使之不再有剩余的结合位点。具体方法是在ABC法或SP法染色前将切片浸于25ug/ml亲和素溶液中处理15分钟,PBS清洗15分钟后即可染色。 ②是否选择使用了正确的封闭血清。电荷吸附所造成的非特异性背景染色消除方法是以二抗动物的非免疫血清,用PBS稀释为3%-10%溶液孵育切片,以封闭吸附位点。有时其它无关蛋白,如牛血清白蛋白也常应用。另外,取材时避开出血、坏死区亦极重要。最近有些国内的实验室应用5%脱脂奶粉替代血清进行抗原封闭,效果也不错。 ③所选择的抗体是否符合试验要求。因抗原不纯、标本片中含有与靶抗原相似的抗原决定簇等原因造成的非特异性染色只能通过采用高纯度、高效价的抗体、或针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。 ④一抗的使用浓度是否过高。 ⑤清洗是否充分。应严格操作规程。因在缓冲液中含有一定量的盐,这亦有利于减低背景着色,通常0.05mol/l Tris—HCl,0.15mol/l NaCl已适用于多数染色方法,溶液内加入吐温20,效果更佳。特殊标记时,试剂公司一般都提供缓冲液的配方。 ⑥ DBA的使用是否正确。DAB的孵育时间和配制方式可以产生某些背景颜色,使用浓缩型DAB试剂盒时,请严格按照说明书标明的滴加顺序操作,注意校正蒸馏水的pH值,以确保实验结果的正确性;粉剂DAB溶解时,常有一些不溶性颗粒,这些颗粒须经过滤除去,否则可能沉积于切片组织上,产生斑点状着色。另外,DAB保存不妥产生氧化物亦可沉积于切片上,因此需将DAB保存于避光干燥处,现用现配,临用前加H2O2。孵育时间过长也会造成背景染色。 ⑦标本染色过程中是否曾经干涸,否则会造成边缘部的非特异性染色。 ⑧检查二抗与标本的内源性组织蛋白是否有交叉反应。
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pH缓冲溶液、缓冲指数和缓冲容量?
1. 缓冲作用与缓冲溶液 纯水在25℃时pH值为7.0,但只要与空气接触一段时间,因为吸收二氧化碳而使pH值降到5.5左右。1滴浓盐酸(约12.4mol·L-1)加入1升纯水中,可使[H+]增加5000倍左右(由1.0×10-7增至5×10-4mol·L-1),若将1滴氢氧化钠溶液(12.4mol·L-1)加到1升纯水中,pH变化也有3个单位。可见纯水的pH值因加入少量的强酸或强碱而发生很大变化。然而,1滴浓盐酸加入到1升HOAc-NaOAc混合溶液或NaH2PO4-Na2HPO4混合溶液中,[H+]的增加不到百分之一(从1.00×10-7增至1.01×10-7mol·L-1),pH值没有明显变化。这种能对抗外来少量强酸\强碱或稍加稀释不引起溶液pH值发生明显变化的作用叫做缓冲作用;具有缓冲作用的溶液,叫做缓冲溶液。 2. 缓冲溶液的组成 缓冲溶液由足够浓度的共轭酸碱对组成。其中,能对抗外来强碱的称为共轭酸,能对抗外来强酸的称为共轭碱,这一对共轭酸碱通常称为缓冲对、缓冲剂或缓冲系,常见的缓冲对主要有三种类型。 (1) 弱酸及其对应的盐 例如,HOAc-NaOAc(实际上是OAc-);H2CO3-NaHCO3;H2C8H4O4-KHC8H4O4(邻苯二甲酸-邻苯二甲酸氢钾);H3BO3-Na2B4O7(四硼酸钠水解后产生H2BO-3)。 (2) 多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐,例如,NaHCO3-Na2CO3;NaH2PO4-Na2HPO4;NaH2C5HO7(柠檬酸二氢钠)-Na2HC6H5O7;KHC8H4O4-K2C8H4O4。 (3) 弱碱及其对应的盐例如NH3-NH+4CL-;RNH2-RNH+3A-(伯胺及其盐);Tris-TrisH+A-(三羟甲基烷及其盐)。 3. 缓冲容量与缓冲范围 缓冲容量 缓冲能力的强弱,可用缓冲容量β表示。缓冲容量也叫缓冲值或缓冲指数。 对任何一种缓冲溶液的每一个pH值,都有其相应的缓冲量。缓冲容量实际上是一个微分比,可定义为:使1升缓冲溶液的pH值增高很小一个数值dpH时,需加入的强碱物质的量为db,则db与dpH之比值叫缓冲容量,用数学式表示为β=db/dpH缓冲mol·L-1·pH-1。如总浓度(即共轭酸与共轭碱浓度之和)为0.100mol·L-1 pH4.45的HOAc-NaOAc缓冲溶液(即醋酸缓冲溶液)的缓冲容量为0.051(mol·L-1·pH-1)。
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细胞培养室建立的细节问题?!?
1.甲醛薰蒸: 40%甲醛溶液(药用规格、福建三明化工总厂出品),用量30 ml/m3,室内温度21~24℃,相对湿度75%~85%,加热薰蒸使蒸汽弥漫全室,关闭门窗1 h. 甲醛水溶液为无色,具有强烈刺激性气味的液体,可杀灭多数微生物,价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等.市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛.其主要用法为: ①熏蒸消毒:对室内消毒其用量为20-25%毫升/米,在加热该溶液时最好同时煮沸一壶水,使室内相对温度保持在70-90%左右,室内温度最好在20摄氏度以上,作用时间12-24小时.如消毒皮毛服装,甲醛水溶液的用量可加至125毫升/米,挂衣密度为每平方米3套为宜.熏蒸消毒时应密闭门窗.消毒后一般多用自然通风驱散甲醛气体,其需时较长,急于排出气体,可将25%氨水加热蒸发中和.氨水用量为所用甲醛水溶液的一半,中和时间为30分钟. ②自然挥发: 将较大量的甲醛水溶液放入一敞开容器中,室内温度保持在18摄氏度以上,同时室内喷水以保持相对湿度在70%以上,经16小时可达到室内消毒的目的. 关于甲酸、甲醛和甲醇三者的毒性比较:甲酸的毒性比甲醇大6倍,甲醛的毒性比甲醇大30倍.所以吃进4-10克甲醇,就能引起慢性中毒.它的毒性作用主要表现在损伤视力,使视力减退(不能矫正),视野缩小,以致双目失明,直到死亡. 每个房间是7个平方,约20个立方.按书上的算要福尔马林300ml,高锰酸钾100g. 高锰酸钾放入甲醛液体中后,在开始的3秒钟内没有反映,3秒钟以后,会产生大量烟气.所以一旦在甲醛中加了高锰酸钾请马上离开灭菌室,并关上门. 高锰酸钾放入甲醛液体中会使液体沸腾,所以反应要在比较大的大口径容器进行 甲醛气体毒性非常强,所以操作时一定要带上防毒面具. 2.关于紫外线: 紫外线的穿透能力非常弱的,主要靠电离产生氧自由基来消毒.细胞培养室里面一些不能照射紫外的物件可以用一般的材料盖住.如:玻璃和有机玻璃都可以的.紫外有些人认为大型精密的显微镜是不可以照紫外的,因为它们的镜头上涂的膜会被分解掉,但我特意问了我校光学系的老师,他们认为是没有关系的. 紫外线在许多实验室被认为是起心理安慰作用的.我参观过的一个细胞培养 间他们的房间大约6平方米,但是只装了30W的紫外灯,但前提是他们有一个层流系统. 如果细胞培养间有层流系统,那紫外的作用是可以被忽略的,但如果没有层流系统,那么紫外的作用还是相当重要. 此外,不要担心紫外不能照射到的角落,因为紫外杀菌功能除了紫外本身以外,还可以由产生的臭氧来完成. 臭氧过量吸入的作用应该和双氧水的作用是一样的,也许有一定的致癌性.所以紫外灭菌以后,最好过一个小时再进去.
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工艺技术
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要想实验做得好,滴定操作少不了?!?
滴定操作看似简单,却是实验操作里重要的环节之一。样品预处理、溶液配制、稀释浓度、融化···几乎随处可见“滴定”这位小朋友的身影。那关于滴定,这些知识你知道吗?滴定操作小知识快问快答12题,助你成长为合格的化验员!! 1.酸式滴定管涂油的方法是什么? 答: 将活塞取下,用干净的纸或布把活塞和塞套内壁擦干,用手指蘸少量凡士林在活塞的两头涂上薄薄一圈,在紧靠活塞孔两旁不要涂凡士林,以免堵住活塞孔,涂完,把活塞放回套内,向同一方向旋转活塞几次,使凡士林分布均匀呈透明状态,然后用橡皮圈套住,将活塞固定在塞套内,防止滑出。 2.酸式滴定管如何试漏? 答: 关闭活塞,装入蒸馏水至一定刻线,直立滴定管约2 min,仔细观察刻线上的液面是否下降,滴定管下端有无水滴滴下,及活塞隙缝中有无水渗出,然后,将活塞转动180°等待2 min再观察,如有漏水现象应重新擦干涂油。 3.碱式滴定管如何试漏? 答: 装蒸馏水至一定刻线,直立滴定管约2 min,仔细观察刻线上的液面是否下降,或滴定管下端尖嘴上有无水滴滴下,如有漏水,则应调换胶管中玻璃珠,选择一个大小合适比较圆滑的配上再试,玻璃珠太小或不圆滑都可能漏水,太大操作不方便。 4.酸式滴定管如何装溶液? 答: 装之前应将瓶中标准溶液摇匀,使凝结在瓶内壁的水混入溶液,为了除去滴定管内残留的水分,确保标准溶液浓度不变,应先用此标准溶液淋洗滴定管2~3次,每次用约10 mL,从下口放出少量(约1/3)以洗涤尖嘴部分,应关闭活塞横持滴定管并慢慢转动,使溶液与管内壁处处接触,最后将溶液从管口倒出弃去,但不要打开活塞,以防活塞上的油脂冲入管内。尽量倒空后再洗第二次,每次都要冲洗尖嘴部分,如此洗2~3次后,即可装入标准溶液至“0”刻线以上。 5.碱式滴定管如何赶气泡? 答: 碱式滴定管应将胶管向上弯曲,用力捏挤玻璃珠使溶液从尖嘴喷出,以排除气泡。碱式滴定管的气泡一般是藏在玻璃珠附近,必须对光检查胶管内气泡是否完全赶尽,赶尽后再调节液面至0.00 mL处,或记下初读数。 6.滴定的正确方法? 答: 滴定时,应使滴定管尖嘴部分插入锥形瓶口(或烧杯口)下1~2 cm处,滴定速度不能太快,以每秒3~4滴为宜,切不可趁液柱流下,边滴边摇。向同一方向作圆周旋转而不应前后振动,因为,那样做会溅出溶液。临近终点时,应1滴或半滴地加入并用洗瓶吹入少量冲洗锥形瓶内壁,使附着的溶液全部流下,然后摇动锥形瓶,观察终点是否已达到。如终点未到,继续滴定,直至准确到达终点为止。 7.滴定管读数应遵守下列规则? 答: (1)注入溶液或放出溶液后,需等待30 s~1 min后才能读数; (2)滴定管应垂直地夹在滴定台上读数或用两手指拿住滴定管的上端使其垂直后读数; (3)对于无色溶液或浅色溶液,应读弯月面下缘实际的最低点,对于有色溶液,应使视线与液面两侧的最高点相切,初读和终读应用同一标准。 8.滴定管使用注意事项? 答: (1)用毕滴定管后,倒去管内剩余溶液,用水洗净,装入蒸馏水至刻度以上,用大试管套在管口上,这样,下次使用前可不必再用洗液清洗; (2)酸式滴定管长期不用时,活塞部分应垫上纸,否则,时间一久,塞子不易打开,碱式滴定管不用时胶管应拔下,蘸些滑石粉保存。 9.移液管和吸量管的洗涤方法? 答: 移液管和吸量管均可用自来水洗涤,再用蒸馏水洗净,较脏时(内壁挂水珠时)可用铬酸洗液洗净。 10.用洗液洗移液管或吸量管的方法是什么? 答: 右手拿移液管或吸量管,管的下口插入洗液中,左手拿洗耳球,先将球内空气压出,然后把球的尖端接在移液管或吸量管的上口,慢慢松开左手手指,将洗液慢慢吸入管内直至上升到刻度以上部分,等待片刻后,将洗液放回原瓶中。 11.用吸量管吸取溶液的方法? 答: 用右手的拇指和中指捏住移液管或吸量管的上端,将管的下口插入欲取的溶液中,插入不要太浅或太深,太浅会产生吸空,把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液,太深又会在管外沾附溶液过多。 12.使用吸量管和滴定管注意事项? 答: (1)在精密分析中使用的移液管和吸量管都不允许在烘箱中烘干; (2)移液管与容量瓶常配合使用,因此,使用前常作两者的相对体积的校准; (3)为了减少测量误差,吸量管每次都应从最上面刻度为起始点,往下放出所需体积,而不是放出多少体积就吸取多少体积。 滴定几乎是我们入门级的操作,作为合格的化验员我们必须将标准的操作牢记于心,才能检验出正确的结果,更好地服务客户!
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药品进眼睛了?别怕,有它!?
一、实验室洗眼器使用攻略 洗眼器是安全和劳动保护必备的设备,是接触酸、碱、有机物等有毒、腐蚀性物质场合必备的应急、 保护设施。在安装时,洗眼器喷头尽量不要与硬物磕碰,以免损坏表面光泽,要注意将管道内杂物清除后,装上洗眼器喷头。 在水压不低于0.02mpa的情况下,使用一段时间以后,如果发现出水量减小,甚至出现热水器熄火的现象,可以在洗眼器的喷头处得出水口轻轻拧下晒网罩,清除杂质。 另外,开关球阀不要用力过猛,顺势轻轻转动即可,也不要拧死,不要把手柄当成扶手来使用,洗眼器要注重日常保养,这样才能增长使用寿命。 洗眼器在使用时也要注意以下几点: 1、冲洗身体其他部位时,用手向下拉阀门拉杆,水从喷淋头自动喷出,用后须将拉杆向上复位。 2、洗眼器用于紧急情况下,暂时减缓有害物质对身体侵害,进一步处理治疗,听从医生的指导。 3、洗眼器使用时,冲洗眼部只要用手轻推手推阀,清洁水从洗眼喷头自动喷出来,用后须将手推阀复位并将防尘盖复位。 二、如何科学地选用洗眼器设备 目前市场上洗眼器种类繁多,国产和进口的都有,进口产品结构不一定符合中国人的人体工程学,可选用改进型的适合中国人的产品。洗眼器、淋洗器按类型分为洗眼、洗脸、冲淋3类型及其复合类型。 另外,冲洗软管在满足适当要求的情况下可以替代洗眼器或者复合洗眼洗脸器,但是不能替代淋洗器。冲洗软管作为洗眼器、淋洗器的有益补充,尤其适用于实验室等场所。 便携式洗眼器主要适用于没有固定水源的工作场所或者是需要经常移动工作场所的地方。 洗眼器、淋洗器主要材质有不锈钢、铜、工程塑料,应根据不同的作业场所进行选用。进口的产品一般为ABS工程塑料制造而成;国内洗眼器、淋洗器生产商基本上都使用304不锈钢,该材质符合饮用水标准,又能抵抗一般的化学物质腐蚀。 但是对于强酸如盐酸、硫酸,强碱如氢氧化钠、氢氧化钾及氯化物、氟化物等强腐蚀环境下,一般的不锈钢难以抵御,这就需要选用进口的不锈钢或者黄铜材料进行ABS浸塑的洗眼器或者具有高性能抗腐蚀的不锈钢洗眼器。 对于北方寒冷地区,还应考虑冬季出水温度很低甚至结冰等情况,可采用手动排空或者脚动排空及较先进的自动排空型洗眼器,以防止洗眼器出水管路结冰;也可采用电加热或电伴热型设备,使出水温度达到适宜温度的要求。 三、洗眼器的安装要求 安全防护设施 : 如桌上型洗眼器 、 洗眼器 、安全箱等。桌上型洗眼器要放于水槽右侧, 因中国人习惯右手操作的缘故; 洗眼器要放置在出口处 ,且室内要求配地漏; 安全箱则应放在最显眼的地方,内装急救药品。 洗眼器、淋洗器的服务半径应在15m内,保证使用者直线达到设备的时间不超过10s。设备至少要有3个方向的工作的位置,周边无障碍物,以便迅速使用。洗眼器周围应没有电器开关,以防发生意外。 所有洗眼器、淋洗器的区域必须保持一条至少1m宽的通道。同时保持一个以喷淋头为中心直径不小于1.2m的空旷区域,并且该区域必须刷成安全色。 在洗眼器和冲淋设备的周围,应有醒目的标志,标志最好用中英文双语和图示,非常形象地告诉作业现场的人员洗眼器和冲淋设备的位置和用途。可在设备上安装夜光指示标志,也可以配备防爆型的声光报警器和防爆灯,在设备使用时提醒其他人员前来救助。 洗眼器的每一个喷头上面都应该有一个防尘盖。洗眼器的阀门应该容易操作,且打开时间不能超过1s,阀门应该具有防腐蚀的功能。洗眼器的喷头应加有过滤器,避免水中的杂物对人体眼睛造成伤害。 四、洗眼器设备的维护、检修和培训 洗眼器和冲淋设备如长期不使用,水管内可能生成杂质,如果用含有杂质的水冲洗眼睛,容易引起眼部炎症,加重眼的损伤;如用来冲洗化学性灼伤引起的皮肤破损,也容易发生感染,带来严重的后果。 因此,洗眼器和冲淋设备最少每周启动一次,查看是否能够正常运行,这一频率可减少在停滞的供水管线中沉淀物积聚的机会和微生物危害成长的可能。对于可以移动的洗眼器(比如便携式洗眼器,便携式压力洗眼器),需要安排专人每天检查储备的水源是否充足。 同时建议储备的水源每天更换1次,以保证水质。每年需要对洗眼器和冲淋设备进行1次年检,查看设备是否处于完好状态。 对于长期暴露在危险作业环境下的作业人员,设备供应商应该提供更多的技术指导和正确使用洗眼器和冲淋设备的方法。作业人员心须熟知急救设备的位置,尤其当应急设备或者布局发生变动时。 应定期对作业人员进行再培训,提醒员工知道应急设备的设置不能取代利用基本的个人防护用品,如防护眼镜、防飞溅面罩、防护手套、防飞溅长袍、防化服。对于洗眼器和冲淋设备的维护、检修,生产商应该提供相应的技术培训。 五、洗眼器引发的思考 对作业场所潜在的危险有害因素和风险程度进行详细的评估,对于选择和安装适当的应急设备是至关重要的,将确保选择适宜的设备。 危险源辨识可参考化学物资的MSDS中物质的危险特性和健康危害、急救措施等条目。另外,在项目的安全预评价及安全现状评价中都有对危险源进行辨识,为危险源的确认提供了依据。 通过辨识,具有有毒物质危害、尘毒危害、低温危害、高温危害及具有化学性灼伤危害的生产车间、仓库、罐区、实验室及露天作业场所等需要设置应急洗眼器、应急淋洗器。 应急洗眼器、应急淋洗器的设备制造商也能协助对作业场所的危险源进行辨识,并作出危险性评估,为应急洗眼器、应急淋洗器的设置提供更具操作性的建议。 小结 考虑到我国目前多数地区针对化学品急性中毒的专业救治机构和专业救治队伍的建设还很不完善,因此在化工企业内或者行业实验室设置应急救援设备如洗眼器等个人防护设备,显得尤为必要,能够争取紧急救治的“黄金时间”。企业应制定完善的应急救援预案,明确岗位职责,建立实验室内部的应急救援队伍,并定期进行专业知识学习、技能培训。
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微生物
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标准味(嗅)觉参比物质配比?
氨味 amine 类似于氨水的、刺激性的、令人不愉快的气味。通常是由食品中蛋白质腐败产生的一种特殊气味,常用于描述变质的水产品、乳制品或肉制品的异常气味。 化学参比: (1)1ml氨水溶于500ml水中。 (2)1ml 25%(质量分数)的NH4OH溶于500ml水中。 薄荷味 mint 类似于薄荷或薄荷醇稀溶液的气味,一种具有清凉感的刺激性气味。 实物参比:揉碎的薄荷叶。 化学参比: (1)80mg/L薄荷醇稀-水溶液。 (2)50mg/L薄荷醇+10mg/L α-松油烯醇-水溶液。 臭鸡蛋味 rotten egg 臭鸡蛋或硫化氢产生的令人难受的、刺激的、呛鼻的气味。 实物参比:臭鸡蛋。 化学参比:硫化氢 醇香 mellow and aromatic 醇厚芳香。具有特殊的、令人愉快的香气,并带有刺激性。 实物参比:白酒、伏特加酒、白朗姆酒。 化学参比: (1)滴3-5滴酒精在嗅条或棉花团上,然后放在密闭容器中2~24h,期间保证酒精没有完全挥发。 (2)将酒精用水或油稀释至合适的浓度。 刺痛感 string;prickle;bite 一种三叉神经感。指化学刺激引起的口、舌、喉等部位的蛰刺、疼痛的感觉。 实物参比:红辣椒、姜、橙皮油、碳酸饮料。 葱味 alliaceous 由新鲜的葱散发出来的对粘膜、眼睛和鼻子具有刺激性的辣味、主要由烯丙基硫化物产生。 实物参比:葱。 化学参比:0.05%的甲基烯丙基三硫醇醇-水溶液。 粗糙 coarse 【质地】不精细、不光滑、不细致。 【口感】不细腻、不柔和、不协调。如产品酸度高、其他感觉弱,在口中产生不适的化学刺激感或口味不协调的状态。 化学参比:8g/L酒石酸水溶液。 醋味 一种刺激性酸味,特指醋或乙酸的弥散气味。 实物参比:醋。 化学参比:15mg/L乙酸水溶液。 淡薄 plain and thin; flat 形容味道不浓,回味微弱或缺乏醇厚、绵长的感觉。 实物参比:稀释2~3倍的葡萄酒或口感有缺陷的葡萄酒。 淀粉味 strategy 淀粉或富含淀粉的谷物或根茎类蔬菜的气味。 实物参比:新鲜的土豆水煮8min。 化学参比:淀粉1:10加水加热至沸腾冷却。 动物味 animal,living 俗称牲口味。指与动物饲养环境和生活场所相关的混合气味,如动物特有的体气、粪便、汗味和脂肪味等。常用于描述乳制品的气味和风味。 化学参比:1%(体积分数)甲基戊酸的丙二醇溶液。 豆味 beany 黄豆及其他豆类的特征香气。 实物参比: (1)新鲜豆子用水浸泡过夜。 (2)10g豆奶粉溶于80ml75℃水中。 (3)22g生黄豆在75ml全脂乳里浸泡30min(乳制品)。 强度参比(使用15ml线性标度): (1)Arrowhead Mills牌黄豆=4.0 (2)Kroger牌金甲豆=6.0 (3)Food Club牌青豆(罐装)=10.0 番茄味 tomato,fresh 新鲜番茄散发的一种清新气味。常用于描述葡萄酒、番茄及其制品的气味或风味。 实物参比:新鲜的番茄。 化学参比: (1)1mg/L 4-庚烯醛二乙醇缩醛醇-水溶液。 (2)3mg/L 丙酮丙二醇缩酮醇-水溶液。 肥皂味 soap 无香肥皂或月桂醛、癸醛烯溶液的气味。常用于描述乳制品以及氧化的谷物或香辛料的气味或风味。 实物参比:未加香的肥皂,搓碎。 化学参比:0.1mg/L 癸醛或0.05mg/L月桂醛醇-水溶液。 酚醛味 phenolic 一种玢类(石碳酸)物质的刺激性气味。 化学参比:5%(体积分数)的苯酚水溶液。
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抗生素残留检查法(培养法)实验步骤?
本法系依据在琼脂培养基内抗生素对微生物的抑制作用,比较对照品与供试品对接种的试验菌产生的抑菌圈的大小,检查供试品中氨苄西林或四环素残留量。 磷酸盐缓冲液(pH6.0)的制备 称取磷酸二氢钾8.0g、磷酸氢二钾2.0g,加水溶解并稀释至1000ml,经121℃灭菌30分钟。 抗生素Ⅱ号培养基的制备 称取胨6g、牛肉提取粉1.5g、酵母浸出粉6g,加入适量水溶解后,加入琼脂13~14g,加热使之溶胀,滤过除去不溶物,加入葡萄糖1g,溶解后加水至1000ml,调pH值使灭菌后为6.5~6.6;分装于玻璃管或锥形瓶中,经115℃灭菌30分钟,4℃保存。 对照品溶液的制备 取氨苄西林对照品适量,用0.01mol/L盐酸溶解并稀释成每1ml中含氨苄西林10mg的溶液,精密量取适量,用磷酸盐缓冲液稀释成每1ml中含1.0μg的溶液。 取四环素对照品适量,用生理氯化钠溶液溶解并稀释成每1ml中含0.125μg的溶液。 菌悬液的制备 (1)金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)悬液 用于检测氨苄西林。取金黄色葡萄球菌(CMCC 26003)营养琼脂斜面培养物,接种于营养琼脂斜面上,35~37℃培养20~22小时。临时用,灭菌水或0.9%无菌氯化钠溶液将菌苔洗下,备用。 (2)藤黄微球菌(Microccus luteus)悬液 用于检测四环素。取藤黄微球菌[CMCC (B)28001]营养琼脂斜面培养物,接种于营养琼脂斜面上,置26~27℃培养24小时。临用时,用0.9%无菌氯化钠溶液将菌苔洗下,备用。 检查法 取直径8cm或10cm的培养皿,注入融化的抗生素Ⅱ号培养基15~20ml,使在碟底内均匀摊布,放置水平台上使凝固,作为底层。取抗生素Ⅱ号培养基10~15ml置于50℃水浴预热的试管中,加入0.5%~1.5%(ml/ml)的菌悬液300μl混匀,取适量注入已铺制底层的培养皿中,放置水平台上,冷却后,在每个培养皿上等距离均匀放置钢管(内径6~8mm、壁厚1~2mm、管高10~15mm的不锈钢管,表面应光滑平整),于钢管中依次滴加供试品溶液、阴性对照溶液(磷酸盐缓冲液)及对照品溶液。培养皿置37℃培养18~22小时。 结果判定 对照品溶液由抑菌圈,阴性对照溶液无抑菌圈。供试品溶液抑菌圈的直径小于对照品溶液抑菌圈的直径时判为阴性;否则判为阳性。 【附注】本试验应在无菌条件下进行,使用的玻璃仪器、钢管等应无菌。
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如何用甘油保存菌液?
20%甘油保存菌种是指甘油:菌液=20:80,800ul菌液加200u灭菌l甘油后的甘油后,充分混匀后,-70度保藏.(注意甘油要慢慢吸)
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大肠菌群超标的危害及预防措施?
1、大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在。 调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主,而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。 2、大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。 大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便,也有肠道患者或带菌者的粪便,所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,潜伏着食物中毒和流行病的威胁,必须看作对人体健康具有潜在的危险性。 3、如果食品的菌落总数严重超标,说明其产品的卫生状况达不到基本的卫生要求,将会破坏食品的营养成分,加速食品的腐败变质,使食品失去食用价值。 有专家分析,造成食品中的大肠菌群超标的主要原因是二次污染,大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小,所以导致大肠菌群超标的主要原因是二次污染。如加工器具没有定期清洗消毒,操作人员在上完卫生间后洗手不彻底,个人卫生状况未达标,直接影响最终产品的卫生状况。 4、大肠菌群超标一般引起的疾病如下: a、肠道外感染。多为内源性感染,以泌尿系感染为主,如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者,大肠杆菌可侵入血流,引起败血症。早产儿,尤其是生后30天内的新生儿,易患大肠杆菌性脑膜炎; b、急性腹泻。某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻。其中肠产毒性大肠杆菌会引起婴幼儿和旅游者腹泻,出现轻度水泻,也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性,一般2~3天即愈,营养不良者可达数周,也可反复发作。肠致病性大肠杆菌是婴儿腹泻的主要病原菌,有高度传染性,严重者可致死。细菌侵入肠道后,主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。此外,肠出血性大肠杆菌会引起散发性或暴发性出血性结肠炎,可产生志贺氏毒素样细胞毒素。 预防方法: 1.保持地方及厨房器皿清洁,应该经常使用消毒柜消毒餐具器皿(最好做到“餐具要消毒”),并把垃圾妥为弃置。 2.保持双手清洁,经常修剪指甲。 3、进食或处理食物前,应用肥皂及清水洗净双手,如厕或更换尿片后亦应洗手。 4.食水应采用自来水,并最好煮沸后才饮用。 5.应从可靠的地方购买新鲜食物,不要光顾无牌小贩。不要吃不干净的东西 6.避免进食高危食物,例如未经低温消毒法处理的牛奶,以及未熟透的汉堡扒、碎牛肉和其它肉类食品。 7.烹调食物时,应穿清洁、可洗涤的围裙,并戴上帽子。 8.食物应彻底清洗。 9.易腐坏食物应用盖盖好,存放于雪柜中。 10.生的食物及熟食,尤其是牛肉及牛的内脏,应分开处理和存放(雪柜上层存放熟食,下层存放生的食物),避免交叉污染。 11.冰柜应定期清洁和融雪,温度应保持于摄氏4度或以下。 12.若食物的所有部分均加热至摄氏75度,便可消灭大肠杆菌O157 : H7;因此,碎牛肉及汉堡扒应彻底煮至摄氏75度达2至3分钟,直至煮熟的肉完全转为褐色,而肉汁亦变得清澈。 13.不要徒手处理熟食;如有需要,应戴上手套。 14.食物煮熟后应尽快食用。 15.如有需要保留吃剩的熟食,应该加以冷藏,并尽快食用。食用前应彻底翻热。变质的食物应该弃掉。
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菌种的退化现象及原因?
一、菌种的退化现象 随着菌种保藏时间的延长或菌种的多次转接传代,菌种本身所具有的优良的遗传性状可能得到延续,也可能发生变异。变异有正变(自发突变)和负变两种,其中负变即菌株生产性状的劣化或有些遗传标记的丢失均称为菌种的退化。但是在生产实践中,必须将由于培养条件的改变导致菌种形态和生理上的变异与菌种退化区别开来。因为优良菌株的生产性能是和发酵工艺条件紧密相关的。如果培养条件发生变化,如培养基中缺乏某些元素,会导致产孢子数量减少,也会引起孢子颜色的改变;温度、pH值的变化也会使发酵产量发生波动等。所有这些,只要条件恢复正常,菌种原有性能就能恢复正常,因此这些原因引起的菌种变化不能称为菌种退化。常见的菌种退化现象中,最易觉察到的是菌落形态、细胞形态和生理等多方面的改变,如菌落颜色的改变,畸形细胞的出现等;菌株生长变得缓慢,产孢子越来越少直至产孢子能力丧失,例如放线菌、霉菌在斜面上多次传代后产生“光秃”现象等,从而造成生产上用孢子接种的困难;还有菌种的代谢活动,代谢产物的生产能力或其对寄主的寄生能力明显下降,例如黑曲霉糖化能力的下降,抗菌素发酵单位的减少,枯草杆菌产淀粉酶能力的衰退等。所有这些都对发酵生产均不利。因此,为了使菌种的优良性状持久延续下去,必须做好菌种的复壮工作。即在各菌种的优良性状没有退化之前,定期进行纯种分离和性能测定。 二、菌种退化的原因 菌种退化的主要原因是有关基因的负突变。当控制产量的基因发生负突变,就会引起产量下降;当控制孢子生成的基因发生负突变,则使菌种产孢子性能下降。一般而言,菌种的退化是一个从量变到质变的逐步演变过程。开始时,在群体中只有个别细胞发生负突变,这时如不及时发现并采用有效措施而一味移种传代,就会造成群体中负突变个体的比例逐渐增高,最后占优势,从而使整个群体表现出严重的退化现象。因此,突变在数量上的表现依赖于传代,即菌株处于一定条件下,群体多次繁殖,可使退化细胞在数量上逐渐占优势,于是退化性状的表现就更加明显,逐渐成为一株退化了的菌体。同时,对某一菌株的特定基因来讲,突变频率比较低,因此群体中个体发生生产性能的突变不是很容易的,但就一个经常处于旺盛生长状态的细胞而言,发生突变的机率比处于休眠状态的细胞大得多,因此,细胞的代谢水平与基因突变关系密切,应设法控制细胞保藏的环境,使细胞处于休眠状态,从而减少菌种的退化。
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工艺技术
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实验误差,控制和消除的方法你知道吗?
一、误差的来源 一个客观存在的具有一定数值的被测成分的物理量,称为真实值,测定值与真实值之差称为误差。根据产生误差的原因,通常分为两类,即系统误差和偶然误差。 系统误差是由固定原因造成的误差,在测定的过程中按一定规律重复出现,有一定的方同性,即测定值总是偏高或总是偏低,这种误差的大小是可测的,所以又称“可测误差”。它来源于分析方法误差、仪器误差、试剂误差和主观误差,如分析人员掌握操作规程与操作条件等因素。 偶然误差是由于一些偶然的外因所引起的误差,产生的原因往往是不固定的、未知的,且大小不一、或正或负,其大小是不可测的,这类误差的来源往往一时难于觉察,可能是由于环境(气压、温度、湿度)等的偶然波动或仪器的性能、分析人员对各份试样处理时不一致所产生的。 二、控制和消除误差的方法 误差的大小,直接关系到分析结果的精密度和准确度。减少误差的措施有如下几种: 1.正确选取样品量 样品量的多少与分析结果的准确度关系很大。在常量分析中,滴定量或重量过多或过少都直接影响准确度。在比色分析中,含量与吸光度之间往往只在一定范围内呈线性关系。这就要求测定时读数在此范围内,以提高准确度。通过增减取样量或改变稀释倍数可以达到此目的。 2.增加平行测定次数 减少偶然误差测定次数越多,则平均值就越接近真实值,偶然误差亦可抵消,所以分析结果就越可靠。一般要求每个样品的测定次数不应少于两次,如要更精确的测定,分析次数应更多些。 3.对照试验 对照试验是检查系统误差的有效方法。在进行对照试验时,常常用已知结果的试样与被测试样一起按完全相同的步骤操作,或由不同单位、不同人员进行测定,最后将结果进行比较。这样可以抵消许多不明了因素引起的误差。 4.空白试验 在进行样品测定过程的同时,采用完全相同的操作方法和试剂,惟独不加被测定的物质,进行空白试验。在测定值中扣除空白值,就可以抵消由于试剂中的杂质干扰等因素造成的系统误差。 5.校正仪器和标定溶液 各种计量测试仪器,如实验室电子天平、旋光仪、分光光度计,以及移液管、滴定管、容量瓶等,在精确的分析中必须进行校准,并在计算时采用较正值。各种标准溶液(尤其是容易变化的试剂)应按规定定期标定,以保证标准溶液的浓度和质量。 6.严格遵守操作规程 分析方法所规定的技术条件要严格遵守。经国家或主管部门规定的分析方法,在未经有关部门同意下,不应随意改动。 三、分析数据的处理 通常,测定工作获得一系列有关数据以后,需按以下原则记录、运算和处理。 1.记录运算规则 主要说明食品分析中数据记录与计算,其均按有效数字计算法则进行,即: ①除特殊规定外,一般可疑数为最后一位,有±1个单位的误差; ②复杂运算时,其中间过程可多保留一位,最后结果需取应有的位数; ③加减法计算的结果,其小数点以后保留的位数,应与参加运算各数中小数点后位数最小的相同; ④乘除法计算的结果,其有效数字保留的位数应与参加运算各数中有效数字位数最少者相同; 2.可疑值的取舍 同一样品进行多次测定,常发现个别数据与其他数据相差较大,对这些不如意的数据不能任意弃去。除非分析者有足够的理由确证这些数值是由于某种偶然过失或外来干扰而剔除外,否则都应当依据误差理论来确定这些数据的取舍。 3.标准曲线的绘制 用吸光光度法、荧光光度法、原子吸收光度法、色谱分析法对某些成分进行测定时,常常需要制备一套具有一定梯度的系列标准溶液,测定其系数(吸光度、荧光强度、峰高),绘制标准曲线。在正常情况下,此标准曲线应该是一条通过原点的直线,但在实际测定时,常出现某一、二点偏离直线的情况,这时,用最小二乘方回归法绘制标准曲线,就能得到最合理的图形。最小二乘法计算,然后按回归方程式计算结果,绘制标准曲线。 4.测定结果的校正 在食品分析中,常常因为系统误差,使测定结果高于或低于检测对象的实际含量,即回收率不是100/%,所以需要在样品测定的同时用加入回收法测定回收率,再利用回收率按下式对样品的测定结果加以校正。
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化学学科
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实验室有机实验的基本知识你知道吗?
有机实验:十大原则 一、拿到一个目标化合物,一定要好好做文献检索并调阅原文,如果是已知化合物,选择一般、不是很苛刻的条件(如需要特殊催化剂、严格无水无氧等)、易于工业化的工艺来做小试;如果没有相同的化合物,选择那些相似度高的工艺。 二、对于第一次做的反应,应该了解所有用到的原料的物理、化学性质,对于反应中发生的现象也有了解(如剧烈放热、有气体放出、有固体生成等),做到心中有数,根据具体要求搭建适合的反应装置;对于所用溶剂的关键指标也要做到心中有数。 三、任何时候不要把反应装置搞成密闭体系,这是做反应的大忌,小反应可以用三通/气球,比较大的反应可以用双排管/氮气保护;所有的反应应该有二次保护,在反应瓶下面垫一个塑料盆,防止一旦反应瓶破裂,物料可以回收回来,要不然,尤其是重要的反应,你只能欲哭无泪。 四、好好计算投料表,注意原料纯度及水分,计算完毕一定要最少验算一遍,从源头上杜绝出错。 五、一定不要在精神状态不好的时候做实验,精神状态不好的时候最容易出问题,如加错原料或加错原料顺序、失误引发冲料等。 六、对于新反应,如果不确定,建议氮气保护下反应。 七、有机实验,安全第一,心中要时刻有安全意识。 八、对于小试反应,一定要认真观察反应,仔细记录反应现象,为放大积累控制参数。 九、对于需要过夜的反应,一定要等到反应平稳后再离开,注意搅拌速度,防止搅拌子突然跳起打碎反应瓶,确认冷凝管及冷凝水,防止半夜实验室水漫金山。 十、处理反应前取样监控,监控结果出来之前不要贸然处理;对于多步反应,注意每一步的中间体产物留样。 有机实验:安全知识 有机溶剂大都易燃,如乙醇、丙酮、苯等,特别是乙-醚。常用气体如氢气、乙炔等也易燃易爆。常用药品如浓硫酸、浓硝酸、浓盐酸、烧碱及溴等有腐蚀性。有毒药品也不少,如氰化钠、硝基苯和某些有机磷化合物等。因此应十分注意安全操作。 引起火灾有两个条件: (1)爆炸混合物 空气中混有易燃有机物蒸汽达到某一极限时,遇有明火即发生燃烧爆炸,称为爆炸极限,如乙-醚及苯爆炸极限均很低,约为1~2%,闪点也很低,低于0℃。 (2)火种 由于敲击、鞋钉磨擦、马达炭刷或电器开关等产生的火花。若遇着火,应沉着,立即关闭煤气,切断电源,熄灭火种。小火用湿布或石棉布扑灭;少量溶剂(如几ml)可任其烧完,转移附近易燃物质;大火须用灭火器。 四氯化碳灭火器高温时生成剧毒的光气,我国已禁止生产和使用。 二氧化碳灭火器可用以扑灭有机物及电器设备的着火。 炮沫灭火器为含发泡剂的碳酸氢钠溶液和硫酸铝溶液,使用时将筒身倾倒,二者混合反应生成大量的二氧化碳成泡沫喷出,后处理较麻烦。 注意油浴和有机溶剂不能用水浇,衣服着火不能跑,应当就地打滚或用厚外衣包裹使之熄灭。 在做有机实验时,应注意以下三点: ①不能用明火加热有机溶剂; ②蒸馏乙-醚要远离火源; ③金属钠应浸在煤油中,反应后剩下的钠用乙醇处理,磷放在煤油中。 乙-醚易生成过氧化物,蒸馏时应注意。可用KI淀粉检验,用FeSO4防止过氧化物产生。 试剂烧伤可作如下处理: ①酸 用大量水洗,3~1%碳酸氢钠溶液洗,再水洗、消毒、擦干、涂烫伤油膏。 ②碱 用大量水洗,2%醋酸液洗,再水洗,其余同上。 ③溴 水洗,酒精擦至无溴液存在为止,其余同上。 ④钠 碱同。 试剂溅入眼内作如下处理: ①酸 用大量水洗,再用1%碳酸氢钠溶液洗。 ②碱 用大量水洗,再用1%硼酸溶液洗。 ③溴 同酸。 ④玻璃用镊子移去玻璃,或在盆中用水洗,切勿用手揉动。 有机实验:常用溶剂处理 (1)乙-醚→无水乙-醚 加硫酸亚铁或亚硫酸氢钠溶液除去。 (2)乙醇→无水乙醇或绝对乙醇 (3)苯→无水无噻吩苯 用浓硫酸除噻吩,用无水CaCl2干燥。 噻吩的检验用靛红浓硫酸溶液振荡片刻,显浅蓝绿色。 有机实验:基本操作 (1)蒸馏 蒸馏装置包括以下几项: ①温度计比沸点高20℃左右,安装时使其汞球上端与蒸馏瓶支管中心成一直线。低于-38℃不能用水-银温度计,可装入有机液体如甲苯(-90℃)、正戊烷(-130℃)等。 ②等液体冷却后再加入,否则将引起暴沸。 ③冷凝管 直型冷凝管:140℃以下用水冷却;空气冷凝管:用于140℃以上。 ④接受器 三角瓶、三角吸滤瓶或蒸馏烧瓶。对易挥发、易着火、蒸汽有剧毒物质支管上应接橡皮管通入水槽,蒸馏时不断放水。蒸有毒物质应在通风橱内进行。 ⑤加热浴 80℃以下用水浴;100℃用沸水浴或水蒸汽浴;高于100℃用空气浴,100~250℃用油浴、石蜡可达220℃,甘油达140~150℃;高于200℃用硅油或真空泵油。热浴温度一般比沸点高20~30℃左右,控制馏出速度为1~2滴/秒,热浴液面应和蒸馏瓶内液面相当。 ⑥熔盐 硝酸钠和硝酸钾混合物在218℃熔化,使用到700℃。 40%亚硝酸钠、7%硝酸钾在142℃熔化,使用范围为150~500℃。 ⑦冷却 水可冷却到室温,室温以下用冰或冰水混合物。食盐和碎冰(1∶3)使用于-5~-18℃,最低-21℃;冰和CaCl2·6H2O(7~8∶10)使用于-20~-40℃;干冰(固态CO2)与乙醇混合使用到-72℃;干冰与乙-醚、丙酮或氯仿混合可达-77℃。 ⑧水蒸汽蒸馏 特别适用于有大量树脂状杂质时。提纯物必须:不溶或几乎不溶于水;在沸腾状态与水长期共存不起化学变化;在100℃时有一定的蒸汽压(不少于 1.3×103Pa)。过热水蒸汽可用于130~660Pa蒸汽压。停止操作时应先打开螺旋夹使水蒸汽通大气。然后移去热源。 ⑨减压蒸馏 采用克氏蒸馏瓶,一颈插入毛细管作为液体沸腾的汽。 ⑩减压范围 水泵为105Pa~103Pa,水温越低蒸汽压越低;油泵为103~13Pa;扩散泵为0.13~0.001Pa。 停泵操作次序:移去热源,通大气,关闭油泵。 (2)重结晶与过滤 纯化固体有机物常用合适的溶剂进行重结晶。 ①溶剂的选择 若杂质溶解度很大可留于溶液中;若杂质溶解度很小可留于残渣中。要求溶剂对纯化物质的溶解度随温度变化大,沸点不宜太高或太低,如无合适的单一溶剂时,可选用混合溶剂。 ②混合溶剂 一般由两种能以任何比例互溶的溶剂组成,其中一种易溶解纯化物质,另一种难溶解。 活性炭脱色:适用于溶液中存在着少量树脂状物质或极细的不溶性杂质。操作应注意:先将溶质溶解在热溶液中;待溶液稍冷后加入活性炭摇匀;煮沸5~10min,趁热过滤;不能在近沸的溶液中加入活性炭,否则易引起暴沸;在非极性溶剂(如苯、石油醚)中,活性炭脱色效果不好时,可用其它办法,如氧化铝吸附等。 ③过滤 应趁热进行。折叠滤纸、常压过滤(可用保温漏斗);吸滤应避免吸滤过程中结晶析出,但有时杂质也会通过滤孔或结晶堵塞滤孔。漏斗均应预热,并用热溶剂润湿滤纸。 ④结晶 迅速冷却晶体小,晶体中杂质少,但表面母液较多;慢慢冷却,晶体较大,但往往有母液留在晶体之间,也有杂质。第二次结晶时应慢慢冷却,得到的晶体均匀,性能较好。 (3)干燥剂 一类与水可逆地结合生成水合物,如H2SO4,无水CaCl2、Na2SO4、MgSO4、CuSO4、K2CO3和固体KOH等,均不能完全去水。 另一类能与水发生不可逆反应生成新的化合物,如P2O5、CaO和Na等,蒸馏时不必滤除。但制备无水乙醇时单用钠不行,因生成乙醇钠与水反应是可逆的。 应加入邻苯二甲酸乙酯或琥珀酸乙酯。 消除了NaOH逆反应,使乙醇含水量低于0.01%。 选择干燥剂应注意: ①碱性物质不能用酸性干燥剂干燥; ②CaCl2不能干燥醇、酚、胺、脂、酸、酰胺、酮、醛等,因形成分子络合物,且由于其中含有Ca(OH)2等碱性物质,不适于干燥酸性化合物。 MgSO4是一很好的中性干燥剂,可干燥许多CaCl2不能干燥的化合物。 固体KOH(NaOH)可干燥氨气、胺等物质;五氧化二磷可干燥醇类、酮类;浓硫酸只能干燥溴、烷、卤代烷。 (4)色谱分离 ①吸附色谱以氧化铝、硅胶为吸附剂,将物质自溶液中吸附到它的表面上,然后用溶剂洗脱或展开。有柱色谱和薄层色谱二种方式。 ②分配色谱以纤维素为载体,固体溶剂叫固定相,样品溶液加入后,用于洗脱的液体叫移动相。由于样品组分在二相之间分配不同、移动速度不同而得到分离。有柱色谱、薄层色谱、纸色谱三种。
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简介
职业:上海古朵生物科技有限公司 - 销售经理
学校: -
地区:上海市
个人简介:
上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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企业简介
企业名称:上海古朵生物科技有限公司
企业性质:贸易商,代理商,
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